浙江省中南山区林下三叶青高效栽培技术模式筛选及评价

为研究三叶青Tetrastigma hemsleyanum在浙江省的最佳栽培技术模式,以江西上饶种源为对照,采用4个试验种源（温州种源、金华种源、衢州种源和丽水种源）、4种栽培方式（地栽、下铺无纺布地栽、无纺布袋及控根容器）及4种基质（油茶林下腐殖土、40%专用基质+60%黄心土、30%锯末+60%黄心土+10%石砾、菜地土+10%草木灰）在浙江遂昌（试验地Ⅰ）、云和（试验地Ⅱ）及永康（试验地Ⅲ）分别设置3个试验地进行油茶Camelliaoleifera林下仿野生栽培多点试验,利用正交试验设计17个技术处理结合方差分析对4年生三叶青块根产量及总黄酮含量进行综合评价,筛选适合浙江省的林下栽培技术模式。结果表明,在试验地Ⅰ和试验地Ⅱ土壤基质对单株块根鲜质量影响最大,而在试验地Ⅲ栽培方式对单株块根鲜质量影响最大;3个试验地均表现为种源对块根总黄酮含量影响最大;针对单株块根鲜质量,金华种源、控根容器栽培方式或无纺布袋栽培方式（无显著差别）、40%专用基质+60%黄心土栽培基质表现最佳;针对块根总黄酮含量,丽水种源、地栽方式、菜地土+10%草木灰栽培基质表现最佳。     

三叶青种质资源遗传多样性的随机扩增多态性DNA分析

利用RAPD技术对64个三叶青种质资源样本进行遗传多样性分析,从40对引物中筛选出10对引物进行批量PCR实验。结果表明:64个三叶青样本的观测等位基因数(Na)为1.666 7~2.000 0,有效等位基因数(Ne)为1.247 9~1.701 3,Nei's基因多样性指数为0.167 0~0.398 4,Shannon多样性指数(I)为0.262 8~0.583 0,平均多态位点为7.5,平均多态百分数为93.145%;在遗传相似系数0.720 56处,可以将64个三叶青样本分成11大类;在遗传相似系数0.697 04处,则可将64个三叶青样本分成4大类;聚类分析的结果与种源的地理距离存在不一致性,这可能与种质资源库的地形、气候等自然因素有关。表明所测三叶青种质资源遗传多样性丰富,具有一定的开发利用价值,可为合理保护三叶青的基因资源及其遗传改良提供科学依据。     

三叶青高效快繁技术体系的建立

[目的]研究三叶青快繁技术.[方法]以药用植物三叶青组培苗的节部为外植体,研究了植物生长调节剂对三叶青增殖和生根的影响.[结果]在含有6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L的MS培养基中,三叶青增殖倍数最大;而三叶青的最佳生根培养基为MS+IBA 0.5 mg/L.生根的三叶青经过驯化后移栽到含有蛭石、草炭、珍珠岩(3:6:1)的混合基质中,一个月后成长为健康植株.[结论]该研究建立的三叶青高效快繁体系,为解决三叶青的人工栽培所需种苗提供了技术支撑.     

三叶青两个受体蛋白基因的克隆及功能分析

植物细胞受体类蛋白是一类重要的结构蛋白,在环境信号感知及细胞间信息传递中起重要作用。本研究克隆了三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)的两个受体蛋白基因ThRLP1与ThRLK1,并对其进行了生物信息学分析、器官特异性表达分析和在块根发育不同时期的表达分析,以明确两基因与三叶青芽发育和块根形成的相关性。生物信息学分析表明,所克隆的两个基因中一个为细胞外受体类蛋白基因(ThRLP1),其氨基酸序列具有特征的亮氨酸重复序列,亚细胞定位推测在细胞壁;另一个为质膜受体类蛋白激酶基因(ThRLK1),推测氨基酸序列中具有特征的丝氨酸/苏氨酸激酶的催化结构域,亚细胞定位推测在细胞核。器官特异性表达分析发现ThRLP1在块根中的表达量显著低于其他器官,ThRLK1在块根中的表达量显著低于枝蔓但高于其他器官,两个基因的表达水平并没有显示出与芽发育有相关性;块根发育不同时期表达量分析表明,ThRLP1在块根初始膨大期的表达量显著低于其他时期,ThRLK1表达量随块根发育进程而提高,ThRLK1基因的表达与块根发育进程呈现出一定的正相关性。所克隆的两个受体蛋白...     

