青贮饲料中有机酸的毛管电移动分析方法

调制优质青贮饲料是贮藏利用粗饲料的重要条件。青贮饲料品质,一般根据发酵成分的含量组成判定,青贮饲料发酵生成的有机酸,主要是乳酸和挥发性脂肪酸(VFA)。通常评价品质的方法根据乳酸、醋酸及酪酸的含量比。作为青贮饲料中有机酸的定量法,多是采用气相色谱法与高速液相色谱法。但是,这些方法须进行诱导体化等前处理,分析时间也长,并且对某种有机酸异构体(iso-及n-)分离困难,因而,用作常规实     

旋毛虫感染小鼠肠道菌群的变化

选取18只BALB/c小鼠进行旋毛虫灌胃,以灌胃前1d作为时间起点,于第0、1、7、14、28天分别收集小鼠粪便,同期选取12只同种小鼠作为对照。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对小鼠粪便中双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、梭菌、拟杆菌、直肠真杆菌、柔嫩梭菌以及脱硫弧杆菌进行定量检测。结果显示,双歧杆菌数量在第7、14、28天均显著低于对照组(P<0.01),第1天无变化;乳杆菌第7、14、28天低于对照组(P<0.05),第1天无变化;肠球菌与梭菌在第7、14、28天均高于对照组(P<0.05),第1天无变化;拟杆菌、直肠真杆菌、柔内梭菌以及脱硫弧杆菌均无明显变化(P>0.05)。结果表明,旋毛虫感染可引起小鼠肠道菌群变化,从而引起小鼠肠道菌群失调。     

黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织中Boule基因mRNA表达水平

Boule基因是DAZ家族成员之一,在生殖细胞中特异表达是精子发生过程中减数分裂的关键调控因子,其表达缺乏可引起减数分裂阻滞和精子生成障碍,导致雄性不育。为揭示Boule基因mRNA表达水平与犏牛雄性不育关系,本研究利用实时荧光定量PCR法,对黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织中Boule基因mRNA表达进行定量分析。结果表明:Boule基因在黄牛和牦牛睾丸组织中的表达水平相对都比较高,黄牛与牦牛差异不显著(P>0.05);而Boule基因在黄牛和牦牛睾丸组织中的表达水平显著高于犏牛,黄牛、牦牛与犏牛差异显著(P<0.05)。结果提示,Boule基因在犏牛睾丸组织中低表达与犏牛雄性不育相关,可作为研究犏牛雄性不育的重要候选基因。     

农村青粗饲料多餐育肥猪法

在农村青、粗饲料来源丰富,以青、粗料代替精饲料喂猪,既可降低成本,还可达到育肥的目的。用少量的水,将经过发酵的粗饲料、切碎的多汁青菜、青草与少量的精料拌合,每天定量喂6餐,每餐让猪吃完后,再放入部分不切碎的青饲料,让猪自由采     

结核分枝杆菌复合群、副结核分枝杆菌和禽分枝杆菌禽亚种多重TaqMan荧光定量PCR方法的建立及初步应用

结核分枝杆菌复合群(MTBC)、包括结核分枝杆菌(MTB)、牛分枝杆菌(MB)、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌等;非结核分枝杆菌(NTM)中禽分枝杆菌(MA)是自然界常见的动物致病菌,包含4个亚种,分别为禽分枝杆菌禽亚种(MAA)、禽分枝杆菌人/猪亚种(MAH)、禽分枝杆菌副结核亚种/副结核分枝杆菌(MAP)和禽分枝杆菌森林土壤亚种(MAS)。为建立MTBC、MAP和MAA的多重荧光定量PCR检测方法,本研究基于MTBC、MAP和MAA的特异性基因devR、F57和IS901分别设计引物及探针,通过优化各反应条件,建立了一种可同时检测3种分枝杆菌的多重Taq Man荧光定量PCR方法。特异性试验结果显示,该方法对MTB、MB、MAP、MAA和MAS检测为阳性,对其他畜禽病原菌,包括MAH、13种NTM和7种非分枝杆菌检测结果均为阴性,特异性较强。敏感性试验结果显示,该方法对MB、MAP和MAA重组质粒标准品的检测限均为1.0拷贝/μL,敏感性较高;重复性试验结果显示,批内与批间重复性试验变异系数均小于2.5%,重复性较好。利用该方法检测体外模拟污染(MB、MAP和MAA菌液浓度分别为1.0...     

