不同栽培基质和粪肥对下山春兰生长的影响

以下山春兰为试材,设置12种不同基质进行栽培试验,并用3种粪肥对生长较弱的植株进行复壮试验.结果表明:木炭∶树皮(1∶1)、仙土∶泥炭(1∶1)、泥炭∶有机肥∶腐殖土(1∶1∶1)、塘基兰石:仙土:树皮(1∶1∶1)的基质组合是适宜下山春兰的栽培基质;在3种粪肥中,羊粪对弱势植株的复壮效果最好.     

LED不同光质对墨兰×大花蕙兰 F1代组培苗生长及生理指标的影响

以墨兰‘绿墨素’×大花蕙兰‘世界和平’F1代组培苗为试材，采用LED光源不同光质配比组合，以普通荧光光源为对照，研究LED光源对组培苗生长及生理指标的影响。结果表明：(1)单色红光(R)处理下株高、叶长、干重达到最高值，与对照组CK相比差异显著，红蓝复合光(2RB)有利于促进生根；(2)2RB处理下总叶绿素、叶绿素a、类胡萝卜素含量均最高，且与其他光源处理下差异显著，红蓝白复合光(RBW)照射下，叶绿素b的含量高于其他处理，单色蓝光(B)处理下，叶绿素a/b比值最高；(3)红蓝复合光(2RB)有利于组培苗可溶性糖合成；LED白光光源(W)处理下游离氨基酸含量最高，差异显著(p＜0.05)。说明LED不同光质对组培苗生长影响明显，综合比较各项指标，LED红蓝复合光(2RB)可作为墨兰‘绿墨素’×大花蕙兰‘世界和平’ F1代组培苗生长的理想光源。     

墨兰与大花蕙兰种间杂种原球茎的诱导及增殖研究

 利用墨兰与大花蕙兰进行种间杂交, 成功获得了5 个组合的杂种原球茎和植株。墨兰×大花蕙兰及大花蕙兰×墨兰, 均以原球茎方式萌发。以墨兰×大花蕙兰的杂种原球茎为材料, 通过L₉ (3⁴ ) 正交设计研究了NH₄NO₃ 、KH₂ PO₄ 、6-BA 和NAA 等因素对杂种原球茎增殖的影响, 发现NAA 对原球茎的增殖影响不大, NH₄NO₃ 1650 mg·L^-1 (MS 正常浓度水平) , 提高KH₂PO₄ 浓度(170～850 mg·L^-1 ) 和6-BA 浓度(1～10 mg·L ^-1) 有利于原球茎的增殖。9 个培养基中以MS + NH₄NO₃ 1650 mg·L ^-1 + KH₂PO₄340 mg·L ^-1 + 6BA 10 mg·L ^-1效果最好。     

墨兰、春兰变种和品种间同工酶分析

 通过酯酶( EST) 、苹果酸酶(ME) 、磷酸葡萄糖异构酶;PGI ( NADP) 、磷酸葡萄糖变位酶PGM( NAD) 、超氧化物歧化酶( SOD) 5 种酶系统研究墨兰和春兰17 个变种及品种的同工酶多样性, 并探讨这些材料间的亲缘关系。5 种酶系统所得的11 个位点中7 个是多态性位点。EST、PGM( NAD) 和SOD具有多态性。上述5 种酶系统能够把供试品种和变种区分开, 并划分为墨兰和春兰类。     

几种花叶线艺兰叶片色斑色素组成和叶绿体超微结构研究

以墨兰Cym bidium sinense3个花叶线艺兰品种金嘴、阳明锦和大石门为材料,分析了叶片色斑区叶绿素和类胡萝卜素的质量分数,对其解剖结构和叶绿体超微结构进行了观察,并同叶片正常绿色区进行了比较.结果表明:线艺兰叶斑的形成与叶绿素和类胡萝卜素的质量分数有直接的关系,叶片绿色区金嘴、阳明锦和大石门叶绿素质量分数分别为1.680、1.279和1.584 mg.g-1,类胡萝卜素质量分数分别为0.185、0.159和0.195 mg.g-1,绿色区金嘴、阳明锦和大石门类胡萝卜素与叶绿素质量分数的比值分别为0.110、0.124和0.123;而在叶片黄色区,金嘴、阳明锦和大石门叶绿素质量分数分别为0.693、0.465和0.540 mg.g-1,类胡萝卜素的质量分数分别为0.145、0.136和0.164 mg.g-1,类胡萝卜素与叶绿素质量分数的比值分别为0.209、0.292和0.304.即黄色区类胡萝卜素相对质量分数较高.绿色区和黄色区的叶绿素a与b比值变化不大,但在3个品种中都以绿色区稍高.在叶片绿色部分的细胞中,可以明显看到较多的叶绿体,叶绿体中基粒较发达,类囊体膜垛叠较紧密,有较多较大的淀粉粒;而在叶片黄斑部分的细胞中,基本上看不到完整叶绿体,淀粉粒逐渐消失,基质中存在很多嗜锇滴.     

