油菜蜂花粉总RNA(含小RNA)大量提取及RT-qPCR检测

大量提取含小RNA的油菜蜂花粉总RNA,为研究油菜蜂花粉所含外源性miRNA在动物和人体内发挥的生理和病理功能研究奠定基础。改良苯酚-氯仿法大量提取油菜蜂花粉总RNA,Nanodrop 2000检测浓度和质量,琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性;所得的总RNA经过RT-qPCR扩增。提取的总RNA260/280为2.11,产量高于1‰。电泳条带清晰,完整性良好。可扩增出油菜基因组中的miR-159和miR-166a,且可进行丰度差异比较。本方法能大量提取包括油菜蜂花粉在内的植物RNA(含小RNA),为中草药和其他植物来源天然产物中功能性miRNA在动物和人体内发挥的生物学功能研究奠定基础。     

猪skMLCK基因RNAi慢病毒载体的构建及干扰效率测定

为了构建猪骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(sk MLCK)基因有效短发夹RNA(shRNA)的慢病毒载体,筛选出最佳干扰效率的序列,采用RNAi技术,设计并合成3条siRNA干扰序列,插入到慢病毒穿梭质粒(h U6-CMV-puror-Ploy A)上,与慢病毒包装系统共转染293T细胞,收集病毒上清并进行病毒滴度的测定,将其转染小鼠C2C12细胞,分别用实时定量PCR和Western blot方法检测细胞中sk MLCK基因mRNA和蛋白的表达。结果显示:PCR扩增和测序分析结果显示靶向sk MLCK RNAi慢病毒载体构建成功;转染小鼠C2C12细胞后,sk MLCK基因mRNA和蛋白均受到不同程度抑制,实时定量PCR显示,抑制率分别为(29.2±4.43)%、(76.4±7.33)%、(20.0±1.8)%;Western blot显示,抑制率分别为(29.6±5)%、(42.4±1.6)%、(34.3±1.2)%。结论:成功构建猪sk MLCK基因有效shRNA的慢病毒载体,确定干扰载体-2(sk MLCKRNAi-2)具有最佳干扰效果,证实sk MLCK基因RNAi慢病毒载体能有效抑制目的基因mRNA和蛋白的表达,为进一步研究该基因与肌肉肉质性状的关系奠定了基础。     

不同品种的种公猪精液品质差异的研究

为了研究品种不同的种公猪的精液品质之间存在的差异。本试验通过对长白、大白、杜洛克和斯格配套系等4个品种的成年种公猪的精液品质进行统计学方法分析和比较。结果表明:1斯格配套系种公猪的鲜精活率最好(0.89±0.12),然后依次是长白(0.88±0.13)、杜洛克(0.86±0.11)、大白(0.85±0.16)。2杜洛克和斯格种公猪的精子有效存活时间(分别为8.5 d和8 d)比长白、大白种公猪的精子有效存活时间长(分别为6.5 d和6 d)。3大白种公猪的精液密度最大(6.62亿/m L),杜洛克种公猪的精液密度次之(6.51亿/m L),然后是斯格(4.51亿/m L)、长白(4.41亿/m L)。4长白种公猪的精液量(349 m L)与大白(225 m L)、杜洛克(179 m L)、斯格(265 m L)等种公猪的精液量差异极显著(P0.01);斯格种公猪精液量与杜洛克种公猪的精液量差异极显著(P0.01);大白种公猪的精液量与杜洛克、斯格种公猪的精液量差异不显著(P0.05)。5长白种公猪的总精子数最大(2 080.1亿/次),大白次之(2 060.3亿/次),其次是杜洛克(2 010.7亿/次)和斯格(2 002.1亿/次),但四个品种的种公猪的总精子数差异不显著(P0.05)。4个品种的种公猪的精子活率由高到低依次为斯格、长白、杜洛克、大白;大白种公猪的精液密度最大;杜洛克和斯格种公猪比较适合长期保存,长白、大白种公猪仅适合短期保存;4个品种的种公猪的平均精液量大小依次为长白斯格大白杜洛克;4个品种的种公猪的总精子数的大小依次为长白大白杜洛克斯格。     

万紫千红总是春之木本篇(上)

正春天,是大多数观花乔灌木、藤本花木开花的季节,梅花、迎春花、结香、玉兰、桃花、杏花、各种海棠、紫荆、紫藤、连翘、牡丹、山茶、樱花、木香、丁香等争奇斗艳,竞相展示着自己的风采,成为春天里不可或缺的组成部分。菊花桃菊花桃因花形酷似菊花而得名,是观赏桃花中的珍贵品种。蔷薇科李属落叶灌木或小乔木,花生于叶腋,粉红色或红色,重瓣,花瓣较细,盛开时犹如菊花。花期     

