内蒙古阿鲁科尔沁国家级自然保护区内居民KAP调查分析

采用问卷调查方法,调查分析了内蒙古阿鲁科尔沁国家级自然保护区内居民对自然保护及保护区的相关知识、态度和行为（KAP）。结果表明：保护区内的居民对自然环境保护以及相关法律和条例都有所了解;有96．3％的居民认为“放牧地及牧草”是保护区内最有用的资源。保护区75％的居民认为自然保护对他们有好处,但还有46．4％的居民认为没有必要建立保护区;有64．3％的居民认为设立保护区后收入大大降低;有70．2％的居民对保护区内禁牧政策有意见,有65．5％的居民认为禁牧时间太长。有83．8％的居民希望政府发放补贴以弥补牧民的损失;有83．3％的居民表示不愿意从保护区搬出。有51．2％的居民表示未参加过培训或相关活动;有42．9％的居民表示能够制止破坏自然环境的他人行为;有81％的居民表示平时能够告知其他村民不要进入保护区做破坏活动;有86．9％的居民表示能够对自己的孩子做有关自然保护的教育。本文的调查结果对有关该保护区与社区居民相互作用关系的处理提供了基础资料。     

内蒙古绒山羊KAP4序列及结构的特征分析

选择内蒙古绒山羊KAP4 cDNA文库为研究材料,通过对不同物种KAP4核苷酸和氨基酸序列的比较分析,发现山羊KAP4的氨基酸序列与其它哺乳动物如人、绵羊的氨基酸序列有很多一致或保守的区域.通过对绒山羊KAP4蛋白的二级结构预测,发现绒山羊KAP4的二级结构中无规则线性长链结构所占比例最多,β-折叠结构占到了较少的部分,几乎没有发现α-螺旋的存在.     

3个山羊品种KAP6.2和KAP7基因的PCR-SSCP分析

采用PCR-SSCP法对３个山羊品种角蛋白辅助蛋白（KAP6.2,KAP7）进行了多态性研究。结果显示,３个品种中KAP7均未出现多态,而KAP6.2均出现了３种带型：AA、BB和AB。Hardy-Weinberg分析表明辽 苛高代杂种山羊和黎城大青羊未达到平衡状态,辽宁绒山羊达到了平衡。测序结果显示,和GenBank登陆序列相比,AA和BB均发生了碱基变化。其中AA型出现了以下变异：107 bp(A-G),196 bp(C-T),199 bp(T-G),252 bp(A-T),265 bp(C-T),291 bp(A-G),292 bp(T-C),345 bp(T-G);BB型出现了以下变异：164 bp(T-C),194 bp(T-C),199 bp(T-G),201 bp(C-G),233 bp(A-G),275 bp(A-G),299 bp(A-G),309 bp(G-C),327 bp(A-G),352 bp(G-T)。分析表明AA型和BB型变异均造成了氨基酸序列的变化。     

羊驼皮肤KAP3.2基因3′端序列的cDNA克隆及序列分析

利用大规模筛选表达序列标签(ESTs)方法,从羊驼皮肤cDNA文库中筛选出角蛋白关联蛋白(Ker-atin Associated Protein,KAP)KAP3.2基因的3′端序列,Genbank序列号为EV554632。利用生物信息学方法对此序列进行分析,结果表明,该基因片段大小为454bp,完整的ORF编码35个氨基酸;通过对其功能域分析得出,不含信号肽,在系统进化上,羊驼与人和黑猩猩的遗传距离较近。     

新疆南疆和田羊、卡拉库尔羊毛囊KAP7基因的原核表达及多克隆抗体制备

本研究旨在制备新疆南疆平原型和田羊、山区型和田羊与卡拉库尔羊3个地方品种（系）绵羊毛囊角蛋白关联蛋白7（keratin associated protein 7,KAP7）基因多克隆抗体,为探索毛囊KAP7基因对半粗毛羊羊毛产量与质量的影响奠定基础。以3个品种绵羊的皮肤毛囊为试验材料,提取总RNA,反转录得到cDNA,PCR扩增获得绵羊毛囊KAP7基因,构建pMD19-T-KAP7克隆质粒,对重组质粒进行PCR、酶切鉴定和序列分析,再构建pET-28a（+）-KAP7原核表达重组质粒,并在大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中表达,SDS-PAGE电泳检测原核表达的绵羊毛囊KAP7蛋白,经提取、纯化、回收得到目的蛋白,用其免疫家兔得到绵羊毛囊KAP7多克隆抗体血清,并用间接ELISA法检测其抗体效价。结果表明,与美利奴羊比对,平原型与山区型和田羊KAP7基因序列的同源性达99%,但平原型和田羊KAP7基因第22位碱基由G变为C,造成其KAP7蛋白第8位氨基酸由Gly变为Arg;山区型和田羊第70位碱基由A变为C,造成其24位氨基酸由Thr变为Ala;卡拉库尔羊毛囊KAP7基因与美利奴羊同源性达100%,其KAP7蛋白氨基酸序列与美利奴羊没有差异。绵羊毛囊KAP7基因原核表达重组质粒pET-28a（+）-KAP7可以在大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中表达目的蛋白,其大小约为10 ku。利用绵羊毛囊KAP7蛋白免疫家兔得到的多克隆抗体阳性血清具有免疫活性和特异性,其抗体效价达到1：10 000。     

