坦布苏病毒荧光定量RT-PCR方法的建立

【目的】利用SYBR GreenⅠ荧光定量技术建立一种相对定量检测坦布苏病毒的方法。【方法】针对坦布苏病毒NS5、E基因分别设计了1对特异性引物,同时设计1对扩增内参基因β-actin引物,将PCR扩增的片段分别连接到pMD18-T载体上构建重组质粒,经筛选、鉴定纯化后,倍比稀释作为质控样品,用于实时荧光定量PCR中NS5、E基因及内参基因β-actin标准曲线的构建,并进行反应的灵敏性、特异性和重复性试验。【结果】结果显示标准曲线线性关系R2值均在0.99 以上, 检测极限约为1.0E+01拷贝数质粒DNA;特异性结果表明只能检测到坦布苏病毒的扩增曲线;批内和批间重复性试验的变异系数均小于0.5%;用已建立的方法对临床样品进行3次重复检测,病毒RNA的检出率为100%。【结论】本研究初步建立了基于坦布苏病毒NS5、E基因的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR的方法,为养鸭场诊断和监测坦布苏病毒提供了一种新的特异、灵敏的检测方法。     

美洲黑杨新品种全红杨叶片色素含量与叶色的对比研究

为研究全红杨叶片内在色素与外在色相的特性及其关系,探讨全红杨的呈色机制,比较分析了生长季不同时期全红杨、中红杨和2025叶片中色素含量和叶色参数的差异。结果表明,全红杨叶片含有较多的光合色素(叶绿素a、b和类胡萝卜素)和非光合色素(花色素苷),尤其是花色素苷含量显著高于中红杨和2025,三者叶色差异明显。全红杨色相a*值和色光值始终为正值,色相b*值为较小的正值,叶色始终以红色为主;中红杨色相a*值和色光值由正值变为负值,色相b*值为正值并逐渐变大,叶片红色转淡,出现返绿现象;2025杨色相a*和色光值为较低的负值,色相b*为较高的正值,叶片始终呈现黄绿色或绿色。此结果与叶片色素比例的变化对叶色的影响结果相一致。     

液控式垄向区田筑垱机的设计及仿真

为了实现垄向区田筑的高质量和高效率作业,设计一种液压控制式垄向区田筑机。介绍其工作原理,应用Pro/E和ADAMS软件进行筑机的设计、建模和运动学仿真分析。结果表明,此种设计方法缩短了筑机的设计周期,仿真分析结果验证了其工作原理的可行性,所设计的液控式垄向区田筑机能够实现最佳距的方便、快速调节,满足设计要求,为实现垄向区田技术提供了一种新机具。     

不同密度巨桉纸浆林的生长效果初步研究

对五年生巨桉林在不同密度和不同立地条件下的生长情况进行了研究。结果表明:巨桉林分生长最好的是洪雅试验区密度为1665株/hm2的林分;在不同的密度试验中,密度越大,林分蓄积量越高;在试验密度范围内,密度越大,树高和胸径越小;林分生长与林地土壤中全N、全K以及有机质等养分的含量显著相关。     

巨桉叶片营养DRIS诊断研究

对巨桉叶片营养诊断的采样时间、诊断指标进行研究,结果表明:巨桉适宜的叶片诊断采样时间为24月龄,采用P/N、N/K、P/K作为诊断指标,得出N∶P∶K的适宜值为1∶0 064～0 067∶0 363～0 366。需肥顺序为:第三年为P>K>N,第四年为K>N=P。     

低聚糖对肉鸡肠道内主要微生物菌群数量的影响

选择 1日龄健康AA肉鸡 6 0 0羽 ,随机分为 3组 ,每组设 4个重复 ,分别施以 3种不同日粮 :基础日粮添加 0 .1%异麦芽低聚糖 (低聚糖组 ) ;基础日粮添加 3.3mg/kg硫酸粘杆菌素 16 .5mg/kg杆菌肽锌 (抗生素组 )和基础日粮 (空白对照 )组 ,各组基础日粮相同。分别于肉鸡 2 1日龄和 42日龄时从各组中选 2只试验鸡 ,解剖 ,取其空肠和盲肠新鲜内容物 ,用以测定试验鸡肠道中主要微生物菌群 (大肠杆菌、沙门氏菌和乳酸杆菌 )的数量。结果表明 :添加低聚糖组试鸡空肠和盲肠内大肠杆菌数量显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,乳酸杆菌数量显著高于对照组 (P<0 .0 5 ) ;在添加低聚糖组肉鸡肠道内仅检测到很少或几乎没有沙门氏菌 ;添加抗生素组试鸡中空肠和盲肠内大肠杆菌、沙门氏菌和乳酸杆菌浓度均显著低于对照组 (P <0 .0 5 )     