春兰基因组DNA提取方法的研究

本文以春兰(Cymbidiumgoeringii(Rchb.f.)Rchb.f.)为研究试材,对植物基因组DNA提取方法中的若干影响因子诸如药品、试剂配制方法、DNA取材部位、蛋白质去除次数、DNA析出时间、提取样品水浴时间等进行了比较分析,试图找出春兰基因组DNA提取的最佳方法。结果表明:采用进口的CTAB提取效果比国产的CTAB要好,特别适用于花药的提取,蛋白质去除效果很好;SDS提取缓冲液配制方法很重要,不同的SDS缓冲液配制方法,其提取效果差异较大。春兰花苞的DNA提取得率较叶片高,但是叶片DNA的纯度则相反,叶片较花苞高。在提取花苞基因组DNA过程中,增加氯仿/异戊醇抽提次数,对去除DNA中蛋白质、多糖及其它杂质有一定的作用,但是对DNA的损失也是很明显的。从实验效果来看,氯仿/异戊醇抽提次数以2次为宜。提取基因组DNA在异丙醇沉淀时,采取挑取絮状沉淀的方法,也可减少蛋白质、多糖等其它杂质的影响,从而提高DNA纯度。无论是叶片还是花苞材料,采用异丙醇沉淀5min,一般析出的以核酸基因组DNA为主,蛋白质为次,核酸析出量在80%以上。继续沉淀(15min)的产物中DNA含量明显较低,而且沉淀的纯度相对不高,因此异丙醇沉淀时间可以缩短到10min之内以提高DNA的纯度。使用CTAB法提取DNA时,水浴时间至少需要30min,过短的水浴时间会造成DNA得率的下降,同时过长的水浴时间,如超过1h,则可能会引起DNA的降解,或者最后产物中增加其他杂质,因此,适宜的水浴时间当为40￣60min。     

有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’的快速繁殖

以‘黄荷兰’试管苗为试材,采用组织培养快速繁殖方法,研究了影响有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’根状茎诱导、增殖、分化、生根壮苗和试管苗移栽的因素,以期建立‘黄荷兰’种苗工厂化生产技术体系。结果表明:横切茎尖的起始脱分化时间早于纵切,诱导率高于纵切。切割长度、外源激素、光照强度和有机附加物对根状茎的增殖影响显著,将根状茎切割成长0.50 cm接种到MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+土豆80.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.30 g·L^-1培养基中培养40 d,根状茎增殖系数为3.18。外源激素对根状茎的分化影响显著,将根状茎掰成长1.00 cm接入MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.02 g·L^-1培养基中培养40 d,芽分化率和苗分化率分别为60.00%和57.50%。将4 cm高的苗转入1/2MS+6-BA 0.10 mg·L^-1+NAA 0.50 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.50 g·L^-1中培养50 d,平均株高和根数分别为7.32 cm和3.56条。4月和10月用水草移栽,试管苗成活率分别为98.67%和99.67%。上述研究结果说明,利用组织培养快速繁殖技术工厂化生产‘黄荷兰’种苗是可行的。     

建兰炭疽病拮抗放线菌的筛选及防治效果

为筛选获得对建兰炭疽病菌胶孢炭疽菌具有良好抑菌效果的放线菌,以野生山地兰花表层土壤为分离样本,从土壤样品中分离获得25株放线菌,初筛出6株对建兰炭疽病菌胶孢炭疽菌具有明显抑制作用的菌株,其中菌株SVFJ-07的抑菌效果最好,抑菌率达83.64%。经形态特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析,确认菌株SVFJ-07为酒红链霉菌。该菌对多种真菌具有良好的抑菌效果。对建兰炭疽病的室内防效为70.06%,田间防效66.27%～68.54%。可见,酒红链霉菌SVFJ-07对建兰炭疽病菌胶孢炭疽菌具有较好的拮抗作用,生防应用前景良好。     

墨兰舌瓣总RNA提取方法比较研究

为获得墨兰舌瓣总RNA最佳提取方法,以墨兰"南菊"舌瓣为材料,利用CTAB法、华舜植物叶总RNA提取试剂盒、Trizol法、天根RNAsimple总RNA提取试剂盒、Bioteke通用植物总RNA提取试剂盒、Bioteke通用植物总RNA提取试剂盒DNaseI过柱消化法、宝生物RNAiso-mate for Plant Tissue及宝生物RNAiso-mate for Plant Tissue改良法提取舌瓣总RNA。通过RNA产率、纯度、电泳图谱和RT-PCR等分析,确立适用于墨兰舌瓣RNA分离的方法。结果表明:宝生物RNAiso-mate for Plant Tissue改良法提取的RNA除了28S,18S,5SrRNA清晰条带外,RNA的得率和纯度优于其他供试方法。RT-PCR结果进一步证实宝生物RNAiso-mate for Plant Tissue改良法提取的总RNA可用于进一步的分子生物学试验。     

高CO2浓度对春兰叶片叶绿素·叶绿素蛋白质复合物含量的影响

[目的]为了研究春兰适应环境变化的方法。[方法]对自然状态（正常组,CO2浓度（370±50）μl/L）和高CO2浓度（试验组,CO2浓度（700±50）μl/L）春兰叶片的叶绿素及叶绿素蛋白质复合物含量进行研究。[结果]与正常组相比,试验组春兰叶片的叶绿素含量增高,叶绿素a/b降低;叶绿素蛋白质复合物的含量增加,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得到6条叶绿素蛋白质复合物带和1条游离色素带,表明叶绿素蛋白质复合物种类未发生变化。从电泳结果可以看出,叶绿素蛋白质复合物聚合态如LHCⅡ3的量增多,单体态LHCⅡ1和LHCⅡ2的量减少。[结论]叶绿素、叶绿素蛋白质复合物含量的变化是春兰对高CO2浓度的一种适应效应,有利于提高其在光合作用中光能的吸收、传递和转换的效率,并且支持高效的光合碳素同化作用。