新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞体外培养体系的建立

利用微量液体组织块贴壁法原代培养分离新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞,进行常规传代培养、冷冻和复苏;通过接触抑制和解除抑制研究该类细胞的增殖潜力,免疫荧光进行鉴定;并通过脂质体介导对分离到的新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞分别进行EGFP-N1和DsRed-N1基因转染。结果成功分离到新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞,体外可以大量传代和冷冻,目前已经传至50代以上,生长良好;冷冻复苏和接触抑制解除后仍可以正常培养和传代;细胞免疫荧光检测,波形蛋白表达阳性,角形蛋白表达阴性;转染48h后荧光显微镜下可以观察到绿色荧光和红色荧光,表明瞬时转染新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞可以获得成功,其中转染DsRed-N1基因的新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞已经传至60代以上。结果表明,本试验成功建立了新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞的体外培养体系,在体外能稳定培养和传代,并可以成功获得转基因的新生广西巴马小型猪肾成纤维细胞。     

脂肪组织的内分泌功能及其与肌肉组织间的分子信号联系

脂肪组织不仅是机体储存能量的主要场所,还是一个活跃的内分泌器官;骨骼肌同样也具有分泌活性物质的功能,能表达、合成和分泌多种生物信号分子。这些活性因子与许多重要的生理、病理过程有密切的关系。对脂肪组织的内分泌功能及其与肌肉组织间的分子信号联系进行了综述。     

适应无血清培养的HEK293细胞系的培育

为培育适合腺病毒增殖的无血清培养细胞系,本研究采用培养液渐进替换的方法获得了一株适应无血清培养的HEK293细胞(293SF),经检测293SF细胞具有稳定的支持腺病毒增殖与表达外源蛋白的能力;平均病变时间为97 h,比HEK293细胞缩短12.9%;毒价达到107.48TCID50/mL,比HEK293细胞提高43.3%;并且稳定性良好,连续传16代后293SF细胞状态与易感性未发生变化。该细胞系为腺病毒的无血清培养奠定基础。     

ST贴壁细胞悬浮驯化及应用

为将ST贴壁细胞通过自主驯化,使其能在ST-S细胞无血清培养基中悬浮生长且能稳定传代,在摇瓶中实现高密度生长,并应用于猪伪狂犬病毒(PRV)悬浮培养,经ST-A低血清培养基适应培养,对一株贴壁的ST细胞进行了无血清的全悬浮驯化,并将PRV在悬浮细胞中连续盲传培养。结果显示:ST悬浮细胞能在无血清培养基中传代,培养48 h至第3代后,所能达到的最终细胞密度为3.00×10^(6 )cells/mL以上;PRV连续培养至第5代,毒价可达到109.0 TCID50/mL。结果表明,用专用培养基可使ST贴壁细胞实现悬浮驯化,并可应用于PRV悬浮培养。本研究为获得高密度ST悬浮细胞和提高PRV增殖效率奠定了技术基础。     

卵巢表皮上皮的生物学特性及其细胞培养

将近90%以上的恶性卵巢癌发生于覆盖在卵巢表面的单层上皮细胞——卵巢表皮上皮(ovarian surface epithelium,OSE),将其称之为卵巢表皮癌。由于先前研究人员未找到合适的动物模型,卵巢表皮上皮细胞的培养方法在近期才得以确立。作者旨在于总结卵巢表皮上皮的生物学特性及其细胞培养方法和不同物种间卵巢表皮上皮特性的变化。     

日本公共图书馆文创产品开发现状的调查与分析——以中之岛图书馆商店为例

[目的 /意义]中之岛图书馆是日本少见的经营商店的公共图书馆,其文创产品的开发和销售是日本公共图书馆在文创产业中的缩影,它以品类丰富的文创产品,可爱精致的风格和清新时尚的推广方式而成为公共图书馆经营图书馆商店的佼佼者。其在文创上的思维和运营方式,亦有可圈可点之处。[方法 /过程]本文调研了中之岛图书馆商店的商品,整理了其图书馆商店中文创产品的形式与内容,分析了其文创产品的特征,提炼了几点其在文创产品生产与销售过程中的经验。[结果 /结论]中之岛图书馆商店遵循丰富、可爱、小巧、实用的产品设计原则,其利用图书馆商品进行图书馆形象宣传、结合当地文化设计产品的理念、利用商品与公众建立良好的互动关系、挖掘商品的教育功能、时尚的推广方式等经验,可为同行进入文创领域提供一定的启发和借鉴。     

