红花种子带菌检测及药剂消毒处理

采用平皿法检测了红花种子的带菌情况,并研究了5种杀菌剂对红花种子的消毒效果。结果表明,红花种子携带的主要真菌类群为链格孢属(Alternaria spp.)、黄曲霉属(Aspergillus spp.)、镰孢霉属(Fusarium spp.)、黑根霉属(Rhizopus spp.)和青霉菌属(Penicillium spp.)。福美双与多菌灵混剂、噁霉灵、甲基立枯磷、种衣剂1号、种衣剂2号分别对不同批次红花种子所带真菌均具有一定的消毒效果。     

小麦苗枯病菌的ITS分析及PCR检测

 小麦苗枯病菌(Clavibacter fangii,Cf)是引起小麦细菌性苗枯病的病原,本研究用16S~23S rDNA间的内源转录间隔区(internally transcribed spacer,ITS)序列通用引物L1(5'-AGTCGTAACAAGGTAGCCGT-3')和L2(5'-GTGCCAAGGCATCCACC-3')扩增Cf和其它相关细菌的基因组DNA;并对其PCR产物进行回收、克隆和测序,将所获序列和其它已报道的细菌ITS序列进行多重比较后设计出Cf的特异性引物I1(5'-TGCCAAGTCACACTGAGACGA-3')和I2(5'-CAATGATCTACCACCCTCCGA-3')。此引物可以从Cf中扩增出351bp的特异性片段,而其余参试的21个细菌PCR反应结果均为阴性。该方法可以应用于小麦苗枯病菌的快速、可靠检测。此外,本研究对多种植物病原棒形杆菌的ITS序列进行比较研究,发现其具有一定的分类意义。     

利用RT-PCR检测库尔勒香梨苹果茎痘病毒的研究

 以库尔勒香梨新鲜、冷藏、冷冻叶片和皮层为材料,对提取双链RNA (dsRNA)的2种方法和提取总RNA的3种方法进行了分析比较,并对总RNA的提取方法进行了改进,获得了纯度较高、完整性较好的dsRNA和总RNA,在此基础上进行了反转录(RT)和PCR扩增。在国内首次完成了对苹果茎痘病毒(ASPV)的RT-PCR检测,建立了ASPV有效RT-PCR反应体系。用此体系扩增到ASPV一个长约316 bp的片段。实验表明以dsRNA和总RNA为模板均能成功进行RT-PCR检测,且dsRNA优于总RNA。     

不同引物对植原体的检测灵敏度比较研究

用常规PCR和巢式PCR对目前常用的各种植原体引物(fPl/rP7、fU5/rP7、fU5／rU3、fAY/rEY和fFD9/rFD9)的检测灵敏度进行了比较研究。研究发现，它们的检测灵敏度并不相同。最灵敏的引物(fAY/rEY)要比最不灵敏的引物(fFD9/rFD9)的灵敏度至少高出数千倍。因此，按照不同的检测目的选择所用的检测引物是明智的，特别是当待测样品中的植原体浓度极低时，比如葡萄组织样品中植原体的检测。据此提出了用于不同检测目的时的最佳引物。     

内装纸箱集装箱中溴甲烷气体分布及残留检测研究

采用 4 0英尺集装箱熏蒸处理纸箱 ,实验对箱中溴甲烷气体分布及散气后溴甲烷残留进行了检测研究。结果表明 ,温度高低、集装箱中纸箱堆放和电扇鼓风等情况对溴甲烷分布与扩散影响明显。集装箱装满纸箱情况下 ,当温度≥ 2 1℃ ,投药 2h后上、下检测点平均溴甲烷浓度达到最低浓度要求 ;当温度 <2 1℃时 ,投药 2 4h后上检测点平均溴甲烷浓度仍达不到最低浓度要求。当集装箱中间留有通道或使用电扇鼓风情况下 ,投药 2h后各检测点溴甲烷浓度分布达到最低浓度要求。集装箱装满纸箱情况下 ,溴甲烷向大气扩散较慢 ,即使电扇鼓风散气2h ,2 4h后溴甲烷残留量仍达不到安全指标要求。集装箱中间留有通道情况下 ,箱中溴甲烷残留量下降很快 ,并可达到安全指标要求。     