IBA处理对杂交榛根蘖育苗生根指标及相关氧化酶活性的影响

以"龙榛1号"当年萌生条为试材,研究了不同IBA浓度处理(500、750、1 000、1 250mg·L^-1)对平欧杂交榛根蘖育苗生根的影响,分析了根蘖育苗生根过程中过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性的变化,并对外源激素处理与相关氧化酶活性与生根的关系进行了相关性分析,以期探讨其生根机理。结果表明:IBA浓度处理能显著地提高生根率,以1 000mg·L^-1的生根效果最佳,生根率和不定根质量均显著高于其它处理。生根过程中,POD和PPO活性呈先上升后下降趋势,POD活性在育苗后20d出现峰值;PPO活性在40d时达到峰值。生根率与POD、PPO活性呈极显著正相关。说明适宜浓度IBA能增加生根过程POD、PPO活性,从而提高生根率。     

“龙榛1号”杂交榛根蘖育苗生根过程中营养物质的变化

以“龙榛1号”杂交榛根蘖为试材,利用(500、750、1 000、1 250mg·L^-1)IBA、ABT和GGR处理根蘖基部,研究了激素及浓度处理对根蘖育苗生根的影响,以期探讨生根过程中营养物质含量的动态变化。结果表明:不同激素处理中以1 000mg·L^-1 IBA处理的生根效果最好,生根率平均87.92%,一级侧根数量、长度和粗度显著地高于其它处理和对照。在生根过程中,IBA处理的根蘖基部可溶性糖和可溶性蛋白质含量呈“下降-上升-下降”的趋势,在不定根形成期达到峰值;而全氮含量变化为先上升后下降,含量整体低于对照;C/N比值的变化呈先下降后上升趋势。IBA处理枝条可促进可溶性糖的积累,降低全氮含量,提高C/N比值,有利于诱导根原基和不定根的形成。     

淡紫拟青霉E7菌株固体放大发酵产孢培养基和工艺条件研究

为探讨淡紫拟青霉E7菌株固体放大发酵因子间的关系以获得大量孢子用于田间试验,通过正交试验设计优化固体发酵培养基成分和培养条件组合,并测定外加碳源、氮源、无机盐和装料方式对产孢量的影响。结果表明：以玉米粉+甘蔗渣+麸皮+壳聚糖组成的正交2号配方为最佳复合培养基质,分生孢子产量达7.13×109个/g,以发酵液pH+液相发酵终点+温度+初始含水量组成的正交4号配方为优适培养条件,分生孢子产量达8.97×109个/g;该菌株在优化后的培养基配方中添加0.4％蔗糖、0.2％蛋白胨、0.002％硫酸锰,以双层纱布袋装料按优化后的培养条件放大培养,产孢量最高可达到8.22×1010个/g。优化后的E7菌株发酵产孢培养基基质用量少,发酵成本低,适合于固体放大发酵生产淡紫拟青霉孢子。     

高丹草种子萌发和幼苗生长对模拟盐碱互作胁迫的响应

为限制盐碱地高丹草种子萌发和幼苗生长的主导影响因素,将2种中性盐(NaCl、Na2SO4)和2种碱性盐(NaHCO3、Na2CO3)按照不同比例混合,模拟出16种盐碱互作条件,研究盐碱互作胁迫对高丹草种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,高丹草种子萌发及幼苗生长参数与总盐浓度、pH以及CO2-3和HCO-3浓度的影响较大,而CO2-3和HCO-3浓度又是影响pH的主要因素,总盐浓度和pH可作为影响高丹草种子萌发及幼苗生长的主导因素。但是,反映种子萌发参数的发芽率(Gr)、发芽势(Gp)、发芽指数(Gi)等指标以及反映幼苗生长参数的芽长(GL)、根长(RL)和侧根数(LRN)等指标对盐浓度和pH胁迫的敏感性不同,在相同等盐浓度下,随着pH的增加,GL、RL和LRN降低幅度较Gr、Gp、Gi等参数的降低幅度更为明显,盐害系数之间也存在明显的差异,说明盐浓度对高丹草种子萌发的影响较大,而高pH胁迫则主要影响其幼苗生长。因此,盐碱地高丹草的种植过程中不仅要考虑土壤含盐量的因素,而且要考虑pH的影响。