植物细胞核蛋白质组学研究进展

细胞核储藏有植物体的主要遗传信息。植物细胞核蛋白质组的动态变化直接影响植物基因表达调控,进而调节植物生长发育与环境应答过程。细胞核蛋白质组学研究为解析植物发育与逆境应答的分子机制提供了重要信息。综述了近年来植物细胞核蛋白质组学研究的进展,以促进其进一步研究。     

供核细胞来源对猪克隆胚胎发育的影响

为研究不同组织来源的供核细胞对猪体细胞核移植胚胎发育能力的影响,分别采用颗粒细胞、耳成纤维细胞和尾成纤维细胞作为供核细胞,移入体外成熟的猪去核卵母细胞中形成重构胚,培养后对比其卵裂率和囊胚率。结果表明：以耳成纤维细胞作为供核细胞的重构胚的囊胚率最高,为17．8％,显著高于颗粒细胞（11．4％）（P〈0．05）。在卵裂率方面,两者无显著差别,分别为65．6％和61．9Voo（P〉o．05）。猪尾尖成纤维细胞的发育能力最差,卵裂率仅为20．2％且未获得囊胚,与其它两组差异显著（P〈O．05）。因此,耳组织来源的成纤维细胞作为供核细胞组织来源丰富且细胞易于传代和保存,以此为供核细胞的重构胚发育能力强,适合作为供核细胞。     

生产转基因五指山小型猪重构胚条件优化

利用体细胞核移植技术是得到具有优良特征及抗病性五指山小型猪快速有效方法,因此将外源基因安全高效导入到供核细胞至关重要。利用不同转染试剂、转染方法对转染效率进行研究,确定G418筛选浓度。同时利用体细胞核移植技术生产转单体红色荧光蛋白重构胚。结果表明,使用U-023细胞核电转程序能有效介导质粒pCX-mRFP1转染猪耳成纤维细胞,转染率可达到83.33%。确定G418最佳筛选浓度为200μg.mL-1。利用转基因细胞作为核供体生产重构胚卵裂率是83.08%(221/266),囊胚率是11.65%(31/266)。研究结果为生产表达单体红色荧光蛋白五指山小型猪提供参考,从而为人类疾病发病机理研究以及生产人类疾病模型动物奠定了基础。     

黄麻四倍体植株研究简报

细胞核中的染色体是遗传基因的主要载荷者,染色体发生的结构变异和数量变异必然会引起相应的遗传效应。由于染色体数的倍增,植物的组织器官、生理功能、发育、形态以及产量、品质等方面都会发生巨大的变化,并且常常具有优良的特性     

分离缓冲液对水稻细胞核悬液DNA分辨率效应的比较

为制备高纯度水稻细胞核悬液供FACSCalibur流式细胞仪使用,选用6种细胞核分离缓冲液制备样品,对其DNA分辨率效果进行比较,Otto buffers和Marie’s nuclearisolation buffer表现分辨率较高,细胞G0/1峰产生的变异系数较低(CV分别为3.57%和3.41%);其中Otto buffers的组分较Marie’s nuclear isolation buffer简单、成本低,且能在正常室温条件下分析和保存。虽然在细胞核悬液中Tris-MgCl2buffer显示最低的CV值(3.19%),但产生较多的背景碎片。而其余3种缓冲液(Lysis buffer LB01,Galbraith’s buffer和Arumuganathan’sbuffer)的变异系数均较高(分别为4.75%,6.28%和6.73%)。结果表明采用Otto buffers分离缓冲液制备细胞核悬浮液,能实现苗期对水稻花粉植株的不同倍性(单倍体、二倍体、三倍体等)快速鉴定。     

毛华菊二居群的细胞核型比较

对毛华菊的安徽居群（ＭＰＡ）和河南居群（ＭＰＨ）的核型了研究和比较,ＭＰＡ和ＭＰＨ都为６倍体,染色体观察表明：ＭＰＡ的核型为２Ａ,ＭＰＨ为２Ｂ,两者都具有染色体呈现多样性特征。     

利用成年母兔耳部皮肤上皮细胞生产克隆胚胎的研究

本研究以成年母兔耳部皮肤上皮细胞为核供体，对兔体细胞核移植技术中融合、激活以及不同来源受体卵母细胞的选择等环节进行了研究，比较了不同电场强度对重构胚胎融合率、分裂率的影响。结果表明，细胞在培养10代后仍增殖旺盛，呈多角型，具典型的上皮细胞形态。     

水稻杂种细胞核行为和DNA含量与杂种优势的研究

 利用MIPS-1分析仪研究了11个亲本和9个杂种的细胞核行为和DNA含量，同步测定了每个细胞减数分裂前期、中期、后期和末期的光密度值、集分光密度值以及细胞核的大小。所测定亲本和杂种的4401个细胞的计算机分析结果表明：9个杂种的平均集分光密度值显著高于亲本，但光密度值比亲本的低，杂种的细胞核特别是在减数分裂的前期显著增大。因此，在F1杂合状态下，细胞核中DNA含量增加，而DNA密度下降，这可能有利于基因的表达，从而促进杂种优势的表达。     

无透明带体细胞核移植研究进展

目前,体细胞核移植主要还是沿用Willadsen发明的显微操作的去核、注核、融合和激活来完成。由于其核移植效率较低,且对仪器设备和技术人员的要求较高,因此,简化并建立一套更适合于生产条件下的体细胞核移植程序,从而提高核移植效率一直是人们所不懈努力的。作者就无透明带核移植技术和单个胚胎培养系统作一介绍。     

花生果壳褐斑病的研究

花生果壳褐斑病是我国花生主产区发生的一种新病害。本试验对该病的病原菌进行了分离培养,细胞核染色及菌丝融合实验,明确了该病原菌的分类地位,菌丝及菌落生长特点,细胞核数目及其与叶部菌核病原菌的融合状况。确定了该病菌属于双核丝核菌,即禾谷丝核菌（Rhizoctonia cerealis）,与花生叶部菌核病菌（Rhizoctonia solani）不能发生菌丝融合,属于丝核菌的不同种群。