猪链球菌疫苗研究进展

猪链球菌为革兰氏阳性菌,是一种能够引起人和多种动物发病的重要人畜共患病病原。猪链球菌病分布广泛,英国于1954年最早报道该病,此后在养猪业发达的其他国家均有发生。我国最早由吴硕显(1949年)报道,在上海郊区发现本病散发病例。1963年在广西部分地区开始流行,继之蔓延开来。1968年丹麦首次报道了人感染猪链球菌2型导致脑膜炎,1998年、2005年分别在我国江苏省海安县和四川省资阳市暴发猪链球菌病,这两     

奶牛边缘无浆体MSP2的原核表达及抗原性鉴定

为克隆和原核表达牛边缘无浆体(A.marginale)膜表面蛋白2(MSP2),并分析其免疫原性,本研究通过PCR方法扩增A.marginale的MSP2基因,将其连接到pGEX 6p-1载体中,转化感受态细胞BL21(DE3),经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析,将纯化的MSP2重组蛋白免疫小鼠。结果表明表达并纯化了A.marginaleMSP2,其免疫原性良好,为制备单克隆抗体及亚单位疫苗的研制奠定了基础。     

鸽Ⅰ型副粘病毒病蜂胶疫苗免疫原性研究

针对鸽Ⅰ型副粘病毒病在我国的流行情况研制了蜂胶佐剂疫苗,并对该疫苗免疫原性进行了研究,结果表明蜂胶疫苗对鸽十分安全,每鸽最佳肌肉注射剂量为0.5 ml,7 d后便能抵抗强毒攻击,免疫保护期在6个月以上,疫苗在室温或4℃条件下保存12个月仍具有良好的免疫原性.     

副鸡禽杆菌lpxM蛋白的原核表达及免疫原性研究

【目的】探究副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum)外膜蛋白lpxM的免疫原性,为预防鸡传染性鼻炎提供理论参考。【方法】构建pET-28a-lpxM原核表达载体,经PCR扩增和双酶切鉴定后将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,并对诱导时间和诱导浓度进行优化,用尿素缓冲液纯化重组蛋白lpxM并进行SDS-PAGE分析。利用Western blotting鉴定重组蛋白的特异性。将重组蛋白与MONTANIDEISA 71 VG佐剂制备成疫苗v-lpxM,通过动物试验观察重组蛋白的免疫效果。【结果】重组质粒pET-28a-lpxM转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后成功表达,在37 ku处有目的蛋白特异性条带,在37℃、700 mmol/L IPTG、诱导4 h时蛋白表达量最高;重组蛋白lpxM在上清和沉淀中均有表达,且在沉淀中表达量相对较高;Western blotting结果显示,C型副鸡禽杆菌Modesto株的阳性鸡血清与纯化后的重组蛋白可发生免疫反应。免疫保护试验结果显示,v-lpxM疫苗对A、B和...     

旋毛虫肌纪虫及成虫表面抗原对小鼠的免疫保护作用

将感染旋毛虫肌幼虫的大鼠剖杀，收集３日龄成虫及４０日龄以上肌幼虫。将洗净的肌幼虫和成虫于含有０．２５％溴化十六烷基三甲基胺（ＣＴＡＢ）及２％脱氧胆酸钠的ＰＢＳ中培养２．５小时，离心取上清，经透析、浓缩即为表面抗原。将肌幼虫及成虫表面抗原按不同剂量和等体积弗氏完全佐剂乳化后免疫小白鼠，每次腹腔注射０．２ｍｌ，共免疫３次，每次间隔１周。攻击感染后剖检结果表明，肌幼虫及成虫表面抗原均具有较好的免疫原性，     

株血清学和免疫学特性的研究

 在鸡胚肾细胞上对HN₉₉株病毒进行了克隆纯化，经检测无外源病原污染。应用血清交叉中和试验确定了IBV HN₉₉株的血清型，并用免疫保护试验进行了验证，结果证明HN₉₉株与T株属同一血清型，与TJ、SD、湖北等地方分离株有一定的相关性。不同免疫剂量的效力试验结果表明用0.2 ml剂量的HN₉₉灭活苗接种试验鸡，能够对HN₉₉攻毒提供100%的保护，证明HN₉₉株具有良好的免疫原性。     

兔瘟病毒VP60基因重组真核表达质粒的构建及其免疫原性

采用RT-PCR方法扩增兔病毒性出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)衣壳蛋白VP60基因,PCR产物纯化后克隆到pMD19-T载体,获得重组质粒pMD19-T-VP60,并进行序列测定。测序正确的pMD19-T-VP60经EcoRⅠ与XhoⅠ双酶切后,将目的片段VP60插入真核表达载体pVAX-1,构建真核表达质粒pVAX1-VP60。将构建好的重组质粒pVAX1-VP60按500μg/只腿部肌肉注射25日龄家兔,同时设pVAX-1组、兔瘟组织灭活苗组和PBS组。分别于免疫后7,14,21,28,35,42 d对各组兔静脉采血,间接ELISA法检测血清中特异性抗体水平,结果显示PBS组和pVAX-1组未检测到特异性抗体,pVAX1-VP60组和兔瘟组织灭活苗组家兔都能产生高水平的特异性抗体,在特异性抗体水平高峰期,2组数据差异不显著(P0.05)。于免疫后3,7,14,21,28,35,42 d随机剖杀pVAX1-VP60组试验兔3只,取心、肝、脾、肺、肾、腿部肌肉,提取组织DNA,进行PCR检测,结果均检测到目的基因VP60的存在。免疫后28 d以滴度10~8的RHDV 0.5 m L/只腿部肌肉注射攻毒,pVAX-1组、PBS组、兔瘟组织灭活苗组、pVAX1-VP60组的相对保护率分别为0%,0%,90%,85%,表明pVAX1-VP60具有良好的免疫效果。     

猪疫苗研究的发展方向

由于各方面的原因，猪只传统疫苗的应用在市场中占有很大比例，使用传统的方法加强疫苗的管理，更进一步研究免疫原性好的制苗菌(毒)株，改进生产工艺及自动控制培养抗原的方法，提高细胞培养技术，提高传统疫苗质量，仍是疫苗研究的一个重要方向。     

转基因植物疫苗研究进展

众多研究表明,病毒的抗原决定簇及细菌毒素亚单位均能在转基因植物中成功表达,并保持良好的免疫原性.与现有的疫苗生产体系相比,植物生产疫苗具有安全、经济、稳定、高效等优势.本文概述了利用不同受体植物生产疫苗的研究现状、免疫原性评价及免疫原基因的优化表达策略.