中国水产动物病毒学研究概述

为建立基于Nrf2、HO-1启动子活性的抗病毒药物筛选方法,实验以胖头鱥上皮细胞系 (FHM)为材料,构建Nrf2、HO-1启动子重组质粒,利用双荧光素酶报告系统检测不同浓度 (0、3.1、6.3、12.5、25.0、50.0 μg/mL)的白藜芦醇、水飞蓟宾、穿心莲内酯及姜黄素对启动子活性的影响,并利用鲤春病毒血症病毒 (spring viremia of carp virus,SVCV)和蛙虹彩病毒 (rana grylio iridovirus,RGV)验证阳性药物的抗病毒效果。结果显示,Nrf2、HO-1启动子序列中存在FOX家族、IRF家族等多种转录因子的结合位点,并分别存在1个和3个与甲基化相关的CpG岛。双荧光素酶报告实验显示,水飞蓟宾、穿心莲内酯及姜黄素可激活Nrf2、HO-1启动子。药物浓度梯度实验显示,6.3 μg/mL的姜黄素和穿心莲内酯可显著上调Nrf2和HO-1的启动子活性。病毒感染后的细胞病变效应、病毒的复制及病毒滴度结果均表明姜黄素和穿心莲内酯可抑制SVCV和RGV的感染。综上,本实验建立的pGL3-Nrf2和pGL3-HO-1启动子报告质粒,可用于抗水生病毒药物的筛选,也为Nrf2、HO-1转录调控机制的研究提供了工具。

     

Synthesis and herbicidal activity of optically active cinmethylin,its enantiomer,and C3-substituted cinmethylin analogs

We investigated the synthesis and herbicidal activity of optically active cinmethylin, its enantiomer, and C3-substituted cinmethylin analogs. Optically active cinmethylin could be obtained in seven steps with the Sharpless asymmetric dihydroxylation of α-terpinene. The synthesized cinmethylin and its enantiomer showed similar herbicidal activity, which was independent of the stereochemistry. Next, we synthesized cinmethylin analogs with various substituents at the C3 position. We found that analogs with methylene, oxime, ketone, or methyl groups at the C3 position show excellent herbicidal activity.     

草鱼SGLT1/2基因克隆及葡萄糖处理对其mRNA表达的影响

作为重要的转运载体,SGLTs(钠依赖性葡萄糖协同转运蛋白,sodium-glucose co-transporters)在物质的吸收过程中发挥着关键的作用.SGLT1和SGLT2作为SGLTs家族的重要成员,参与调节体内的葡萄糖吸收,从而维持血糖的稳态.为研究SGLT1和SGLT2在草鱼葡萄糖吸收过程中的作用,本实验...     

红鳍东方鲀3个白介素基因的序列特征及表达分析

本试验分析体质量(190.34±2.13)g的红鳍东方鲀白介素基因IL-1b、IL-8和IL-10的序列特征,检测其在红鳍东方鲀脑、鳃、心脏、肌肉、肝脏和脾脏中的表达,以及每尾红鳍东方鲀注射密度1×107 cfu/mL的哈维氏弧菌菌液0.1 mL后0、12、24、48 h在肝脏和脾脏中的表达.试验结果表明,IL-1b、...     

MCT1抑制剂p-CMB对乙酰胆碱诱导的大鼠胰液分泌的影响

采用在体试验方法研究单羧酸转运蛋白第1亚型（monocarboxylate transporter 1,MCT1）抑制剂（p-chloromercuribenzene sulfonate,p-CMB）对乙酰胆碱（acetylcholine,Ach）诱导的大鼠胰液分泌的影响。Spra-gue-Dwley（SD）雄性大鼠,体重180g-210g,分6组,每组5只,试验前禁食24h,自由饮水。动物麻醉后经外科手术后,每隔10min收集一次胰液,采用Lowry法测定胰液蛋白量,Bernfeld法测定胰酶。结果对照组（-p-CMB）和实验组（＋p-CMB）,在注射1、5、10μg／kg的Ach后对胰液分泌量、胰蛋白分泌量以及胰淀粉酶分泌量都呈现增加作用,注射后1h内达到峰值,之后逐渐降低。然而,试验组的胰液分泌各项指标比对照组的显著减少（P〈0．01）。表明MCT1抑制剂p-CMB减弱了Ach增加大鼠胰液分泌的作用。     

慢病毒载体构建策略及生物安全性研究进展

慢病毒可以感染分裂细胞和非分裂细胞,是较有前途的病毒载体,来源于HIV-1型载体,能阻止形成有复制能力的HIV-1病毒,构建一个更为安全的模式是慢病毒载体构建策略的焦点。该文介绍了慢病毒载体应用过程中的不同载体系统及构建策略,对载体的生物安全性进行了分析,展望了慢病毒在基因治疗、RNA干扰及转基因领域的应用前景。     

