砷(Ⅲ)的流动注射化学发光分析方法研究

酸性条件下高锰酸钾氧化As（Ⅲ）产生化学发光,六偏磷酸钠与甲醛对该体系有显著的增强作用,据此建立了流动注射化学发光法测定水中砷的新方法,在优化的实验条件下,As（Ⅲ）浓度在0．002～0．3／μg／mL范围内与发光强度呈良好的战性关系,检出限为0．001／μg／mL,对0．1／μg／mlAs（Ⅲ）标准溶液进行11次平行测定,相对标准偏差为2．1％,将本法应用于水样中砷的测定,结果令人满意。     

黄芪多糖和香菇多糖对vMDV感染雏鸡淋巴细胞化学发光的影响

１日龄雏鸡人工感染ｖＭＤＶ，并注射黄芪多糖（ＡＰＳ）和香菇多糖（Ｌｅｎ），分别于７、１６、２８、４２和５６日龄检测雏鸡淋巴细胞化学发光（ＣＬ）的变化。结果表明：（１）ＡＰＳ对７、１４日龄ｖＭＤＶ感染雏鸡胸腺、脾脏和法氏囊淋巴细胞的ＣＬ有显著抑制作用（ｐ〈０．０５，ｐ〈０．０１），在２８、４２日龄则显著增强淋巴细胞ＣＬ（ｐ〈０．０５，ｐ〈０．０１）；（２）Ｌｅｎ对７、１４日龄ｖＭＤＶ感染雏鸡胸腺、脾     

吖啶酯偶联单克隆抗体建立化学发光法检测黄曲霉毒素B1

[目的] 建立快速检测黄曲霉毒素B₁（aflatoxin B₁,AFB₁）的方法。[方法] 将吖啶酯（acridinium ester,AE）与AFB₁单克隆抗体进行体外化学合成,分别合成了吖啶酯∶AFB₁单克隆抗体摩尔比为5∶1、10∶1、15∶1、20∶1、25∶1的吖啶酯标记AFB₁单克隆抗体（AFB₁-AE）,分析了不同摩尔比的检测效果,选择吖啶酯∶AFB₁单克隆抗体为25∶1的AFB₁-AE偶联物建立化学发光免疫分析法（chemiluminescence immunoassay,CLIA）。[结果] 获得对应的标准曲线回归方程为：y=-0.245Ln（x）+ 1.578 1,R²=0.985 7,IC₅₀=81.48 pg/mL;对样品进行加标回收实验,加标回收率88.4%~106.0%,变异系数0.92%~2.10%。[结论] 将吖啶酯与AFB₁单克隆抗体体外交联,可建立新的化学发光免疫分析方法。     

96孔板氯霉素分子印迹膜的制备

对96孔板上氯霉素分子印迹膜的制备及其吸附性能进行了研究,并通过试验优化了该分子印迹膜的制备方法。以氯霉素为模板分子,四氢呋喃为致孔剂,偶氮二异丁腈为引发剂,采用紫外灯引发聚合在MaxiSorp 96孔板上合成氯霉素分子印迹聚合膜。结果表明,当模板分子、功能单体(甲基丙烯酸二乙基氨基乙酯)、交联剂(乙二醇二甲基丙烯酸酯)的摩尔比为1∶4∶1,模板分子物质的量为0.25 mmol,溶剂的量为5 mL时,合成的氯霉素分子印迹膜对氯霉素的吸附效果最佳,可在50 min内达到吸附平衡,当氯霉素的初始浓度为120 mg/L时,吸附量可达1.51!g/孔。吸附特异性试验结果表明,当氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的初始浓度为50 mg/L时,该膜对氯霉素的吸附量为0.83μg/孔,而对甲砜霉素和氟甲砜霉素的吸附量分别仅为0.49、0.40μg/孔。研究表明,将该氯霉素分子印迹膜作为人工抗体代替氯霉素的生物抗体,采用直接竞争原理,应用化学发光免疫法检测氯霉素,具有可行性。     