二化螟dsRNA降解酶基因的克隆与表达分析

为解析二化螟Chilo suppressalis体内参与降解双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)的关键核酸酶的功能,克隆二化螟不同的非专一性核酸酶（non-specific nuclease,NUC）基因,并对这些基因进行生物信息学分析和组织定量表达分析,同时对dsRNA降解酶（dsRNA degrading nuclease,dsRNase）活力的组织分布进行研究。结果显示,共克隆获得5个NUC基因,其中有4个编码dsRNase亚家族基因（CsdsRNase1～CsdsRNase4）和1个编码Endonuclease G亚家族基因（CsEndoG）。5个NUC基因的开放阅读框核苷酸序列长度范围为828～1 338 bp,编码275～445个氨基酸残基,其分子量大小为31.68～49.57 kD,预测等电点为5.48～9.42。CsdsRNase1和CsdsRNase2含有信号肽序列,两者相似度极高,且与家蚕Bombyx mori和斜纹夜蛾Spodoptera litura中具有dsRNA降解酶活力的dsRNase同源聚类;CsdsRNase1和CsdsRN...     

无定河流域土地覆被空间分异机制及相关水碳变量变化

无定河流域是黄土高原生态恢复工程实施的重点区,探究其土地覆被的空间分异机制及相关水碳变量的变化特征,对支撑区域水土资源保护与规划以及服务区域生态文明建设等工作具有重要作用。本文使用线性倾向法、Mann-Kendall趋势检验、Pettitt突变检验、地理探测器等方法分析无定河流域土地覆被时空变化特征及空间分异驱动因素,并从地-水-碳耦合的角度探析流域总初级生产力(GPP)、实际蒸散发(ET)和水分利用效率(WUE)等关键水碳变量的变化特征。研究表明:(1)1990—2019年期间,流域整体草地、林地、建设用地显著增加,耕地、荒地显著减少,其中林草面积增加区域主要集中在流域下游及无定河沿岸地区;(2)人口密度、降水、气温等对流域土地覆被空间格局具有重要影响,整体而言社会经济因素的影响大于自然因素,但以降水、气温为代表的自然因素的影响在增强;(3)流域水碳变量的变化与土地覆被变化具有较好的对应关系,空间上,以耕地、林地、草地为主要覆被的流域东南部的GPP、ET、WUE相对偏高,以草地、荒地为主要覆被的流域西北部的GPP、ET、WUE相对偏低,时间上,2001—2019年间,流域整体GPP、...     

靶向G-四链体的抗番茄丛矮病毒卟啉类衍生物的筛选

植物病毒病给蔬菜生产带来很大影响,目前蔬菜病毒防控主要采用非药剂措施,广谱抗病毒剂效果有限,需要基于新的药物靶点开发新的病毒抑制剂。G-四链体(G4s)是一种特殊的核酸高级结构,其在病毒基因组中的形成或解链可调节基因的复制、转录和翻译等过程,进而影响病毒增殖。一些可调节G-四链体结构稳定性的小分子呈现出抗病毒活性,使得G-四链体有望成为新的抗病毒药物的靶标。番茄丛矮病毒(tomato bushy stunt virus, TBSV)是一种分布广泛的植物病毒,有关其基因组的复制、转录和翻译等分子机制已研究得较为成熟,是一种研究病毒与寄主互作的模式病毒。揭示TBSV中G-四链体的结构及功能,有望为植物病毒基因中G-四链体的研究奠定基础。本研究通过生物信息学分析,在TBSV基因中鉴定出两条保守的、潜在的G-四链体可形成序列(putative G-quadruplex sequences, PQS)——TBSV-PQS2和TBSV-PQS4;通过紫外、荧光光谱和圆二色光谱(CD光谱)方法筛选出与TBSV-PQS2和TBSV-PQS4互作的G4配体;通过烟草体内侵染性克隆试验发现,G-四链体配体...     

新陈代谢GM(1,1)模型在兵团农机总动力预测中的应用

借助灰色系统理论,利用兵团农机总动力的历史数据,建立并对比分析了GM(1,1)模型和新陈代谢GM(1,1),对兵团农业机械总动力进行预测,为以后兵团农业机械化的发展提供一定的参考。     

农机总动力的预测及多种数学方法的应用比较

应用多种数学方法对青海省历年的农机总动力进行了预测，取得了良好的效果。通过对这些数学方法的应用比较。分析了其中每种方法的适用范围和优缺点。为相关管理部门进行正确的决策提供了依据，并为正确选用各种数学方法进行预测具有指导意义。     

要闻速览

2005年中央一号文件：提高农业综合生产能力；中央企业2004年获利预计达4500亿元；我国关税总水平2005年降至9．9％；我国对全球货物贸易增长贡献率达12％；2005年我国货币供应量将增长15％左右。