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11.
RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
本研究使用分别扩增整个S1糖蛋白基因 (引物A)和S1糖蛋白基因N_端高变区Ⅰ (引物B)的 2对引物对 3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及 5个地方分离株 (C60 ,D41A ,D41B ,A112 1,A1171)进行RT_PCR扩增。用引物A时 ,有 5个IBV毒株扩增到目的片段 (172 0bp) ;用引物B时 ,所有 8个IBV毒株均得到与预计大小相符的目的产物 (2 2 8bp)。对 172 0bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切 ,结果得出 3个不同的RFLP图谱 ,其中M41、Connecticut、D41B具有相同的HaeⅢ酶切图谱。Arkansas和D41A则分别具有互不相同的图谱 ;对 2 2 8bp的PCR产物进行DdeⅠ、RsaⅠ限制性内切酶消化 ,根据它们的RFLP图谱 ,8个IBV毒株可分为 5个基因型。综合 2对引物的PCR产物的RFLP分析结果 ,8个IBV毒株可分为 7个基因型 ,分型的结果与传统的血清学方法吻合。本研究建立的方法和技术具有快速、简单、特异、灵敏等优点 ,为现场流行毒株的定型(基因型 /血清型 )及其S1基因变异的跟踪研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础。 相似文献
12.
用电沉积法制备Mo-W-Ni-Pb-Ca多元活性阴极,研究了在0.5mol/L H2SO4中的析氢反应,结果表明,多元阴极具有较高的电催化活性,其析氢过电位比软钢阴极降低305mV,i0提高三个数量级,且有较好的稳定性,并用光电子能谱研究了表面组成和结构。证实表面有:Ni,NiO,MoO2,MoO^2-4,WO3,PbO2,PbO,Ca^++等物质。 相似文献
13.
14.
藏系绵羊随机扩增多态性DNA最佳反应体系的研究 总被引:2,自引:1,他引:1
以高原型藏羊的基因组DNA为模板,通过对RAPD反应体系中的各种参数进行优化试验,建立了适宜于藏系绵羊RAPD分析的最佳反应体系:在PE2400型DNA扩增仪的25μL反应体系中,模板DNA的量为60-120ng,引物量为4-8pmol,Mg^2 浓度为2.0mM,Taq DNA聚合酶为1-2.5U,dNTP浓度为150-200μM;94℃预变性3分钟后35次循环的参数设定为:94℃1分钟,36℃1分钟,72℃2.5分钟,最后72℃延伸10分钟,利用这些条件对藏系绵羊的基因组DNA进行RAPD分析,其结果的重复性和可靠性大为提高。 相似文献
15.
应用电子显微镜和X射线微分析技术,对貉受精过程和受精卵膜元素研究的结果表明,貉卵子的卵丘细胞具有吞噬和过滤功能;卵丘细胞间的精子顶体尚未发生囊泡化,而附着于透明带的精子发生了顶体反应,并以80°角穿入透明带,在其穿入的前方打开一个通道,最后穿过。穿过透明带的精子以赤道段或顶体后区同卵膜融合,并激发皮质颗粒释放,接着穿入卵内,最终发育成雌、雄原核。原核期受精卵质膜上具有高含量的钙,并呈集团分布,它在皮质颗粒胞吐释放中起着重要作用。 相似文献
16.
随着工程建设的发展,在深厚软土层上建造大型工业建筑、高层房屋及港口码头工程日益增多,因此软粘土加固技术越来越受重视。纵观现有的加固方法各有其不适应性,因此需要大力开发研究新的加固技术。 相似文献
17.
本文应用聚合酶链反应(PCR)技术从构建的新城疫病毒(NDV)cDNA文库中扩增含编码F糖蛋白前体──Fo酶切位点序列的359bp的F蛋白基因cDNA片段。将此359bpcDNA片段经光敏生物素标记后,即成NDV-cDNA探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出NDV强毒株和疫苗毒株的基因组RNA,而不与IBDv-dsRNA、AIBv-ssRNA、EDS76-dsDNA、MDV-dsDNA,FPV-dsRNA及AILV-dsDNA发生交叉杂交反应。试验结果表明:尽管该探钎含有编码Fo蛋白酶切位点序列的碱基顺序,但它还是不能把NDV的强、弱毒株区分开。这说明NDV强、弱毒株比区域内的碱基存在着相当大的同源性。不过,此探针对NDV来说具有特异性,这就为NDV的诊断技术开创了基因水平检测的新途径。 相似文献
18.
V Bitsch 《Acta veterinaria Scandinavica》1978,19(1):110-128
A study of the basic reaction in neutralization of virus (V) by virus-neutralizing antibody (VNA) was performed with infectious bovine rhinotracheitis virus and serum collected from naturally and experimentally infected cattle after the primary immunization phase. In constant-virus/varying-serum neutralization tests a direct proportionality between VNA titer and length of preincubation was observed and found to be in accordance with basic laws of neutralization. A deviation from this direct proportionality, which was partly attributed to the presence of a dissociable V-VNA complex, was seen with relatively short preincubation. Expressing a relationship between VNA titer, length of preincubation, and virus dose under conditions where a dissociable V-VNA complex can be ignored, a log. VNA/log. V equivalence factor of neutralization was introduced. A linear relationship was found between VNA titer, taken logarithmically, and preincubation temperature. A rise in temperature by 10°C gave an increase in VNA titer of approx. 1.2 in log2. Formulae are presented for the neutralization rate factor corrected for a demonstrated invalidity of the percentage law, and for the relation between the neutralization rate factor and VNA titer. It is concluded that the results presented have elucidated the possibilities of improving the sensitivity of neutralization tests. 相似文献
19.
Gülşen Sertkaya Marta Martini Paolo Ermacora Rita Musetti Ruggero Osler 《Phytoparasitica》2005,33(4):380-390
During the late summer-early autumn of 2002, surveys were carried out in Turkey to determine the presence of phytoplasma diseases
in fruit trees. Phytoplasmas were detected and characterized by PCR-RFLP analysis and TEM technique in stone fruit and pear
trees in the eastern Mediterranean region of the country. Six out of 24 samples, including almond, apricot, peach, pear and
plum, gave positive results in PCR assays. RFLP analysis usingSspI andBsaAI enzymes of PCR products obtained with primer pair f01/r01 enabled identification of the phytoplasmas involved in the diseases.
Stone fruit trees, including a local apricot variety (‘Sakıt’) and a pear sample, were found to be infected with European
stone fruit yellows (ESFY, 16SrX-B) and pear decline (PD, 16SrX-C) phytoplasmas, respectively. This is the first report in
Turkey of PD phytoplasma infecting pear and of ESFY phytoplasma infecting almond, apricot, myrobalan plum and peach; ESFY
phytoplasma infecting Japanese plum was previously reported.
http://www.phytoparasitica.org posting July 21, 2005. 相似文献
20.