用化学发光免疫法检测有机氯农药DDTs的残留量

建立了检测有机氯农药DDTs残留的化学发光免疫分析技术(chemiluminescence immunoassay,CLIA),以鲁米诺和过氧化氢作为化学发光底物,测定样品中有机氯农药DDTs残留。结果表明:发光底物液非催化下,5～7 min后发光值较稳定;在发光底物液酶催化下,反应10 min接近峰值;DDTs标准曲线线性范围为0.05～25 ng/mL,标准样品DDTs浓度与发光值呈现很好的线性相关,线性方程为y=-63.806x+13426,R2=0.9945,检测最低限为0.05 ng/mL;回收率为91.4%～107.8%。     

应用化学发光法测定肉鸡全血氧自由基含量的研究

本文对应用化学发光法测定肉鸡全血氧自由基含量时血液稀释种类ｌｕｍｉｎｏｌ与ｚｙｍｏｓａｎ Ａ浓度以及重复性试验进行了优化和测定。结果表明,该方法灵敏度高,重复性好,操作简便,适合用于兽医临床多种疾病的监测与研究。     

金丝桃清除活性氧作用研究

目的：对金丝桃不同部位提取物的清除活性氧活性进行了实验研究。方法：用化学发光法研究了金丝桃提取物对O2(-)/(*)、H2O2的清除作用；用分光光度法研究了提取物对*OH的清除作用以及对H2O2引起红细胞损伤和由Fe2+-Vit C引起线粒体膨胀的保护作用。结果：金丝桃提取物能有效地清除O2(-)/(*)、H2O2和*OH，对H2O2引起的红细胞损伤有一定的保护作用，同时能抑制由Fe2+-Vit C引起的线粒体膨胀。结论：金丝桃提取物有良好的清除活性氧活性。     

均相光激化学发光免疫分析技术的研究进展

均相光激化学发光免疫分析技术是一种基于纳米微珠的化学发光的新型技术,其具有更高的敏感度、均一性、背景低,且不用洗涤及样本需求量少等特点。该技术可用于生物标志物、激酶及抗原抗体的检测,蛋白：蛋白相互作用的检测,高通量分析的研究及疾病诊断等方面。优化和发展均相光激化学发光免疫分析技术将会在更多研究领域中得到应用。     

化学发光酶联免疫分析法同时检测3种有机磷农药残留

利用能同时识别对硫磷、甲基对硫磷和杀螟硫磷的宽谱特异性单克隆抗体,建立了同时测定这3种有机磷农药残留的化学发光酶联免疫分析方法（chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA）,比较了间接竞争（ic-CLEIA）和直接竞争（dc-CLEIA）2种反应模式,优化了相关理化参数,确立了最适反应条件。结果表明:间接竞争CLEIA法检测对硫磷、甲基对硫磷和杀螟硫磷的抑制中浓度（IC₅₀）分别为5.57、2.30和2.62 μg/kg,检测线性范围分别为0.39~100、0.39~25和0.39~25 μg/kg;直接竞争CLEIA法检测对硫磷、甲基对硫磷和杀螟硫磷的抑制中浓度（IC₅₀）分别为5.43、1.34和1.24 μg/kg,检测线性范围分别为0.39~100、0.10~25和0.10~25 μg/kg。所建立的CLEIA方法基本能满足对硫磷、甲基对硫磷和杀螟硫磷在谷物和果蔬中最大残留限量的检测要求,为研制有机磷农药多残留检测试剂盒提供了技术依据。     

家禽饲料中玉米赤霉烯酮化学发光酶联免疫分析方法的建立

为了建立比较间接竞争化学发光酶联免疫分析法(ic-CLEIA)与直接竞争化学发光酶联免疫分析法(dc-CLEIA)检测家禽饲料中玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的方法,采用二因子交叉试验优化确定最佳包被原浓度和抗体稀释度,建立ic-CLEIA和dc-CLEIA。结果显示:icCLEIA在0.05~5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.383 5x+0.417 9(R2=0.994 6),灵敏度(IC50)为0.611 ng/m L,检出限(LOD)为15 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.79%和1.02%,家禽饲料添加样品回收率为91.9%~112.1%,变异系数小于10.5%;dcCLEIA在0.025~5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.386 5x+0.334 1(R2=0.991 8),灵敏度(IC50)为0.372 ng/m L,检出限(LOD)为3 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.16%和1.20%,添加样品回收率为87.3%~119.3%,变异系数小于9.8%。结果表明:两种方法精确,灵敏度高,均可作为定量检测ZEN的有效手段;与ic-CLEIA相比,dc-CLEIA更适用于检测家禽饲料中的ZEN。