狂犬病病毒核蛋白基因在大肠杆菌中稳定表达条件的优化及纯化

将狂犬病病毒SRV9株核蛋白基因按正确的读码框克隆至GST融合表达载体pGEX-4T-1中,转化至大肠杆菌Rosetta株,IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经SDS-PAGE分析显示,相对分子量约为82 kD,与预期大小一致。Western-blot检测结果表明,融合蛋白能与多克隆阳性血清发生特异性反应。为获取大量ELISA包被用核蛋白,试验还借助SDS-PAGE方法对重组目的基因的表达条件进行了优化,比较了诱导温度、菌密度I、PTG浓度、诱导时间等参数对重组基因表达的影响,以确定最佳诱导表达条件。结果表明:27~32℃,OD5500.3~0.4,IPTG 0.06 mmol/L、诱导至OD550值不再增加时为最佳诱导表达条件。优化后经扫描分析显示,所表达融合蛋白占菌体总蛋白的20%以上。经包涵体纯化和亲和层析纯化,可获得纯度较高的GST融合蛋白。     

PBP1基因在大肠杆菌中的表达及其表达产物的纯化

将获得的拟南芥黑芥子酶结合蛋白PBP1基因表达载体pTYB2-PBP1导入大肠杆菌ER2566细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳显示,PBP1-CBD融合蛋白获得了较好的表达。进一步对PBP1蛋白进行分离纯化,SDS-PAGE电泳结果显示分离纯化效果较好,所获得的纯化的PBP1蛋白可进一步用于研究PBP1与MBP6的酵母双杂交技术。     

安徽天堂寨领春木群落结构研究

采用样方法对安徽天堂寨自然保护区的珍稀濒危植物领春木群落结构特征进行了调查研究。结果发现,在领春木群落样方中,共有高等维管植物77种,隶属于48科71属;领春木垂直结构可分为乔木层、灌木层、草本层;群落中领春木的重要值为131.65%,显著高于其他树种,为群落中绝对优势种;其物种多样性指数不高,群落的Simpson指数、Shannon-Wiener指数和群落均匀度分别为0.8466,2.4974和0.7099,应加强领春木自然群落人工保护和管理,以防该物种生态系统再度遭到破坏。     

猪瘟病毒E2基因DNA疫苗的试验研究

用构建的E2-pcDNA4.0 DNA疫苗对Balb/c小鼠、家兔和仔猪进行免疫,经3次肌肉接种,间隔15 d免疫后,测定抗体水平.结果表明,构建的DNA疫苗能诱导小鼠产生中和性抗体,免疫家兔最少可抵抗10个最小感染剂量(M ID)的猪瘟兔化弱毒苗的攻击.攻毒试验结果表明,E2-pcDNA4.0 DNA疫苗可抵抗致死剂量的CSFV石门株强毒的攻击.     

全放牧婆罗门牛和BMY牛的超数排卵效果及激素水平比较

为了比较婆罗门牛和BMY牛的雌二醇(E2)、孕酮(P4)水平及胚胎生产潜力,并探讨MOET技术在BMY牛扩繁中的应用前景,采用进口激素(日本产FSH 24~36 mg+美国产PG 35 mg)和国产激素(国产FSH 10~12 mg+国产PG 0.8 mg)对全放牧婆罗门牛和BMY牛进行超排,并于超排前(同期发情第7天)、超排开始、超排第3天、超排发情当天和胚胎回收当天采集血液,采用RIA法分析血浆中的E2和P4水平。结果表明,BMY牛的黄体数和获胚(卵)数、可用胚数分别较婆罗门牛高2.09个和0.95、0.36枚,但差异不显著(P>0.05);BMY牛的排卵率较婆罗门牛高18.46%(P<0.01),而可用胚率则较婆罗门牛低2.55%(P<0.01)。BMY牛在5个处理时段的E2和P4平均值分别较婆罗门牛高0.58 pg/mL(P<0.01)和1.44 ng/mL(P>0.05),在各处理时段的P4水平变化规律几乎与婆罗门牛一致,E2/P4值为婆罗门牛的5.16倍。结果提示,BMY母牛的E2和P4水平高于婆罗门牛,在激素水平和繁殖性能方面表现出一定的杂种优势;E2水平低是婆罗门牛发情微弱和排卵率低的主要原因之一;在同等放牧管理和超排处理条件下,婆罗门牛及其杂种BMY牛对外源激素的敏感性基本一致,具有同等的胚胎生产潜力。     

杜仲叶采收时间与采叶量的研究

通过对杜仲叶不同采收方式的研究,结果认为,不同采叶方式对杜仲树体及叶生长均有不同程度的影响:采叶量愈大、采叶次数愈多,树木高、径生长量愈小,新生叶叶面积也愈小.但是,50采叶量组和70采叶量组、1次采叶组和2次采叶组差异不显著.所以,从采叶后对杜仲高、径生长量以及叶片生长的影响来看,一次采叶量以50左右为宜,一年内采叶次数不宜超过2次.     

引种越桔果实中维生素E,SOD,氨基酸及无机元素含量

对从国外引种栽培的１０个越桔优良品种果实的成分分析表明，越桔果实中维生素Ｅ含量和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性较高，分别在２．７～９．５μｇ／ｇ和（５．３９～５５．３９）×１６．６７×１０－９ｍｏｌ／ｓ；果实中无机元素Ｃａ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｐ、Ｚｎ含量较丰富；果实中含有１５种氨基酸，总氨基酸含量在１．０８５％～２．５４９％之间。不同品种之间，果实中营养成分含量差异较大。综合评价认为，越桔果实为一优良的名优稀特果品。     

硒对油菜苗期脯氨酸和丙二醛含量的影响

应用盆栽土培与水培相结合的方式 ,设计不同硒浓度对油菜苗脯氨酸和丙二醛含量的影响 ,试验表明 :各处理脯氨酸含量顺序为 :12 μg .ml-1>15 μg .ml-1>18μg .ml-1>2 1μg .ml-1>2 4 μg .ml-1>9μg/ml-1>对照 ,各处理丙二醛含量顺序为 :2 4 μg .ml-1>2 1μg .ml-1>对照 >15 μg .ml-1>18μg .ml-1>12 μg .ml-1>9μg .ml-1,适量的补硒浓度可降低过氧化产物丙二醛的产生 ,超过一定范围则促进丙二醛的生成。补施硒可提高脯氨酸的含量 ,增强油菜苗的抗性     

维生素E对附植前小鼠胚胎发育与一氧化氮生成的影响

为了探讨维生素E对一氧化氮(NO)的产生及其对早期胚胎发育的影响，用Griess试剂法检测了附植前小鼠胚胎中一氧化氮的生成情况。结果表明，附植前胚胎中有NO的产生，且从第1天到第3天有逐渐上升的趋势，第4天有所下降，用抗氧化剂维生素E处理后，NO的生成量下降，表明在附植前小鼠胚胎发育中维生素E对NO的产生可能起到一定的抑制作用。     

大肠杆菌表达系统及其研究进展

从表达量、表达活性、实验步骤的简化和成本控制4个方面综述大肠杆菌表达系统及其最新的研究进展。