内蒙古绒山羊KAP9.2基因遗传多态性及其与生长性状的关联分析

【目的】探究内蒙古绒山羊KAP基因家族角蛋白相关蛋白9.2(KAP9.2)基因插入/缺失(insertion/deletion, InDel)突变及其与生长性状的关系,以期为内蒙古绒山羊分子育种提供理论基础。【方法】选取606只雌性阿拉善型内蒙古绒山羊为研究对象,采集耳组织提取DNA并测定其体重及体高、体长和胸围等体尺数据,利用琼脂糖凝胶电泳方法与直接测序技术检测KAP9.2基因的InDel突变,检测遗传多样性指标,利用SPSS 23.0软件分析突变位点与生长性状的关联性。【结果】在内蒙古绒山羊KAP9.2基因外显子区存在30 bp的InDel突变,产生II、ID和DD 3种基因型。多态信息含量(PIC)显示,该位点在育成羊群体中属于中度多态(0.250.05);在整个群体中,属于低度多态(PIC<0.25),但偏离哈代-温伯格平衡状态(P<0.05)。关联分析结果表明,在育成羊群体中,此30 bp的InDel突变对体长和十字部高有显著影响(P&l...     

绵羊角蛋白关联蛋白2基因的克隆表达与生物信息学分析

本研究旨在克隆新吉细毛羊和小尾寒羊的角蛋白关联蛋白2（keratin-associated protein 2,KAP2）基因并对其进行生物信息学分析,并初步探讨KAP2基因与羊毛毛用性状分子的关系。分别提取新吉细毛羊和小尾寒羊皮肤组织中总RNA,用RT-PCR方法扩增KAP2基因,将PCR产物克隆于pMD19-T载体,转入大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆。提取扩增后的重组质粒pMD19-T-KAP2并进行PCR扩增、双酶切鉴定、序列测定及蛋白质结构预测。结果表明,试验成功克隆了大小为463 bp的KAP2基因,开放阅读框架（ORF）长414 bp,编码137个氨基酸。测序结果比对发现,与小尾寒羊KAP2基因相比,新吉细毛羊的KAP2基因中存在1个由G→A的碱基突变,编码氨基酸由精氨酸（Arg）变为谷氨酰胺（Gln）,属于错义突变。新吉细毛羊和小尾寒羊的KAP2蛋白的分子质量分别为14.81和14.84 ku,等电点分别是9.67与9.82,两种绵羊KAP蛋白的基本理化性质无明显差异,同属于碱性疏水性、跨膜蛋白;预测到蛋白二级结构均由α螺旋、延伸链、无规则卷曲等构成,新吉细毛羊和小尾寒羊KAP2蛋白三级结构中存在一个由α螺旋引起的空间结构的差异位点。综合以上结果推测KAP2基因可能是影响羊毛性状的差异基因,本试验结果可为探讨两种绵羊毛用性状表型差异的分子遗传奠定理论基础。     

绒山羊和绵羊KAP1.4基因cDNA序列的克隆及其编码蛋白的结构分析

对绒山羊和绵羊KAP1.4基因的编码区进行克隆与分析,在此基础上预测了KAP1.4蛋白的分子结构,为研究毛(绒)用性状的分子基础提供资料。结果表明,克隆测序获得绒山羊、绵羊KAP1.4基因编码区序列长度为579bp和549 bp,分别编码192个氨基酸和182个氨基酸。生物信息学分析表明,绒山羊和绵羊KAP1.4蛋白的基本理化特性方面无明显差异,属于非跨膜蛋白,信号肽的长度和裂解点相同,都具有1个蛋白激酶C磷酸化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和6个N端酰基化位点;蛋白的二级结构由β折叠、β转角和无规则卷曲构成。三级结构预测显示,绒山羊与绵羊KAP1.4蛋白在空间三维结构上存在显著差异,将会进一步影响其功能的发挥并成为调控产毛(绒)性状的影响因子。     

大学生膳食营养状况调查与分析

目的了解河北北方学院大学生的膳食营养状况．方法随机抽取该校480名大学生,进行自设计营养KAP问卷调查,分析其KAP评分．同时发放膳食调查表,采用24h回顾法对调查对象进行连续4天的膳食情况调查．结果该校学生营养知识普遍缺乏,KAP平均分为53．19±4．27分,仅占总分的64．08％．食品相关专业学生的营养知识评分和...     

天津市布鲁氏菌病高发区高危人群“知信行”调查

为了解天津市布鲁氏菌病高发区高危人群的布鲁氏菌病防控知识、态度和行为水平及其相关影响因素,以便为下一步宣传干预工作提供参考,基于问卷调查和电话回访的横断面调查研究,对天津市4个布鲁氏菌病高发区牛羊养殖户、基层兽医人员进行抽样调查,然后调查数据录入Excel,使用SPSS软件进行统计分析,查找影响布鲁氏菌病"知信行"水平的因素。结果显示:高危人群的布鲁氏菌病平均知晓率为44.93%,大部分高危人群对布鲁氏菌病防控态度积极,部分基层兽医人员和养殖户对布鲁氏菌病防控存在不良行为和不良防护习惯;单因素Logistic回归分析可见,布鲁氏菌病高危人群的"知信行"水平与职业、性别、学历、工作年限有关(P <0.05);多因素Logistic回归分析显示,牛羊养殖户、工作年限小于10年的高危人群"知信行"水平较低(P<0.05),模型拟合度较好(P> 0.05),ROC曲线下面积(AUC)为0.732(95%CI:0.673～0.791)。结果表明,牛羊养殖户、工作年限小于10年的高危人群,其布鲁氏菌病"知信行"水平有待提高,需要在未来宣传干预中,提高培训的针对性、实用性、专业性,拓展渠道,注重效果。