甲酚纳米乳消毒剂的中和剂筛选及杀菌效果观察

为研究甲酚纳米乳消毒剂的杀菌效果,采用中和剂悬液定量鉴定方法,对3种中和剂:3%吐温-80磷酸盐缓冲液(PBS)、0.5%硫代硫酸钠PBS、1%吐温-80+1%卵磷脂+0.5%硫代硫酸钠PBS中和甲酚纳米乳消毒剂的效果进行了筛选,然后利用筛选出的中和剂和悬液定量杀菌试验方法,观察了甲酚纳米乳消毒剂的杀菌效果。结果表明:3%吐温-80 PBS对试验菌及培养基无不良影响,可作为甲酚纳米乳消毒剂的适宜中和剂;甲酚纳米乳消毒剂的杀菌效果随着消毒剂浓度的升高和作用时间的延长而增强,2%和2.5%的消毒剂对细菌分别作用5 min以上、3%的消毒剂作用1 min以上,杀灭对数值均已大于5,消毒合格。结果提示,甲酚纳米乳消毒剂的杀菌效果好,适宜于在兽医临床中推广应用。     

鸡lncRNA-MSTRG.15568.9及其预测靶基因的表达

试验旨在了解在鸡睾丸中高表达的1个长链非编码RNA （long non-coding RNA,lncRNA）及其预测靶基因的时空表达规律,研究二者在鸡弱精子症中的调控作用。根据弱精子症和正常北京油鸡公鸡睾丸转录组测序筛选到的1个高表达的lncRNA （MSTRG.15568.9）,采用顺式（cis）作用模式预测其潜在靶基因SPAG4（sperm-associated antigen 4）,进一步采用实时荧光定量PCR方法进行表达量分析。分别选择3只0、5、20、30、45、60周龄正常北京油鸡公鸡,检测MSTRG.15568.9与SPAG4基因在不同周龄公鸡睾丸中的表达量差异;选择30周龄3只正常公鸡,采集睾丸、肝脏和脾脏等8个部位组织样品,检测MSTRG.15568.9与SPAG4基因在不同组织间的表达规律;选择45周龄弱精子症公鸡和正常公鸡各3只,对比MSTRG.15568.9与SPAG4基因在睾丸的表达量差异。结果显示,MSTRG.15568.9与SPAG4存在明显的时空表达差异,且二者表达趋势基本一致。在不同周龄的鸡睾丸组织中,MSTRG.15568.9和SPAG4的表达趋势相近,MSTRG.15568.9在20周龄的表达量显著高于0、5、30、45、60周龄（P<0.05）,0和5周龄表达量显著低于20、30、45和60周龄（P<0.05）;SPAG4在45周龄表达量最高,其次是20周龄（P<0.05）。MSTRG.15568.9和SPAG4在睾丸和肝脏中的表达量均显著高于脾脏、肾脏等组织（P<0.05）;在正常睾丸组织中的表达量均显著高于弱精子症睾丸组织（P<0.05）。综上所述,MSTRG.15568.9与SPAG4基因具有较明显的组织表达特异性,且MSTRG.15568.9可能调控SPAG4基因的表达,参与精子发生与精子活力调控;但其具体作用机制需要进一步探索。本研究可为鉴定与鸡弱精子症调节机制相关的功能基因提供参考。     

蒙牛乳业泰安有限责任公司获得“C”标志证书

近日，蒙牛乳业泰安有限责任公司获得《定量包装商品生产企业计量保证能力证书》，即“C”标志，“C”标志是定量包装商品生产企业计量保证能力合格标志。“C”标志证书的核发，是由国家质量技术监督部门根据国家有关规定，参照国际通行做法，[第一段]     

荧光定量PCR中至少应提供的信息(MIQE)

荧光定量PCR也称qPCR(quantitative PCR),是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,然后结合相应的软件对待测样品模板的起始浓度进行定量。目前,人们对实时定量PCR的操作规范和试验结果分析缺乏共识,许多发表的文章中缺乏足够的试验细     

饲料添加剂砷含量测定方法探究

<正>砷是一种损害机体全身组织的有毒物质,与动物组织中酶的疏基结合,使之灭活而产生毒性,尤其以消化道、肝、肾、肺、皮肤及神经组织更为敏感。因此,为了减少和避免砷的危害,保障人们的身体健康,严格检测饲料及原料中砷的含量具有重要意义。目前,饲料中砷含量检测最常用的方法是银盐法(仲裁法),