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1材料与方法
1.1材料
抗原为Eae-Stx1/2B纯化蛋白;EHEC O157标准菌株(EDL933).抗体为单抗2H9纯化腹水,蛋白浓度为4.16毫克/毫升.
1.2方法
EHEC O157检测方法的建立.抗原包被浓度和抗体工作浓度的初步选择,用PBS调整Eae-Stx1/2B纯化蛋白浓度为8、4、3、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06微克/毫升,纵向包被1小时,封闭,洗涤,单抗从1:1000开始进行倍比稀释,横向加入各孔内,37℃反应1小时,加酶标二抗,洗涤,加底物液显色后终止,测定OD值.以OD值接近1.0,且前后稀释度出现较大变化时,该孔的包被浓度初步确定为最佳包被浓度,该孔抗体的稀释倍数为单抗的初步工作浓度.抗原的最佳包被温度和包被时间的确定.取5块酶标板,用初步确定的Eae-Stx 1/2B纯化蛋白的最佳包被浓度包被酶标板,分别于37℃0.5小时、37℃1小时、37℃2小时、37℃3小时、37℃4小时温育和4℃过夜;以初步确定的单抗工作浓度进行间接ELISA检测,测定其OD值.OD值最大最稳定的为最佳包被温度和时间. 相似文献
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为了筛选获得对复合重金属具有耐受能力且能在本地豆科植物根系内定殖共生的抗性根瘤菌,本研究从贵州省内的锰矿区、铅锌矿区采集野生豆科牧草根瘤样品,经分离纯化、菌体形态观察、16S rRNA基因序列比对分析,获得71个根瘤菌保存菌株。系统发育和区系分析结果表明,分离菌株分属7属28种,其中根瘤菌属(Rhizobium)的分布频率高达54.93%,为优势属,木兰根瘤菌(R.indigoferae)的分布频率最高(15.49%),为优势种。选择来自不同尾矿区、不同种类的根瘤菌17株,采用重金属平板法测定各供试菌株对贵州尾矿土分布较多的Pb2+,Zn2+,Cr6+,Mn2+,Cd2+五种重金属的耐受性,结果发现17个菌株对3种或3种以上的重金属都具有不同程度的耐受能力,其中HMZT039-6,HSST042-6,HSST042-1,ZHQT052-1和HXTT050-1对5种重金属离子均有耐受能力,为筛选出的最优抗性根瘤菌株。本研究结果可为本地区土壤重金属污染的修复治理提供共生微生物资源。 相似文献
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为做好出口石榴鲜果产地检疫和病原防治工作,以石榴果实干腐病病菌(Zythia versoniana)和木霉菌株(Trichoderma spp.)作为供试菌株,采用菌丝生长速率法和对峙培养法,测定8种常用化学农药和18株木霉菌株对石榴果实干腐病病菌的抑菌率。结果表明,450 g/L咪鲜胺、250 g/L丙环唑、30%苯醚甲环唑、10%氟硅唑、20%三唑酮、40%百菌清等6种化学农药对石榴果实干腐病病菌的抑制效果最好,抑菌率为100.0%,是理想的备用化学农药。在各供试木霉菌株中,木霉菌株PZ1对石榴果实干腐病病菌的抑菌率为63.5%,有望作为防治石榴果实干腐病的生防菌种资源。 相似文献
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茶薪菇学名杨柳菇,又叫茶树菇、茶菇,单生、双生或丛生,盖肥柄脆,鲜食清脆爽口,味道鲜美。烤制干菇更是风味独特,清香浓郁,味美香甜,适宜周年生产供应市场,是近年推出的高产、抗杂、 相似文献
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