马铃薯真菌病害拮抗菌株鉴定及初步应用

针对马铃薯真菌病害发生严重、多种病害混合发生、缺乏安全有效防治方法的问题,对前期筛选出的高效拮抗 菌株BA-26 进行分类鉴定,研究其胞外代谢产物的稳定性,明确防病促生作用。通过形态特征、生理生化特性鉴定以及 16S rDNA 序列分析,BA-26 菌株为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）,该菌株对8 种马铃薯病原真菌均表现出 较强的拮抗作用,对茄链格孢菌（Alternaria solani）、茄病镰刀菌（Fusarium solani）、燕麦镰刀菌（Fusarium avenaceum） 的抑菌率大于80%;胞外代谢产物经100 ℃处理30 min、紫外照射8 h、pH 2～10 酸碱处理、蛋白酶处理1 h 后,相对抑菌 率均维持在80% 以上;室内抑菌活性测定结果表明BA-26 滤液对茄病镰刀菌的抑制率为91.3%;盆栽试验中,每盆施用 20 mL 浓度为4.0×10⁹ cfu · mL^-1 的BA-26 发酵液使马铃薯根长、须根数、株高、叶片中叶绿素含量分别显著增加32.07%、 111.94%、48.0%、19.6%。表明解淀粉芽孢杆菌BA-26 对马铃薯真菌病害抑菌谱宽,胞外代谢产物稳定性强,有较强的防病 促生作用,具有开发为马铃薯专用生防菌剂的潜力。     

我国南方常见的6种寡毛实蝇PCR-RFLP快速鉴定研究

应用PCR—RFLP技术,对我国南方发生和诱捕到的6种寡毛实蝇开展了快速鉴定方法研究,结果表明,设计出的2组引物对6种供试实蝇线粒体DNA(mtDNA)的PCR扩增片断大小分别约为350bp和450bp。用限制性内切酶MSEI和DRAI对PCR扩增产物进行酶切,得到的酶切位点可将供试的6种实蝇区分开来。该方法不受供试实蝇食物源的影响,对各种虫态(卵、幼虫、蛹)和不同性别的成虫均适用,可用于实蝇的快速鉴定。     

绞股蓝RIP基因双子叶植物表达载体的构建及其对烟草叶盘的转化

将绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)核糖体失活蛋白(Ribosome-Inactivating Protein,RIP)cDNA序列(GenBank登录号AY279219)插入到pKYLX71:35 S^2植物表达载体的HindⅢ/SacI位点处,构建了适于在双子叶植物中表达的载体,并经三亲交配法转入土壤农杆菌LBA4404,用于转化烟草品种K-326,分子鉴定表明绞股蓝RIP基因已经整合到再生烟苗的基因组中并发生了转录。     

转蚕丝芯蛋白基因获得高强纤维棉花植株

采用花粉管通道技术,将棉纤维细胞特异表达启动子(E6)驱动的蚕丝芯蛋白基因导入陆地棉品种"泗棉3号"。共注射600朵花,收获497粒种子。通过GUS报告基因组化检测筛选,获得5株GUS阳性棉株。又经卡那霉素涂叶法鉴定,其中4株具有良好的卡那霉素抗性。用依据E6启动子序列和蚕丝芯蛋白基因序列设计的两对引物,对这5株棉花进行PCR扩增,获得1株转蚕丝芯蛋白基因棉株。纤维品质测定结果表明,这株转蚕丝芯蛋白基因棉花T1代纤维比强度达到34.6cN/tex,比对照"泗棉3号"(比强度为28.6cN/tex)提高了21.0%,T2代纤维比强度比对照平均增高23.3%。     

三株香猪源多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

为确定从青岛某香猪养殖厂病死猪组织内分离到的致病菌,本试验通过病原菌形态观察、16 S rRN A扩增和生化试验对其进行鉴定,并对该致病菌进行药物敏感性试验、动物致病性试验及血清型鉴定.结果表明,3株分离菌均为多杀性巴氏杆菌,荚膜血清型均为A型;动物致病性试验结果显示该菌致病力较强,对小鼠的半数致死量(LD50)为1....     

单增李斯特菌谷氧还蛋白Grx负调控渗透转运系统OpuC转录

旨在通过构建单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)谷氧还蛋白(glutaredoxin,Grx,由lmo2344编码)的基因缺失株以研究其与渗透转运系统(OpuC)相关基因转录的调控关系.LM基因缺失株采用本实验室已建立的同源重组方法构建并筛选获得.利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和绿...     

鸽源霉形体的分离与鉴定

对照株及标准抗血清 MMP1、MMP4、鸽霉形体694株及3种相应的抗血清。培养基 修改的F14-6培养基(含葡萄糖)、精氨酸培养基。试验鸽 武汉市郊某养鸽专业户及市场上购买的食用鸽共70只。     

甘蓝品种纯度的早期鉴定

对甘蓝品种“渝丰三号”正交（Ａ）和反交（Ｂ）幼嫩种子的酯酶同工酶酶谱纯度检查结果表明,正交（Ａ）和反交（Ｂ）种子酶谱纯度分别为９４％和９６％,正反交种子田间纯度为９２％和９６％。２种鉴定结果高度吻合,证明甘蓝品种早期酶谱纯度鉴定方法是可靠的。     

转基因马铃薯外源CP基因转录表达与病毒在寄主体内复制关系

以表达马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）外壳蛋白（ＣＰ）基因的转基因条件下马铃植株为供试材料,在接种病毒后续发感染条件下提取转基因植株ＲＮＡ,用克隆的病毒ＣＰ基因ＣＤＮＡ为探针进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析,用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定病毒含量,结果表明,转基因植株体内病毒积累量明显低于未转基因的对照植株,转基因植中外源ＣＰ基因的转录表达水平与病毒在体内的复制呈负相关。     

月季花瓣衰老过程中可溶性蛋白的SDS—PAGE分析

对月季花瓣衰老过程中可溶性蛋白的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ进行了分析,结果表明,蛋白条带变化表现出３种情况：（１）从瓶插开始到结束蛋白条带基本保持稳定;（２）随花瓣衰老,蛋白条带逐渐减弱、消失;（３）随着花的衰老,有新的蛋白条带出现。对花进行ＡＢＡ或乙烯促衰处理,也导致相应的某些蛋白条带的变化,说明这些蛋白的变化可能与衰老有关。