牛分枝杆菌特异性PCR检测方法的建立及初步应用

根据已发表的牛分枝杆菌的pncA的基因序列，设计和合成了一对可扩增294bp目的片段的引物，建立了特异性检测牛分枝杆菌的PCR方法。对牛分枝杆菌国际参考株和国内分离株成功扩增出294bp的特异性基因片段；对人结核分枝杆菌、副结核分枝杆菌、鸟胞内分枝杆菌和草分枝杆菌DNA的PCR扩增结果均为阴性。本PCR方法检测的敏感度可达到50pg。对10份牛分枝杆菌培养阳性和10份阴性样品的DNA分别进行了PCR检测，结果10份阳性样品中有9份样品为PCR扩增阳性，阳性符合率为90％（9／10）；而10份阴性样品则PCR扩增全部为阴性，阴性符合率为100％（10／10）。本方法可做为牛分枝杆菌的快速检测和流行病学调查的工具。     

兰州大学草地农业科技学院硕士学位论文引文分析

摘要：以兰州大学草地农业科技学院8个专业（2007-2009年）的48篇硕士学位论文为统计源,运用文献计量学方法对其所引文量、类型、语种、年代分布等项进行初步统计分析,探讨了研究生文献需求的规律和特点,提出了加强图书馆馆藏建设的建议,并发现了一些亟待解决的问题。     

[02]罗非鱼 MC4R 基因克隆及与其生长相关的 SNPs 位点

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广西隆林山羊MyoG基因的序列分析与结构预测

为了丰富优良地方品种隆林山羊的MyoG基因遗传学基础信息,并探究其序列结构及其对山羊肌肉的发育分化调控机理,设计1对特异性引物,采用PCR和克隆技术成功获得隆林山羊MyoG基因2419bp长的DNA序列,其包括3个外显子,2个内含子和部分5'UTR和3'UTR区,编码区DNA序列长675bp,共编码224个氨基酸.结构预测分析表明,MyoG所编码的氨基酸序列无信号肽序列和不存在跨膜结构.隆林山羊MyoG编码区核苷酸序列及其编码的氨基酸序列与其他物种比对结果和氨基酸系统进化树的聚类结果相符,均证明隆林山羊与哺乳动物中的绵羊、牛和野猪的亲缘关系最近.隆林山羊MyoG基因的克隆、序列分析和结构预测为今后该基因的表达与调控、肉质改良、山羊开发利用等的研究提供了更充分的分子生物学基础信息和理论依据.     

不同单酶制剂混合检测对比研究

试验以木聚糖酶、纤维素酶、淀粉酶和酸性蛋白酶为对象,首先研究了酸性蛋白酶分别和其他3种单酶进行混合后酶活测定值变化情况,结果表明,酸性蛋白酶对其他3种单酶的检测结果没有影响;试验第二部分研究了4种单酶整体混合在一起后各单酶测定值的变化情况,结果表明,木聚糖酶测定值出现很大偏高,其他3种单酶测定结果未出现显著偏差;进行进一步论证试验表明,淀粉酶可能是使木聚糖酶测定结果偏高的原因。     

基层兽医机构防控非洲猪瘟效能评估与分析

为加强基层动物防疫体系建设,客观评估基层兽医机构防控非洲猪瘟能力和非洲猪瘟防控政策执行情况,组织开展了10个养猪大省的20个县基层兽医机构防控非洲猪瘟效能评估。结果显示：当前基层兽医机构具备防控非洲猪瘟的基本能力,但已不适应新时期动物疫病防控需要,部分关键能力存在不足;发生疫情县的防控能力普遍低于未发生疫情县,说明“人财物”资源配置好的地区防控非洲猪瘟等重大动物疫病的能力较强;政策落实情况与兽医机构效能总体上呈正相关性,技术性政策落实情况明显优于资源性政策落实情况。此次效能评估工作引起了地方政府重视,切实发挥了评估“指挥棒”作用,为各地加强基层动物防疫体系建设发挥了示范带动作用。     

呼伦贝尔地区6种禾本科牧草养分对应分析

本研究运用对应分析方法对呼伦贝尔地区种植的6种禾本科牧草营养价值进行综合评定,结果表明:牧草品种间营养成分存在差异,且养分含量与品种间存在一定的相关性。‘阿坝'垂穗披碱草(Elymus nutans‘Aba')的粗蛋白与粗脂肪含量最高(P0.05),多花黑麦草(Lolium multiflorum Lamk)最低;披碱草(Elymus dahuricus Turcz)的吸附水含量最高,老芒麦(Elymus sibiricus Linn)最低;偃麦草(Elytrigia repens(L.)Nevski.)的粗纤维和粗灰分含量最高,蒙农杂种冰草(Agropyron cristatum×A.desertorum‘Hycrest Mengnong')最低;老芒麦钙和磷的含量最高,蒙农杂种冰草钙含量最低,偃麦草磷的含量最低。     

犬细小病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

利用本实验室建立的昆虫细胞/杆状病毒表达系统表达犬细小病毒病毒样颗粒（CPV-VLPs）,采用硫酸铵沉淀、蔗糖密度梯度离心对表达的CPV-VLPs进行纯化,用电子显微镜、SDS-PAGE及Western-blotting方法检测纯化效果。以纯化的CPV-VLPs作为包被抗原建立CPV间接ELISA检测方法,对各反应条件进行优化并分析其特异性、敏感性、重复性。结果显示,CPV-VLPs经过纯化后纯度可达到95%以上;优化的ELISA最佳工作条件为：纯化抗原包被浓度为5.0mg/L,4℃包被过夜;1%BSA,37℃封闭2h;待检血清1∶40稀释,37℃孵育1.5h;HRP标记的酶标二抗1∶20 000稀释,37℃孵育1h;TMB室温避光显色30min;确定的血清阴性阳性临界值D450nm值为0.264。该方法可特异性检测犬细小病毒阳性血清,与犬瘟热、犬传染性肝炎、犬冠状病毒病、狂犬病阳性血清均不发生反应。该方法的敏感性为1∶640,批内重复试验变异系数小于6%,批间重复试验变异系数小于8%。42份临床血清样本的检测结果表明,与血凝抑制试验的符合率为90.48%。     

从卵黄中检测鸡新城疫抗体

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