灵芝14-3-3蛋白基因的电子克隆与表达分析

通过电子克隆技术，获得14-3-3基因的cDNA序列全长，并采用生物信息学方法，借助电子计算机和相关的生物信息学软件，对该基因编码蛋白从基本理化性质、疏水性/亲水性、亚细胞定位、跨膜区结构、信号肽、高级结构及系统发育树分析等进行了预测和分析。该cDNA编码蛋白由257个氨基酸组成，相对分子质量为29．0145 kDa，亲水性和疏水性比较平衡，定位于细胞质，不存在信号肽，无跨膜螺旋区，且二级结构由6．23％无规则卷曲，66．54％α-螺旋和27．24％延伸链组成。同源比对分析显示，该酶基因编码的氨基酸序列与污叉丝孔菌、双孢菇和木耳等蘑菇类高等真菌中的14-3-3基因所编码的氨基酸序列高度同源。实时荧光定量PCR结果表明，灵芝14-3-3基因在液体静置培养过程中的表达量显著高于振荡培养。     

山杏组培苗生根培养基优化及移栽

以山杏茎尖继代组培苗为材料,研究了生根培养基类型,以及移栽时基质配比和木醋液喷施浓度等因素对组培苗生根和移栽的影响。结果表明:最适宜山杏组培苗生根的培养基为1/2MS+1.5 mg/L IBA+木醋液(稀释2 000倍),生根率达到100%,平均根数为5.589,平均根长为2.644 cm,植株生长良好。移栽时的基质配比为蛭石:珍珠岩:泥炭土=1:1:1,对生根组培苗的成活和生长效果最好,成活率可达79.41%。在移栽苗的叶片上喷施稀释1 500~2 000倍的木醋液对其生长效果较好。本研究可为山杏优良品种的工厂化育苗奠定理论基础。     

金弹试管苗叶片MLP2基因的克隆及其生物信息学分析

采用RT-PCR结合RACE技术,以金弹(尤溪金柑Fortunella crassifolia cv.Youxijingan)试管苗的叶片为材料,克隆得到金弹Fc-MLP2基因的全长cDNA序列,其在GenBank中的登录号为JX310276.Fc-MLP2基因全长908 bp,含有一个669 bp的开放阅读框,编码223个氨基酸.生物信息学分析表明:该蛋白是定位于细胞外的一种疏水性分泌蛋白,具有2个功能位点、13个磷酸化位点和信号肽,其二级结构由α螺旋、β折叠、β转角、无规则卷曲组成.系统进化树分析表明,金弹Fc-MLP2与粗皮柠檬的RlemMLP2蛋白亲缘关系较近,聚为同一类.该蛋白可能在植物抗虫、抗病原菌、抗饥饿和延缓植物衰老方面起到一定作用.     

纤维素酶和木聚糖酶对象草青贮发酵品质及体外消化率的影响

为探讨纤维素酶和木聚糖酶对象草（Pennisetum purpureum Schumach）青贮发酵品质与体外消化率的影响，试验设对照组（CK）、添加纤维素酶组（CE）、添加木聚糖酶组（XE）和组合添加酶组（CX，纤维素酶+木聚糖酶）。青贮7，30，60，90 d后开窖取样，测定相关指标。结果表明：与对照组相比，CE，XE和CX组显著提高了乳酸含量（P<0.05），降低了pH、氨态氮/总氮和干物质损失；添加酶处理组中性洗涤纤维（Neutral detergent fiber，NDF）、酸性洗涤纤维（Acid detergent fiber，ADF）、纤维素、半纤维素含量均低于对照，并且水溶性碳水化合物、葡萄糖、果糖和蔗糖含量增加；体外发酵试验中，CE，XE和CX组青贮饲料干物质消化率、中性洗涤纤维消化率、酸性洗涤消化率和体外产气均显著高于CK（P<0.05），且CX组体外产气量最高，而CE与XE之间差异不显著。综上，添加纤维素酶、木聚糖酶提高了象草青贮发酵品质与体外消化率，组合添加酶效果更好。     

Development of an isocratic HPLC method for catechin quantification and its application to formulation studies

The aim of this study was to develop a simple, rapid and accurate isocratic HPLC analytical method to qualify and quantify five catechin derivatives, namely (+)-catechin (C), (-)-epigallocatechin (EGC), (-)-epicatechin gallate (ECG), (-)-epicatechin (EC) and (-)-epigallocatechin gallate (EGCG). To validate the analytical method, linearity, repeatability, intermediate precision, sensitivity, selectivity and recovery were investigated. The five catechin derivatives were completely separated by HPLC using a mobile phase containing 0.1% TFA in Milli-Q water (pH 2.0) mixed with methanol at the volume ratio of 75:25 at a flow rate of 0.8ml/min. The method was shown to be linear (r(2)>0.99), repeatable with instrumental precision<2.0 and intra-assay precision<2.5 (%CV, percent coefficient of variation), precise with intra-day variation<1 and inter-day variation<2.5 (%CV, percent coefficient of variation) and sensitive (LOD<1μg/mL and LOQ<3μg/mL) over the calibration range for all five derivatives. Derivatives could be fully recovered in the presence of niosomal formulation (recovery rates>91%). Selectivity of the method was proven by the forced degradation studies, which showed that under acidic, basic, oxidation temperature and photolysis stresses, the parent drug can be separated from the degradation products by means of this analytical method. The described method was successfully applied in the in vitro release studies of catechin-loaded niosomes to manifest its utility in formulation characterization. Obtained results indicated that the drug release from niosomal formulations was a biphasic process and a diffusion mechanism regulated the permeation of catechin niosomes.     