浙江三叶青竹林林下栽培浅析

三叶青是珍贵的林下药材,具有较高的药用价值。但三叶青野生资源日渐稀少,本文分析了浙江三叶青的资源优势,通过基地选址、整地、育苗、栽植、管理等的浙江三叶青人工毛竹林下仿生栽培方法,促进浙江三叶青资源的可持续发展。     

立体栽培模式对三叶青植株生长的影响

[目的]研究立体栽培对三叶青植株生长的影响。[方法]针对三叶青大田平作栽培生长后期茎蔓匍匐在地、重叠郁蔽严重,导致位于下层的茎叶提前衰败死亡而严重影响生长的问题,借鉴立体农业的栽培技术原理,设计立体、平作等栽培模式试验,研究采用立体栽培技术对三叶青的生长效应。[结果]采用立体限根栽培技术能有效改善三叶青田间通风、透气、透光条件,显著提高植株抗病性,降低根腐病发病率,减少死苗率,提高三叶青地下块根产量和品质。[结论]立体限根栽培对降低三叶青病害、提高植株生长、提高单株产量具有很好的促进效果。     

不同光强处理对三叶青光合特性的影响

为探讨适宜三叶青Tetrastigma hemsleyanum生长的光强环境,并为其人工栽培和林下栽培提供基础,以2年生三叶青扦插苗为试验材料,对它们进行不同梯度的遮光处理,梯度设置为全光照（ck）,遮光30%,50%,70%和90%,研究光强对三叶青不同生育时期（快速生长期与高温缓慢生长期）的光合特性的影响。采用体积分数为95%乙醇浸提法测定三叶青叶片中光合色素,利用LI-6400XT便携式光合系统测定仪测定叶片净光合速率（P_n）,气孔导度（G_s）,胞间二氧化碳摩尔分数（C_i）和蒸腾速率（T_r）等指标,计算光饱和点（L_SP）,光补偿点（L_CP）,量子效率（A_QE）,暗呼吸速率（R_d）和最大净光合速率（P_max）,并拟合光响应曲线。结果表明:随着遮光程度的增加,叶绿素a,叶绿素b,总叶绿素和类胡萝卜素总体上呈现上升趋势,但是在不同生育时期变化不大;多数光合指标亦随遮光程度增加而呈现增长趋势,多在遮光70%时达到最大值之后下降,且快速生长期（P_n为4.19 μmol·m-2·s-1,G_s为53.54 mol·m-2·s-1,T_r为0.98 mmol·m-2·s-1,L_SP为340.49 μmol·m-2·s-1,A_QE为0.18 mol·mol-1,R_d为1.20 μmol·m-2·s-1,P_max为5.34 μmol·m-2·s-1）比高温缓慢生长期（P_n为1.74 μmol·m-2·s-1,G_s为17.53 mol·m-2·s-1,T_r为0.36 mmol·m-2·s-1,L_SP为159.28 μmol·m-2·s-1,A_QE为0.06 mol·mol-1,R_d为0.70 μmol·m-2·s-1,P_max为2.45 μmol·m-2·s-1）数值高41.67%~67.26%;C_i和L_SP呈现先下降后趋于稳定趋势,表明高温缓慢生长期的强光、高温、低湿等环境条件使其光合活跃度下降,对植株生长产生胁迫。综合试验结果得出结论,不同生育时期三叶青均在遮光度70%的条件下生长适宜。     

怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白3基因克隆和功能分析

通过怀玉山三叶青试管苗转录组数据库筛选到怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白3基因的核心片段,利用RT-PCR技术克隆该病毒增殖蛋白3基因,并进行序列分析、亚细胞定位、器官表达分析和功能分析.结果表明:怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白3基因cDNA总长度为873 bp,G+C含量为44.22％;怀玉山三叶青烟草病毒增殖蛋白3由29...     

怀玉山三叶青2个栽培种块根的转录组分析

[目的]筛选怀玉山三叶青2个栽培种:怀玉1号(HY1组)和怀玉2号(HY2组)与黄酮类化合物合成相关差异表达基因.[方法]以怀玉山三叶青怀玉1号(HY1组)和怀玉2号(HY2组)的块根为试验材料进行转录组分析.[结果]HY1组和HY2组的Clean?reads分别为42311662和41411202.2组样品Q30碱基...