玉米γ-生育酚甲基转移酶基因的克隆与分析

[目的]对玉米γ-生育酚甲基转移酶（γ-TMT）基因进行克隆和分析研究。[方法]通过RT-PCR扩增得到玉米γ-TMT基因的cDNA序列,同时对序列进行同源性分析、氨基酸序列比对和系统进化分析。[结果]玉米γ-TMT基因cDNA全长1 310 bp,包含一个长为1 059bp的完整开放读码框,推导的氨基酸序列与小麦和水稻等高等植物的γ-TMT基因同源性较高,序列一致率为69%～87%;与低等生物褐藻的序列同源性较低,一致率只有56%。系统进化分析表明不同来源的γ-TMT基因可聚为3类。[结论]为进一步研究γ-TMT基因的功能奠定了基础。     

不同产地的紫苏籽油活性成分检测与主成分分析

为评价油品质与营养功能,有效开发不同产地的紫苏籽油,收集19个产地的紫苏籽,分析了油的理化性质,脂肪酸、维生素E、植物甾醇等活性成分的组成及含量。结果发现：紫苏籽油主要含有棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸五种脂肪酸,亚麻酸含量58.8%～70.9%,不饱和脂肪酸含量91.1%～93.8%;紫苏籽油含有△-5燕麦甾醇、菜籽甾醇、β-谷甾醇及环阿廷醇,总甾醇含量67.0mg/100g～94.4mg/100g;紫苏籽油含有α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚,γ-生育酚占总生育酚含量95%左右,总的生育酚含量为63.4mg/100g～99.4mg/100g。通过主成分分析及主成分中各性状载荷分析发现,α-亚麻酸、γ-生育酚、菜籽甾醇是紫苏籽油的特征活性成分,对不同产地的紫苏籽油差异影响较大。对紫苏籽油的12个脂溶性活性成分进行分层聚类热图分析,可将19个产地的紫苏籽油分成6大类。      

油棕等植物γ-生育酚甲基转移酶的生物信息学分析

油棕果实中含有丰富的维生素E,而提高其中高活性的维生素E组分是改善棕油品质的关键。油棕γ-生育酚甲基转移酶(Gen Bank登录号为AEU17779)能将低活性的γ-生育酚三烯催化生成高活性的α-生育酚和α-生育酚三烯,是控制油棕维生素E组分和活性的关键酶,其功能在油棕等许多植物中极其保守。本研究利用生物信息学相关软件对以油棕VTE4基因为主要分析对象的一些植物VTE4基因的核酸和相应的氨基酸序列的组成成分、疏水性/亲水性、跨膜结构域以及功能结构域等进行分析。结果表明:VTE4属于不具有信号肽的亲水性蛋白,可能作为转运蛋白在叶绿体中发挥作用,α-螺旋和无规则卷曲大量散布于整个蛋白质二级结构中,具有S-腺苷甲硫氨酸结合位点和PLN02244保守结构域。这一结果可为油棕等植物VTE4的功能和分子机制研究提供更多详细的参考。     

基于物联网的农田环境监测无线传感器网络的管理

针对农田环境监测无线传感器网络中网络节点电量和处理能力有限等特点,分别从网络拓扑管理、位置管理、能量管理和故障管理等4个方面提出了一套完整的网络管理方案,以对网络运行状况进行监测和管理。为了用户能够远程监控和管理无线传感器监测网络,开发了远程监控管理平台,该平台由后台数据库和前端监测管理软件组成。试验结果表明,所提出的网络管理方案,能够实时监测网络的运行情况,及时诊断网络中的异常,保障了网络正常运行、数据实时传输;所开发的远程监控管理平台人机交互界面良好、功能完善、运行稳定,实现了用户对无线传感器监测网络的远程管理和对农田环境的有效监测。     

饲粮中添加α-生育酚对生长肥育猪生长性能、抗氧化能力、肉品质及肌纤维类型的影响

为研究饲粮中添加α-生育酚对生长肥育猪生长性能、抗氧化性能、肉质及肌纤维类型的影响,试验选取120日龄、体重相近(60 kg)的生长肥育猪(长白×大约克二元阉公猪)72头,随机分为两个处理组,每个处理组6个重复,每个重复6头猪,分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+75 mg/kg α-生育酚(α-生育酚组)。经7 d预试期后,进入正式试验45 d。试验期间记录猪的采食量,试验结束后称重;试验结束后,每个重复随机挑选1头(共12头)进行屠宰采样,采集血清测定抗氧化能力、背最长肌进行肉品质检测,通过荧光定量PCR分析肌肉组织中肌球蛋白重链MyHC亚基基因的mRNA表达量。结果表明,与对照组相比,α-生育酚组猪的平均日增重、料重比均无显著差异(P>0.05),血清中丙二醛含量极显著下降(P<0.01),背最长肌中胶原蛋白含量显著上升(P<0.05)、MyHCⅠ的含量显著上升(P<0.05),MyHCⅡb含量显著下降(P<0.05)。结论,饲粮中添加α-生育酚能提高猪血清抗氧化能力,改变背最长肌中肌纤维的类型,改善肉品质。     

