番茄灰霉病分子诊断方法研究

为提供番茄灰霉病的早期诊断技术,应用其病原菌灰葡萄孢种特异片段P729分子标志,建立了PCR检测方法,并进行了实验室和大田现场标本的评价。结果显示番茄灰霉病的分子诊断方法在实验室具有特异、稳定和可靠的特点。比较6种抽提基因组DNA的方法,方法B效果理想。应用建立的分子诊断方法可从0.2μg灰葡萄孢菌丝中获得阳性扩增,具有相当高的灵敏性;大田样本的检测结果说明该方法可用于番茄灰霉病的早期诊断。     

雌蚕无性克隆系的构建及应用研究

基于雌蚕无性克隆后代全雌、基因型完全一致的遗传特性,在家蚕遗传育种及杂种优势机理研究等方面具有重要价值.本文介绍了10余年来在雌蚕无性克隆性状的遗传特性、无性克隆系的构建及应用方面所取得的主要进展.     

小卷蛾斯氏线虫β-微管蛋白基因的克隆与序列分析

用TRIZOL法提取了小卷蛾斯氏线虫RNA,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE)技术克隆了两条小卷蛾斯氏线虫β-微管蛋白基因cDNA的3′端序列。将得到的cDNA序列提交到GenBank,分别获取登录号EU049857和EU049858。两个序列长度分别为1372碱基(SCTUB1)和1374碱基(SCTUB2),分别编码434和432个氨基酸,编码的蛋白的分子量在48kDa左右。氨基酸的124~131位存在一个微管蛋白信号片段GGGTGSG。序列分析表明,分离得到的两个基因与其他线虫的微管蛋白基因具有较高的同源性,核苷酸序列同源性在65%以上,氨基酸序列同源性在81%以上,两个氨基酸序列都含有两个氨基酸保守区NNWAKGHY和RKAFLHWYTGEGMDEMEFTE。     

细胞壁在植物抗病反应中的能动作用研究进展

植物在生命周期中会受到多种病原微生物的侵染,严重的会导致植物死亡,对农业生产造成严重的影响.部分植物与病原物互作进化的过程中产生防御反应,并形成自身的防御系统.植物抗病性是当今植物界研究的热点和难点问题之一,细胞壁是植物防御病原物侵染的第一道屏障.当病原物物侵染植物后,引起细胞壁的防御反应,诱导细胞对细胞壁进行修复,参...     

植酸酶在畜禽生产中的应用研究

植酸又名肌醇六磷酸,是一种抗营养因子。植酸在低pH条件下可与蛋白质分子的碱性基团结合,络合蛋白质,抑制胃蛋白酶、淀粉酶和胰蛋白酶等消化酶的活性,降低蛋白质、淀粉及脂类等营养成分的消化利用率。同时,植酸也具有极强的螯合能力,能与钙、钾、锌、铁及铜等矿物质形成不溶性盐类,影响矿物质的吸收。     

大肠杆菌分子分型方法研究进展

大肠杆菌是一种条件致病性的人畜共患病病原菌,对人和动物健康有着严重的危害.因致病性大肠杆菌造成的动物感染和动物产品污染在动物健康和公共卫生安全上是一个严重的问题.大肠杆菌的分子分型和系统进化分群对于准确、快速地确定大肠杆菌的污染及感染来源,判定不同大肠杆菌致病性之强弱,保障人类和动物健康,改善公共卫生环境具有重大意义....     

通过核基因ITS2片段研究四种鲇形目鱼类进化

采用鲇形目鱼鱼类通用引物扩增了鲇形目鱼类4种鱼,长吻(Leiocassi longirostris)、南方南方大口鲇(Si-lurus meridionalis)、黄颡鱼(Pseudobagrus fulvidraco)、斑点叉尾(Ictalurus punctatus)核DNA的ITS2片段,并构建UPMGA,NJ,ME和MP系统树。结果显示:根据遗传距离,斑点叉尾和黄颡鱼的亲缘关系最近(D=0.0661),接下来是黄颡鱼和南方大口鲇(D=0.1100),南方大口鲇和长吻(D=0.1184),斑点叉尾和南方大口鲇(D=0.1266),黄颡鱼和长吻(D=0.1490),斑点叉尾和长吻的亲缘关系是最远的(D=0.1503)。结果表明:长吻最早分化,其次是南方南方大口鲇和黄颡鱼,而斑点叉尾分化最晚。     

高通量的基因克隆

大规模基因测序已经完成了多个重要物种的基因组序列分析,功能基因组学研究进入了一个新时代。随着基因克隆和表达的发展,对使用简便、成本低廉、保真度高和易于在不同体系中穿梭的高通量克隆体系的了解、评价和使用已经成为基因组水平研究的重要问题。因此,高通量克隆技术成为功能基因组学研究中不可或缺的有力工具,且由此也带动了基因功能研究的发展。为此,该文对目前存在的多种高通量克隆方法原理和特性进行了介绍。     

猪圆环病毒2型山东分离株全基因组的克隆与序列分析

根据猪圆环病毒2型(PCV-2)全基因组序列,设计一对特异性引物,从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)病料中扩增出PCV-2基因组DNA,将基因片段克隆于pMD18-T载体,筛选获得含有相应片段的阳性重组质粒pMD18-T-PCV-2。对筛选出的阳性质粒进行测序。结果表明,PCV山东株的全基因组为1 767 bp,与国内外毒株核苷酸同源性高达99.6%。     

IBV AH1-99分离株N基因的克隆及序列分析

利用RT-PCR技术成功扩增出IBV AH1-99分离株的N基因全长cNDA,将其克隆到pMD18-T载体上。经酶切分析、PCR鉴定及核苷酸序列测定,成功获得该分离株N基因的重组质粒。序列分析结果表明,分离株N基因全长1 230个核苷酸,编码409个氨基酸。同部分IBV参考毒株相比,核苷酸同源性为85.8%~89.9%,氨基酸同源性为86.6%~91.0%,在进化关系树中,AH1-99与国内分离株X、LX4亲缘关系较近。