利用CAPS标记辅助辣椒PVY抗性基因PVr4转育的研究

利用国外报道的与PVr4基因紧密连锁的CAPS标记,对辣椒抗PVY基因PVr4的转育进行了研究和探讨。采用与报道的相同抗源材料CdM334为回交的供体亲本,与5个自交系77013、75-7-3-1、83077、83078、83-163进行回交,在BC1代进行了分子标记的选择。从5个BC1群体75-7-3-1×(CdM334×75-7-3-1)、77013×(CdM334×77013)、83077×(CdM334×83077)、83078×(CdM334×83078)、83-163×(CdM334×83-163)中,分别检测出含有抗病连锁标记的单株21株、15株、10株、11株、12株。     

74株小肠结肠炎耶尔森菌病原学特征分析

为了解扬州地区小肠结肠炎耶尔森菌病原学特征和分布规律,2018-2019年采集腹泻患者粪便、家畜家禽粪便、苍蝇标本及生猪屠宰场组织标本等,共计1786份,并进行小肠结肠炎耶尔森菌分离培养,对分离得到的菌株进行生化鉴定、血清分型、生物分型和毒力基因检测.结果 表明:监测的1786份标本中共检出74株小肠结肠炎耶尔森菌,总...     

opaR基因缺失对AHPND致病菌生物学特性及毒力质粒接合转移的影响

急性肝胰腺坏死病(acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)严重影响了我国乃至全球对虾养殖业的发展。近期研究发现,致病菌毒力质粒携带trb型Ⅳ型分泌系统(type Ⅳ secretion system, T4SS)可在高菌体密度下介导毒力质粒发生接合转移,从而导致AHPND致病菌多样性。为探究群体感应与T4SS表达以及毒力质粒接合转移的关系,本研究以副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)群体感应系统的高密度调控子OpaR为研究对象,在致AHPND副溶血弧菌20130629002S01::cat(Vp2S01::cat)菌株基础上,利用同源重组技术构建opaR基因缺失株Vp2S01::catΔopaR。比较了出发菌株和缺失株在生长性能、运动性和生物被膜形成能力等方面的差异,分析了opaR基因对T4SS基因表达量以及质粒接合转移效率的影响。结果显示,opaR基因缺失不影响细菌的生长特性和群集运动,但泳动能力显著增加,生物被膜形成能力显著下降;接合转移实验显示,opaR基因缺失显著提高T4SS表达水平和接合转移效率。本研究为解析群体感应系统调控AHPND致病菌T4SS表达以及毒力质粒接合转移机制提供了基础数据,可为控制AHPND致病菌毒力质粒传播提供技术支撑。     

毛竹cab-PhE11基因的克隆与序列分析

采用RT-PCR技术和RACE-PCR技术,从毛竹(Phyllostachys edulis)中分离了捕光叶绿素a/b结合蛋白基因cDNA编码区全长,命名为cab-PhE11(GenBank登记号:EU327783)。该基因全长1154 bp,编码区cDNA全长753 bp,编码250个氨基酸。生物信息学分析表明,在cab-PhE11编码的蛋白第62~239位包括典型的捕光叶绿素a/b结合蛋白功能域,还包含1个N-糖基化位点、1个酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点、5个N-肉豆蔻酸化位点以及1个丙氨酸富集区。序列相似性分析结果表明,cab-PhE11编码的氨基酸序列与玉米、绿豆、拟南芥、烟草等的cab基因有较高的相似性,都在80%以上,该基因属于lhcb6类基因。     

蚯蚓纤溶酶基因番茄表达载体的构建

为研究蚯蚓纤溶酶的番茄表达,构建EFE基因的番茄表达载体pF和pEF,并导入农杆菌。采用PCR法在EFE基因DNA序列上添加了表达调控元件和酶切位点后,得到新EFE基因片段,将该片段与切去GUS基因的pBI121载体相连,以构建CaMV35S驱动的EFE组成型表达载体pF;用PCR克隆得到的E8启动子片段替换pF上的35S启动子,以构建番茄成熟果实特异性表达载体pEF;最后,采用三亲交配法用重组质粒转化根癌农杆菌EHA105;结果表明:经过酶切、PCR和测序鉴定,EFE基因、E8启动子序列已重组到表达载体上,植物表达载体构建正确,并且已经转化进农杆菌EHA105中。     

基因表型诱导剂对黄瓜生育及产量和品质的影响

在保护地栽培条件下,以清水浸种和嫁接黄瓜为对照,进行了不同浓度的基因表型诱导剂浸种对比试验.结果表明,适宜浓度的基因诱导剂浸种能够在一定程度上控制黄瓜茎的纵向生长,使其茎的横向生长、叶和根的生长明显加快,根系活力明显增强,壮苗指数和G值有所提高,第1雌花节位明显降低,雌花节率和坐果率显著提高,采收期提前1～8d,前期产量和总产量均显著提高;以浸种浓度为1:100的处理最为适宜,前期产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产40.6%和20.6%,总产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产63.8%和18.1%:浸种浓度为1:70的处理次之,前期产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产35.0%和15.8%,总产量比清水浸种和嫁接的对照分别增产54.2%和10.9%.同时,诱导剂浸种还可明显提高黄瓜干物质、可溶性糖和VC的含量,改善黄瓜品质;但诱导剂浸种的浓度过高或过低均不利于诱导效果的提高.     

植物抗病基因研究进展

植物抗病基因在植物抗病过程中起重要作用.综述了植物抗病基因的克隆方法,结构特点,作用机制以及未来的发展前景.     

草坪虫害生物防治的研究进展

近年来,随着城市化发展进程的逐步加快,人们对于所处环境的绿色性和环保性都有了更高的要求,城市当中的草坪数量急剧增长,不仅美化了城市,也改善了环境。但在建植草坪的过程中,一旦出现草坪害虫问题,轻则导致草坪斑秃,重则导致草坪死亡。以往我们普遍采取的是化学防治的方法,虽然产生了一定的防治效果,但也带来了一系列的不良影响,因此,我们更加提倡以生物防治的方式,从根本上降低草坪虫害问题出现的可能性,从而营造更加良好的草坪生态环境。本文主要对于草坪虫害生物防治的研究进展开展分析,希望能够通过了解现阶段生物防治技术的发展现状,为城市的绿化建设提供一份保障。     

枯草芽孢杆菌sacB基因的功能验证及应用

本研究将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)基因组DNA中克隆的1.4 kbsacB基因片段连接到表达载体pET-28a(+),构建了sacB基因表达载体pSacB。通过测定蔗糖水解产生的葡萄糖具有的还原性,确定sacB基因产物具有蔗糖果聚糖酶活性。该基因表达后,导致大肠杆菌(Escherichia coli)细胞不能在含5%蔗糖的培养基中生存。同时发现sacB基因也能赋予耐辐射菌株Deinococcussp.BR501蔗糖敏感性。利用条件致死sacB基因的这一特性,我们分析了D.sp.BR501的突变率,结果表明DNA错配修复缺失突变株(ΔmutS1)的突变频率明显高于野生型。因此枯草芽孢杆菌sacB基因可作为验证DNA损伤修复能力的一种筛选标记。