浅谈猪冷冻精液制作技术要点

随着生猪产业的发展、地方猪种遗传资源保护意识的日益提高以及疫情防控的需要,猪冷冻精液制作越来越受到重视,并成了现代生猪育种和生产的重要手段.本文从种公猪饲养管理、采精准备、操作及鲜精处理、冻精制作等方面,介绍了猪冷冻精液制作的全过程.     

山羊细管冷冻精液的生产

冷冻精液主要是利用液态氮(-196℃)作为冷源,将经过特殊处理后的精液进行冷冻,保存在超低温下以达到长期贮存的目的.山羊的精子由于不耐冷冻,冷冻精液配种受胎率较低,一般生产上情期受胎率只有40%～50%,部分试验受胎率可达70%～80%.山羊精液冷冻保存技术的研究,国外从上世纪六十年代起已试用山羊冷冻精液输精,据各国报道,到八十年代平均受胎率达60%左右,山羊冻精受胎率比绵羊高.由于山羊冷冻精液的特异性,我国山羊精液冷冻保存技术的研究从上世纪八十年代才开始,进展不如牛的快,但现在已有许多地区在使用山羊冷冻精液输精.为此,作者总结本站的经验,对山羊冻精的生产和应用作一论述,供同行参考.     

经营服务方式对肉牛冷配受胎率的影响

牛冻精改良技术是应用良种牛的冷冻精液对低产母牛进行配种,以提高其后代的生产性能的一种繁殖技术。因其具有充分利用优秀种公牛的种用价值,提高受胎率,防止疾病的传染和母牛配种不受地域的限制和克服公母牛体型的极大差异等优点被广泛推广。然而,在推广中,不同的服务方式对冷配受胎率的影响日益加大。     

卵黄对精子保护作用的机制

在过去的60年里,冷冻精液稀释液的配方发生了很大的变化,但是其中的抗冻剂却始终是卵黄、奶及甘油.由于卵黄在保存、降温、冷冻过程中对精子的保护作用机制仍是不解之谜,因而目前尚无一种有效的可避免污染的化合物来替代他们.     

牛GV期卵母细胞冷冻保存后发育潜力的研究

二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PROH)、乙二醇(EG)和甘油(GL)4种冷冻保护剂程序化冷冻牛GV期卵母细胞的结果表明,EG和PROH的保护效果比GL和DMSO好。4种不同冷冻方法冷冻保存牛GV期卵母细胞,比较解冻后卵母细胞的体外成熟率、受精后卵裂率。结果表明,在程序化冷冻法与细管玻璃化法(Straw)之间的差异不显著(P>0.05),在开放式拉管法(OPS)与毛细玻管法(GMP)之间的差异不显著(P>0.05);但OPS和GMP与程序化冷冻法和Straw之间的差异极显著(P<0.01)。玻璃化冷冻效果优于程序化冷冻。说明GMP和OPS玻璃化冷冻优于Straw玻璃化冷冻。说明可以采用GMP方法冷冻保存牛GV期卵母细胞。     

哺乳动物胚胎冷冻技术的研究进展

胚胎冷冻保存已广泛用于胚胎移植、动物克隆以及动物资源保护.此技术的应用需保证胚胎在冷冻-解冻后具有较高的成活率.自从1972年小鼠胚胎冷冻保存获得成功以来,许多学者在简化冷冻程序,缩短冷冻时间,方面进行了深入的研究.本文就胚胎冷冻的原理、保护剂、冷冻方法以及解冻方法等方面进行了综述.     

两种物理方法破碎大肠杆菌比较试验

采用超声波和反复冻融两种物理方法,对一定浓度的标准致病性大肠杆菌进行破碎率比较试验。结果表明:在试验条件下,超声波破碎法达到97%以上的破碎率所需时间为30~50min,尤其是菌液浓度为每毫升50亿,用Ф10变幅杆破碎,30min破碎率可达99.9%。而反复冻融破碎,无论液氮的低温冷冻人为速溶或自溶,还是采取冷冻箱的冻融,达到50%以上的破碎,要耗时数小时,且要经过预冷冻的过程。     

丙酮酸盐对牛精液冷冻效果的影响

在常用的果糖-柠檬酸钠-卵黄-甘油液的基础上,分别添加1.25 mmol/L或2.00mmol/L的丙酮酸钾、丙酮酸钠或丙酮酸钙,以观察丙酮酸盐在牛精液冷冻中的应用效果。冷冻前各组稀释液隔15min分2次加入,之后平衡4h。结果表明,各组精子的冻后活力、复苏率、畸形率和顶体完整率之间没有显著差异,但6个试验组的冻后活力、复苏率和对照组相比有提高趋势。     

胚胎冷冻技术及其在转基因小鼠中的应用

随着生物工程技术的发展,出现了许多生物工程小鼠品系,促使胚胎冷冻技术得到了广泛应用。胚胎冷冻技术不仅为转基因动物提供可用胚胎,还使胚胎移植不受时间、地域限制,简化引种过程,防止疾病传播,为建立优良动物的胚胎库提供了条件。综述了几种常用的胚胎冷冻方法及其在转基因小鼠中的应用研究,指出了胚胎冷冻方法存在的主要问题,并展望了其发展前景。     

日本鲟肌动球蛋白热变性和冷冻变性

研究了日本鲟肌动球蛋白经变性和冷冻后ＡＴＰａｓｅ活性、总巯基数和不饱和巯基数及蛋白质浓度的变化。结果表明,热变性后肌动球蛋白Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性下降,且Ｃａ＾２＋－－ＡＴＰａｅｓ活性有明显转折。低温热变性对总巯基数影响较小,温度增高时,巯基数逐渐下降,而不饱和巯基数在３０℃之前,呈动态变化,之后又逐渐减少。热变性后,肌动球蛋白浓度也降低。冷冻变性后,肌动球蛋白ＡＴ