蜜蜂卵黄原蛋白的研究进展

卵黄原蛋白(Vg)是昆虫卵黄蛋白的前体,为卵巢的发育提供营养和功能性物质。随着Western blot、免疫组化和RNAi技术的应用,证实Vg在昆虫的行为分化、增强免疫力、转化食物和延长寿命等方面也发挥重要作用,因此也被称为多功能性蛋白质。近年来对昆虫Vg的研究取得了重大突破,证实Vg不仅仅调控雌虫的繁殖过程,而且对昆虫的生命周期影响很大。以蜜蜂为例简要介绍了Vg的发生与调控,功能多效性及其研究方法等。     

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)ZZ2004株核衣壳蛋白基因的克隆及原核表达

本研究旨在克隆并表达鸡传染性支气管炎病毒（IBV）的核衣壳蛋白（N）。根据IBV ZZ2004株的N基因设计1对引物,提取IBV ZZ2004株的RNA,利用RT-PCR技术扩增大小约1.23 kb的片段,将其插入克隆载体pGEM-T构建pGEM-T-N。将pGEM-T-N用EcoRⅠ和XhoⅠ进行双酶切,将酶切后的N基因片段克隆到表达载体pGEX-6P-1,转入大肠杆菌BL21（DE3）菌中,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳,结果显示外源基因获得了表达且为可溶性蛋白;Western blotting检测结果显示N蛋白可与相应的IBV ZZ2004阳性血清发生特异性反应,结果表明N蛋白有一定的生物活性。本研究为IBV诊断试剂盒及新型IBV重组亚单位疫苗研制奠定基础。     

兔魏氏梭菌病的诊治

兔魏氏梭菌病是由A型魏氏梭菌产生的外毒素引起的兔肠毒血症,其特征为家兔发生急剧腹泻、脱水、死亡,是严重危害养兔业的传染病。本病一年四季均可发生,但多见于冬、春两季。该病传播途径主要经消化道或伤口感染。魏氏梭菌广泛存在于土壤、粪便、污水中,病兔及带菌兔的排泄物、含有本菌的土壤和水源均为该病的传染源,各年龄的兔均可感染,但以1～3月龄幼兔易感。     

绿色荧光蛋白研究进展

来源于海洋多管水母属的绿色荧光蛋白(GFP)基因是目前惟一在细胞内稳定表达,在蓝光或长紫外光的激发下,不需要任何反应底物及其他辅助因子就能发出绿色荧光的新型报告基因,无种属、组织和位置特异性,且能监测基因表达、信号转导、共转染、蛋白运输与定位,以及细胞系谱分类等。GFP对细胞无毒性,且检测方法简单,结果真实可靠,目前在多种原核和真核生物研究中得到广泛的应用。文章就GFP的生化特性、GFP的改进及其在分子生物学研究中的应用潜力进行简要阐述。     

单增李斯特氏菌ActA的原核表达与纯化

PCR扩增单增李斯特氏菌ActA基因,纯化后克隆到pMD 18T simple vector 中,以BamHI和EcoRI双酶切克隆载体pMD-18T/ActA,再将其亚克隆到表达载体pGEX-3X中,获得重组质粒 pGEX-3X/ActA,转化E.coli BL21(DE3)细胞,IPTG诱导融合蛋白(GST-ActA)表达,Western blot分析表明该蛋白可与单增李斯特氏菌多克隆抗体发生特异性反应.试验采用Glutathione Sepharose 4B亲合层析纯化融合蛋白.对单增李斯特氏菌ActA的原垓表达与纯化的研究为单增李斯特氏菌诊断试剂的研制及Acth的免疫原性研究奠定了基础.     

猪轮状病毒重组VP7蛋白抗原间接ELISA诊断方法的建立

本研究以纯化的原核表达的猪轮状病毒VP7抗原表位区域为抗原,建立了检测猪轮状病毒抗体的间接ELISA诊断方法。特异性试验表明,该抗原与其他7种常见猪病病毒（TGEV、PEDV、CSFV、PCV2、PRRSV、PPV、PrV）的阳性血清不发生交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于10％;对来自不同猪场的血清的检测结果表明,该ELISA方法与中和试验检测结果符合率达94．8％。本试验建立的ELISA诊断方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,为PRV的快速诊断、免疫猪群抗体监测和轮状病毒流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断方法。     

羟基磷灰石及其复合材料在骨组织工程中的研究进展

羟基磷灰石作为生物陶瓷材料广泛应用于硬组织损伤修复.纳米级羟基磷灰石既具有纳米材料的特性,又具羟基磷灰石本身的特性,适于骨组织工程支架材料的构建.本文综述了羟基磷灰石与胶原、聚乳酸、壳聚糖及丝素蛋白复合材料的性能和国内外相关研究成果,并简述了组织工程材料的发展趋势.     

2型鸭疫里默氏菌42 000外膜蛋白的克隆与表达

利用PCR技术扩增了标准血清2型鸭疫里默氏菌的42000外膜蛋白基因片段（OmpA-2）1045bp,将其克隆到pGM-T-Easy克隆载体和pGEX-4T-1原核表达载体中,分别构建了pGM-OmpA-2和GST-OmpA1-2重组子,并进行了测序和表达。对表达产物做了SDS-PAGE和Western-blotting检测。结果表明,扩增获得的外膜蛋白基因序列与Gen-Bank中已发表的鸭疫里默氏菌外膜蛋白序列的同源性为95.4%,氨基酸序列间仅存在点置换,无插入或缺失变异,证明重组子构建正确。SDS-PAGE和Western-blotting检测表明,获得的融合表达蛋白GST-OmpA1-2的相对分子质量约为65000。     

兔传染性口腔炎的治疗

兔传染性口腔炎多发于春、秋两季,多因饲养管理不当造成此病传染发生,如饲喂霉变、坚硬、刺嘴的饲料,饲草不卫生,缺乏饮水和饲料突变等。仔幼兔易发此病。病毒可通过舌头、嘴唇和口腔黏膜而传染。笔者2005～2007年采用中西医结合治疗方法共治疗2068例,治愈1965例,治愈率为95％,效果较好。     

中西医结合治疗猪传染性胃肠炎

随着我国畜牧养殖业经济的快速发展,在这种大环境下,相应的疾病开始应运而生。猪传染性肠胃病是养猪业常见的疾病,具有较高的传染性和致死性,由于该病的扩散速度较快,会造成猪群的大范围感染,加重了病情的发展,并导致养猪业严重的经济损失,是养殖户在生猪养殖过程中面临的一大难题。本文通过对传染性胃肠炎的病因及临床病症进行分析与研究,并结合中西医治疗的手段来有效防治猪传染性胃肠炎,旨在保障猪群的健康生长,促进养猪业经济的可持续发展。