灰色理论在肇庆地区干旱预测中的应用

采用1979~2008年肇庆地区近30年的降水资料,根据《干旱评估标准》,确定肇庆干旱的灾变数据序列,建立GM（1,1）模型,采用最小二乘法求解参数a、b,得到肇庆地区GM（1,1）数列预报模型。经后验差方法检验,预测精度为＂好＂等级,故可用该模型对肇庆地区未来20年可能发生干旱的年份进行预测。预测结果显示,肇庆地区将在2009~2010、2013~2014、2018~2019、2022~2023、2028~2029年期间发生干旱。     

A1胁迫下油菜生物量A1积累及保护酶系统的响应

采用水培法,研究了油菜湘杂油二号(耐A1型)和浙双758(A1敏感型)的生物量、根尖A1含量及叶片保护酶活性、叶片MDA和Pro含量对A1胁迫的响应.结果表明,胁迫7 d时,湘杂油二号根系、地上部和总生物量下降率(13%～36%、13%～36%、5%～17%)均小于浙双758(30%～53%、12%～20%、16%～28%).胁迫14d生物量下降比胁迫7 d时明显.根冠比也随A13+度增加和时间延长而下降;同时,株高变化趋势与生物量变化趋势基本一致.胁迫7d下,湘杂油二号根尖A1含量在3.94～5.88 μg·g-1之间,浙双758在4.96～7.54 μg·g-1之间,胁迫14 d时根尖A1积累进一步增加.A13+对叶片SOD、CAT和POD具有激活效应,SOD上升幅度较为明显,胁迫7 d和14 d时,200 μmol·L-1A13+浓度下湘杂油二号分别增加2.50倍和2.03倍.浙双758分别增加2.02倍和1.83倍,A13+对CAT和POD的诱导效应小于SOD;从时间差异看,SOD、CAT的绝对活性和增幅在胁迫14 d时小于胁迫7 d,POD相反.叶片MDA和脯氨酸含量均随A13+度增加和时间延长而升高,MDA含量在湘杂油二号中低于浙双758,而脯氨酸含量是湘杂油二号高于浙双758.研究认为,湘杂油二号根尖排斥A1的能力较强,且叶片能够维持较高的保护酶活性和较高的脯氨酸含量,因而其耐A1性强于浙双758.     

串联的人胸腺素α1基因在番茄中的高效表达

 【目的】提高免疫活性多肽人胸腺素α1（Tα1）在番茄中的表达量。【方法】根据植物偏爱密码子对Tα1基因进行优化,并将其顺式串联成四联体,同时在单体基因间插入肠激酶剪切位点基因序列,以便表达的融合蛋白可以被肠激酶切割成单体。利用农杆菌介导法将单体Tα1基因和四联体Tα1基因分别转化进入番茄。【结果】两个基因转化番茄后分别得到卡那霉素抗性再生植株19株和10株,PCR和Southern杂交检测证明,部分番茄基因组中整合了外源基因。经过Western和ELISA分析,串联的Tα1基因已经在番茄果实中表达,表达量最高相当于20.2 μg Tα1?g-1果实鲜重,高于单体基因的表达量。【结论】基因串联的方式提高了Tα1基因在番茄中的表达量。     

Polysaccharide Nucleic Acid of Bacillus Calmette Guerin Modulates Th1/Th2 Cytokine Gene Expression in Lipopolysaccharide-Induced Mastitis in Rats

The aim of this study was to evaluate, in rats, the changes in the T helper type 1 (Th 1)/Th2 radio in mammary glands after an intramammary infusion of lipopolysaccharide (LPS) and to characterize the moderating effects of the polysaecharide nucleic acid of Bacillus Calraette Guerin (BCG-PSN) on the mammary gland. In the control group, the levels of IL-2 and INF-γ, mRNA expression increased, whereas IL-4 mRNA expression decreased after LPS challenge. As a consequence, the INF-γ/IL-4 mRNA ratio was significantly higher at 3, 6, and 9 h post-infusion (PI) compared to the control value (O h; P<0.01).BCG-PSN increased mRNA expression of both INF-γ' and IL-4 before infusion of LPS. LPS challenge significantly the reduced Th1/Th2 eytokine ratio due to Th1 cytokine IFN-γ suppression and Th2 cytokine IL-4 upregulation compared with the control group. A significant reduction ofN-acety1-β-D-glucosaminidase (NAGase) was observed at 24 h PI in the BCG-PSN treatment group compared to the control group (P<0.05). Thus, it was demonstrated that level of BCG-PSN might change the Th1/Th2 ratio mainly by enhancing the Th2 immune response. This is the first report of a Th1/Th2 change induced by coliform mastitis and characterization of the effect of BCG-PSN on mammary gland inflammation. This study makes a better understanding of the mechanisms of coliform mastitis and provides a putative novel strategy for the prevention and/or treatment of mastitis.