广昌白莲活性蛋白提取工艺研究

[目的]研究广昌白莲蛋白的提取工艺,找出最佳的提取条件。[方法]分别采用直接提取、酸化提取和碱化提取3种不同的方法对广昌白莲蛋白进行提取,并利用正交试验设计来确定其最佳的料液比、pH值和浸提时间。[结果]广昌白莲的最佳提取工艺条件∶料液比1∶15、pH值7、浸提时间20h,此时的蛋白提取率为5.79%。[结论]该研究为广昌白莲活性成份的提取提供了参考依据。     

污染作物籽实中Cu的分布、结合形态及其毒性

采用组织化学及生物化学试验方法，研究了污染作物籽实中Cu的结合形态。结果表明，Cu在籽实各形态结构中的分布不均，以富含蛋白质的胚中浓度最高，以粗纤维和纤维素为主的种皮中浓度也较高；在籽实的主要营养成分中，以蛋白质的分布比例最高，脂肪中很少；在籽实不同类型蛋白质的分布比例也有差别；谷物经过深加工后，Cu污染可得到明显减轻。     

羽毛蛋白粉高效利用研究

采用物理加工与生物加工结合的方法，即先超微粉碎至微米级后再用解朊酶进行体外水解处理的方法对羽毛粉进行饲料化研究，通过研究发现经处理的羽毛粉比对照组（未经处理过的羽毛粉）的可溶性蛋白质含量和溶解度分别比原来增加了3.37倍和3.38倍，胃蛋白酶消化率提高了15%，表明此加工工艺可大大提高羽毛粉的生物学效价。     

稻褐飞虱呼肠孤病毒的核酸结合蛋白

采用Northwestern分子交杂方法，研究了稻褐飞虱呼肠孤病毒（NLRV）结构蛋白的功能，结果证明被推测为RNA聚合酶的P1蛋白、B突起的P2蛋白、NTP结合的P7蛋白和主要的病毒外层蛋白的P8蛋白是非特异性核酸结合蛋白，具有与单链或双链RNA和DNA4种核酸结构的能力，暗示了这4种蛋白在NLRV病毒核酸复制，病毒粒子包装中起作用。     

新城疫病毒F48E8株核衣壳蛋白基因在鸡痘病毒中的表达及其部分序列分析

通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增了新城疫病毒(NDV)F48E8株核衣壳蛋白(NP)基因,并克隆到pUC18中,得阳性克隆pUCNP.应用分子克隆技术,将NP基因导入鸡痘病毒(FPV)转移载体pFG1175-1中P7.5启动子的下游,得到含NDV NP基因的质粒pFGNP1175-1.利用脂质体转染技术,将该质粒转染FPV疫苗株282E4感染3～4 h的鸡胚成纤维细胞,采用蓝斑筛选方法纯化多次,得到稳定的重组FPV.用狄高辛标记的探针进行斑点杂交实验,结果表明pFGNP1175-1已与FPV 发生同源重组;用抗NDV的SPF鸡的阳性血清进行间接免疫荧光实验,证实重组FPV在感染细胞中表达了F48E8株NP蛋白.该基因两端部分序列与已发表的D26株NP基因对应区域的核苷酸同源性为89.1%,推断的氨基酸同源性则为93.1%.     

甘薯原料气升式生物反应器发酵生产单细胞蛋白

以甘薯为原料,采用少孢根霉ＡＳ３．４３９２与树状假丝酵母混合发酵工艺,在无筛板、带一块和带二块筛板的气升式生物反应器中发酵４８ｈ后的干基粗蛋白的含量分别为４６．４％、４７．１％、４７．７％。试验结果表明,气升式生物反应器的发酵结果优于机械搅拌式生物反应器,而带筛板的气升式生物反应器又优于不带筛板的气升式生物反应器。在氧传递性能考察中,发现气升式生物反应器内加装筛板可以有效地强化氧传递     

十字花科植物CYP86MF同源基因的克隆及特征分析

用保守的特异引物进行PCR扩增，并结合RACE技术，从大白菜(Brassicacampestris L．)品种黄芽14，萝卜(Raphanus sativus L．)品种圆白和诸葛菜(Orychophrogmus violaceus)3个材料中扩增到3个完整的cDNA全长，分别命名为Bc-CYP86MF，RsCYP86MF和OvCYP86MF，它们的cDNA全长分别为1854，1818和1876bp，分别编码524，526和534个氨基酸残基。将所推导的氨基酸序列与数据库中已知基因进行排序，发现它们与拟南芥CYP86家族所有成员的氨基酸相似性都大于38％，可将它们归为细胞色素CYP86基因家族。BcCYP86MF和RsCYP86MF与CYP86C4亚家族氨基酸同源性均大于55％，则可归为CYP86C4亚家族，而OvCYP86MF与CYP86C3的同源性最高，为86．5％，应归为CYP86C3亚家族。根据氨基酸序列的排序结果构建的系统树表明，CYP450基因的氨基酸序列进化程度与物种的亲缘关系的远近相吻合。对蛋白二级结构预测结果发现，它们都具有细胞色素P450典型的保守结构域FNAGPRLCIG，而且氨基酸组成也很相似。     

小麦胚乳贮藏蛋白高分子量谷蛋白亚基1Dy10单克隆抗体的制备

利用杂交瘤法制备了小麦胚乳贮藏蛋白高分子量谷蛋白亚基的单克隆抗体，根据与不同ＨＭＷ－ＧＳ的反应强度，所制备的８株抗体可分为３种类型：一是广谱型；除与抗原ＨＭＷ－ＧＳ １Ｄｙ１０反应外，还与其它各ＨＭＷ－ＧＳ发生一定强度的反应；二是中间型。     

重金属超富集植物龙葵对镉响应的蛋白组学分析

龙葵是典型的重金属超富集植物,但是我们对其重金属耐受和超富集的分子机理仍不完全清楚。为了从蛋白组学层面探究重金属超富集植物龙葵如何响应金属镉,本研究采用双向电泳和MALDI-TOF MS分析方法,鉴定了重金属超富集植物龙葵叶片和根中Cd胁迫下差异表达的蛋白。双向电泳在根和叶片中分别至少得到927和1 025个蛋白点,其中Cd胁迫下差异表达的蛋白点在根中有45个,叶片中有57个。采用MALDITOF MS分析,在根和叶片中分别鉴定了9个和12个蛋白点,分别代表了9个和6个差异表达的蛋白。生物信息学分析表明,这些蛋白涉及到激素合成、防御响应、能量代谢和细胞结构等。这些结果为进一步揭示重金属超富集植物龙葵响应Cd胁迫的分子调节机制,以及为通过现代生物技术手段进行重金属污染的植物修复提供了理论依据。     

苏云金芽孢杆菌抗癌的研究进展

最近研究发现某些非杀虫的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt)株系的伴孢蛋白对体外培养的人癌细胞（MOLT－4，HeLa)具有毒杀能力。这类蛋白不属于已知的任何一种Cry/Cyt蛋白，其抗癌活性需经蛋白酶水解活化，所导致的细胞病变有明显的核凝聚和细胞肿胀过程。这个发现可能导致Bt在医疗上的新应用。文章综述了国外一些研究的新进展以期对国内的Bt研究提供新的思路。