维生素E对半滑舌鳎垂体α-生育酚转移蛋白基因表达的影响

生育酚转移蛋白(α-tocopherol transfer protein, α-TTP)是一种可以结合维生素E的蛋白,在协助机体转运和调控维生素E含量等方面起到重要作用。维生素E能够影响鱼类垂体中生长和繁殖相关激素的分泌,这是否与α-TTP有关,值得进一步探讨。本实验旨在探究维生素E对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)垂体α-TTP基因表达的影响。在基础饲料中分别添加维生素E(DL-α-生育酚乙酸酯) 0、200、400、800和1 600 mg/kg,对半滑舌鳎成鱼(464.0±2.6) g进行持续60 d的养殖实验;另外,在L-15培养基中添加0、18和54μmol/L的维生素E,对半滑舌鳎垂体细胞进行为期3 d的体外原代培养实验。分别取垂体组织和垂体原代细胞,克隆α-TTP基因,并通过实时荧光定量PCR分析α-TTP基因相对表达量。结果显示,α-TTP基因全长3 964 bp,编码293个氨基酸;α-TTP基因在半滑舌鳎各组织均有表达,其中,在脾脏中表达最高,其次是肾脏,在胃中表达量最低;α-TTP基因表达量随着饲料中维生素E含量的增加而呈先升高后下降的变...     

具有高α-生育酚含量的大豆品种的鉴定

本试验分析了909个大豆品种（Glycine max）和200个野生大豆（Glycine soja）种质，这些种质来自日本筑波县农业生物科学研究所的基因库。参照标准的维生素E分析方法，运用简单而可信的方法来筛选了种子的生育酚组成。将50mg磨碎的种子加入10ml试管中，并放入1ml 80％含水乙醇，在室温下进行超声波处理15分钟。添加2ml焦榈酚饱和的已烷，在25℃室温下放置30分钟；离心分离后，用20ml乙烷层来进行分析。     

拟南芥HPT1,VTE3及VTE4基因启动子在逆境条件下的表达特性分析

维生素E是一类人体所必需的脂溶性维生素,具有重要的生理功能.尿黑酸叶绿醇转移酶(HPT)、2-甲基-6-叶绿基-1,4-苯醌甲基转移酶(MPBQMT/VTE3)、γ-生育酚甲基转移酶(γ-TMT/VTE4)是维生素E生物合成途径中的关键酶.本研究对来自拟南芥的HPT1,VTE3,VTE4三个基因启动子在低温、高盐及无光等逆境条件下的表达特性进行了分析,GUS组织化学染色结果表明:低温条件下,HPT1的表达降低明显,高盐条件下,HPT1的表达仅略有降低,无光条件下HPTl在茎中的表达升高,而根中的表达则降低;低温条件下VTE3的表达没有变化,高盐条件下则明显降低,无光条件下VTE3在茎中的表达显著降低;低温条件下VTE4表达略有升高,高盐条件下其表达明显降低,无光条件下VTE4在茎中的表达有所降低.说明拟南芥维生素E合成途径中的酶的表达受外界环境条件的影响.     

日本百脉根γ-生育酚甲基转移酶基因的电子克隆及进化分析

根据物种间同源基因相对保守的特点,利用生物信息学方法,以拟南芥-γ生育酚甲基转移酶cDNA序列为信息探针,在GenBank的HTGs数据库中找到与之高度同源的日本百脉根基因组DNA序列——LjT44D21克隆。通过GENSCAN分析及序列拼接得到日本百脉根"γTMT基因的cDNA序列,GenBank的登陆号为DQ013360。用该序列对GenBank中的est-others进行相似性搜索,获得了44条日本百脉根的EST序列,经拼接后发现与基因组预测的基因序列一致,表明该基因是真实存在和表达的。该cDNA序列长为1 077 bp,具有完整的开放阅读框架(1～1 077 bp)。推测编码蛋白为358个氨基酸,该蛋白序列与大豆、水稻、小麦、拟南芥、油菜、苜蓿和衣藻等物种的-γTMT蛋白质序列进行了同源性比较分析,具有很高的同源性。     

维生素E的营养功能及对肉品质的影响

正1维生素E的概念和营养功能维生素E又叫生育酚,是一种优良的抗氧化剂。根据其侧链的饱和程度分为生育酚和生育三烯酚两类,根据色满环上甲基位置分为α、β、γ和δ四类。维生素E的营养功能:①生物抗氧化作用,通过中和过氧化反应链中生成的游离基和阻止自由基的生成使氧化链中断,从而防止细胞膜中脂的过氧化和由此而引起的一系列损害;②α-生育酚能通过影响膜磷脂的结构而影响生物膜的形成;③促进十八碳二烯酸转变为二十碳四