大连森林动物园散放区草食动物混养现状及模式初探

通过2004～2009年大连森林动物园的数据调查,从食物的营养价值,环境的丰富度,种群密度三个角度入手,针对大连森林动物园散放区草食动物在半散放混养条件下饲养繁殖及动物群体管理进行浅析,分析其驯养繁殖管理方案的优势,并从可持续利用的自然小生境角度出发,对建立稳定的动物关系群体提出建议。通过分析显示非洲的斑马,澳洲的羊驼,我国西北的岩羊比较适合大连的气候及混养的这种模式,种群数量逐年递增,繁殖状况良好,死亡率也比较低,尤其是岩羊,由于其善攀援跳跃,活动范围广,种群发展最好。长颈鹿,黑斑羚和跳羚适应能力较差,尤其是黑斑羚和跳羚,性情机警,敏感,应激反应强烈,引进后种群数量逐年递减,不适应此混养模式。作为东北地区物种的马鹿和梅花鹿,其种群情况也堪忧。鉴于这种情况,应从饲料营养和引种两方面加以改进以达到增加其种群数量的目的。     

圈养条件下小尾寒羊成年母羊春秋季昼夜行为节律分析

2011年3—5月及8—10月,以山东省临沂市兰山区众合牧业有限公司小尾寒羊种羊场圈养的成年母羊为研究对象,利用24h监控系统,采用目标动物取样法和全事件记录方法,研究了小尾寒羊成年母羊昼夜行为节律。结果显示,小尾寒羊昼夜反刍、卧息、取食、运动、站立与观望、修饰行为及其他行为持续时间依次减少。对小尾寒羊0：00—24：00各时段行为变量分析表明,其取食与反刍行为有2个高峰期,卧息全天都表现比较高的行为持续时间,而高峰期则发生在12：00—14：00。小尾寒羊观望行为有2个高峰期,分别在8：00—10：00及18：00—20：00。按照春秋季节规律特点,以06：00—18：00为白昼,其余时间为夜间。以Mann-Whitney U检验进一步分析圈养条件下小尾寒羊春秋季行为节律特点,结果表明,春秋季节,昼间小尾寒羊母羊在取食与其他行为上存在极显著差异,而夜间在取食、观望与其他行为上存在显著或极显著差异。在春季和秋季昼间与夜间行为对比分析表明,春季除卧息与运动行为外,另外5种行为均存在显著或极显著差异。秋季除卧息、修饰和其他行为外,其余4种行为均存在显著或极显著差异。对春秋季24h行为节律分析发现其取食行为存在极显著差异,运动行为与其他行为存在显著差异。对春秋季小尾寒羊成年母羊昼夜行为节律的研究可为认识圈养条件下小尾寒羊习性、改善小尾寒羊饲养管理与福利条件提供基础资料。     

Systemic toxoplasmosis in captive flying-foxes

Systemic toxoplasmosis caused by Toxoplasma gondii was diagnosed in two juvenile, captive flying-foxes (Pteropus conspicillatus and P. scapulatus), which died following respiratory distress. One animal displayed clinical signs suggestive of neurological disease. This is the first report of this disease in megachiropteran bats and adds to the list of differential diagnoses for both systemic and neurological disease in these animals. The role of captivity in the exposure and development of the disease is discussed.     

Synthetic and green vegetable isothiocyanates target red blood leukemia cancers

Isothiocyanates (ITCs), the breakdown products of glucosinolates found primarily in species of Brassicaceae (Cruciferae), are potential anti-cancer compounds. This review compiles data on how through different modes of action ITCs and their synthetic counterparts target leukemia.     

绵羊全混日粮体外培养VFA的动态变化

为了探讨肉羊全混日粮配方最优配比,试验参照肉羊育肥饲料营养标准,以苜蓿、番茄皮渣等粗饲料及肉羊精料补充料为原料,按照不同配比组合设计八种全混日粮配方,利用体外发酵研究方法,对八种全混日粮羊瘤胃内总挥发性脂肪酸(TVFA)、乙酸、丙酸、丁酸的浓度及日粮组合效应进行了研究。结果表明:日粮中添加番茄皮渣可显著提高乙酸、丙酸、丁酸和TVFA的浓度,且乙酸/丙酸趋于平缓,有利于肉羊对营养的吸收;添加番茄皮渣的组合B2、D1的VFA浓度最大,未添加番茄皮渣的组合A1、C1的VFA浓度最大,为最佳配比。研究表明:小麦秸、玉米秸都不利于肉羊营养的吸收,相较于小麦秸,玉米秸易被肉羊消化吸收;番茄皮渣可提高肉羊对日粮的吸收利用率,利于肉羊育肥。