昆虫黑化反应的分子机制研究进展

目的克氏原螯虾(Procambarus clarkii)属于节肢动物门甲壳纲十足目,也称淡水小龙虾。多巴脱羧酶(dopa decarboxylase)作为小龙虾先天免疫应答中的一种关键酶,在抵御外来病原体的侵害上起到了重要作用。本研究以克氏原螯虾为材料,克隆了Pc-ddc cDNA序列并对其进行生物信息学及组织mRNA表达分析。方法通过分子生物学技术构建大肠杆菌表达载体,并进行生物信息学分析,同时应用qRT-PCR技术分析其mRNA组织表达分布。结果生物信息学分析表明：获得了开放阅读框全长为1 425 bp的Pc-ddc基因的cDNA序列,编码474个氨基酸残基,多肽的理论分子量为52.99 ku,蛋白分子式为C₂₃₈₄H₃₆₈₉N₆₄₇O₆₇₄S₂₅,等电点为5.98,为弱酸性蛋白且N-末端无信号肽。亚细胞定位表明：Pc-DDC蛋白在线粒体中最多;组织表达分析表明：Pc-ddc mRNA在检测的6个组织中差异表达,其中,淋巴组织表达量最高。结论本研究为克氏原螯虾等无脊椎动物先天免疫系统的深入探索提供了理论支撑。     

银耳生物学特性的研究

银耳(Tremella fuciformis Berk)孢子接种在琼脂培养基上萌发出菌丝,而后再把菌丝培养成银耳子实体。把银耳菌和耳友菌分剔接种在木村培养基上,都不会生长出银耳子实体。银耳菌和耳友菌混合接种在木材培养基上,就能生长出银耳子实体。因此银耳纯种不宜作为银耳生产中用的菌种,栽培上一定要用银耳混种。试验结果还表明银耳不是木腐菌。     

华富苹果离体叶片再生的主要影响因素研究

以花药培养选育的富士品种"华富"组培苗的叶片为试材,研究了离体叶片诱导再生不定芽过程中不同激素种类与组合、暗处理时间等因素对不定芽再生率的影响。结果表明:试管苗继代培养3～4代,取顶部嫩叶3～4片,剪除叶片边缘,叶片以近轴面接种到最佳诱导再生培养基MS+TDZ 2.0mg/L+IAA 0.75mg/L+蔗糖30g/L,pH值5.8,黑暗培养10～15d后,转入光照培养条件下,再生率达83.3%～86.7%。再生不定芽分化15～20d后转接到增殖培养基MS+BA 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L上,当不定芽长度约2cm时再转接到生根培养基1/2MS+IAA 1.0mg/L+蔗糖2%,15d后,生根率可达95.0%以上。     

钙胁迫对大白菜幼苗生长的影响

为了明确钙胁迫对大白菜幼苗生长的影响,选取6份对钙胁迫敏感性不同的大白菜材料10S04、10S10、10S36、10S157、10S237和10S327,采用珍珠岩沙培法,分别浇施含有不同钙量的混合Hoagland营养液,营养液的钙供给量分别为苗期单株供给96mg、60mg、30mg和0mg。定期观察幼苗生长情况,在培养40d时测定幼苗地上部分与地下部分生长量。结果表明,在钙胁迫下,大白菜幼苗各部分生长均不同程度受到抑制,其根系受抑制程度较地上部分严重,幼苗叶片长度和宽度受抑制程度相似,叶片数受抑制作用不明显;随着钙胁迫增加,植株生长受到的抑制程度逐渐加强,在缺钙(0mg)胁迫下,根系鲜质量分别只有全钙(96mg)营养液下的13.7%~76.1%,30mg低钙胁迫条件下,根系鲜质量分别只有全钙营养液下的33.5%~89.6%;不同大白菜材料耐钙胁迫能力不同,在60mg钙胁迫下,10S04、10S10、10S36、10S157四份材料的根系均受到显著抑制,10S237在30mg钙胁迫下根系才受到显著抑制,而10S327在不同低钙水平间根系差异不显著,仅在缺钙条件下根系受到显著抑制,说明10S327对钙胁迫不敏感,且耐钙胁迫能力最强。