加强植物病毒检测防止有害生物入侵

1　植物病毒检测重要性及迫切性植物病毒检疫是种苗检疫的重点。至今报道的 90 0多种植物病毒中 ,至少三分之一可以由 1种或多种植物繁殖材料传带而作远距离传播 ;反之 ,多数植物种苗可以传带一种或多种病毒。由于植物病毒可以随着引进植物种苗进行远距离的传播。一旦传入新的地区 ,很难根除。并且可以随植物繁殖扩大传给后代而长期存活、持续地对植物产生危害 ,其重要性已经被形容为生物的“定时炸弹”。至今对于植物病毒还没有有效的检疫处理措施。目前的植物种苗引进 90 %以上是属于商业性的。如果在口岸检疫过程中发现危险性的植物病毒 …     

食用菌菌种的质量检测方法(续前)

11　抗霉性测定　以木耳为例 :在平板培养基的一边分别接入不同的木耳菌株 ,每一菌株 3个重复 ,在 2 6～ 2 8℃下培养。待木耳菌丝长到平板一半左右时 ,在平板的另一边接上木霉菌丝 ,继续培养。之后注意观察木霉菌丝与木耳菌丝的交界处 ,出现拮抗线的表示木耳抗霉能力强 ,木霉菌丝无法长过去 ,为抗霉能力强的菌株 ;如果木霉菌丝很快盖过木耳菌丝 ,说明这个木耳菌株的抗霉能力差或没有抗霉力。1 2　出菇试验　对引进或分离的同一品种的若干菌株进行出菇对比试验 ,必须在栽培条件基本一致的情况下进行。为使试验准确 ,每一菌株设 3～ 4个重复…     

菜豆萎蔫病菌的种子检验鉴定技术研究

本研究对我国一类检疫性有害生物菜豆萎蔫病菌Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｃｃｕｍｆａ－ｃｉｅｎｓｐｖ．ｆｌａｃｕｍｆａｃｉｅｎｓ（Ｃｆ）进行种子检测鉴定技术的研究，发现５２３，ＮＢＹ＋ＴＴＣ和ＮＢＹ＋刚果红三种培养基均可作为分离培养基；对带菌种子分离的灵敏度为１．８×１０２ｃｆｕ／ｍｌ，病叶柄和茎是分离的最佳部位，病菌可通过种子传给种苗引起种苗发病，发病时间为７～２０天，针刺接种是Ｃｆ最有效的接种方法，接种发病率为１００％。使用标准化的Ｂｉｏｌｏｇ鉴定系统鉴定病原，在种水平的鉴定准确率达９８．５％。     

快速检测大豆疫莓菌的酶联免疫吸附技术研究

利用已经制备的大豆疫霉菌的抗血清，对大豆疫霉菌的纯培养和大豆病组织进行检测。结果表明，间接法（Ｉ－ＥＬＩＳＡ）和夹心法（ＤＡＳ－ＥＬＳＩＡ）能较好地检测纯培养的大豆疫霉菌，但在检测病组织时，夹心ＥＩＳＡ的特异性较强，能够可靠地检测到大豆病组织内的病原菌。     

菜豆萎蔫病菌的血清检测鉴定技术研究

本研究对我国一类检疫性有害生物菜豆萎蔫病菌（Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｃｕｍｆａ－ｃｉｅｎｓｐｖ．ｆｌａｃｕｍｆａｃｉｅｎｓ，Ｃｆ）进行血清检测鉴定技术的研究。试验中制备了抗Ｃｆ的血清，应用抗００２０，０２３７，０２３８菌株的抗血清及其ＦＩＴＣ标记的抗体进行间接和直接免疫荧光染色试验（ＩＦ／ＩＦ）。通过对１９个Ｃｆ菌株和其它６个属１４个种的植物病原细菌２０个菌株的测定，结果发现约５０％的Ｃｆ菌株为强阳性反应，且与Ｃｆ种下致病变种也有强阳性交叉反应。由于单个血清检测易产生假阴性反应，故将三种血清１∶１∶１混合后进行ＩＦ试验，结果表明与所有的Ｃｆ菌株反应，且与Ｒｆａ和Ｃｍｔ有弱阳性反应。对含１０４～１０７ｃｆｕ／ｍｌ细菌及３０ｇ种子含１粒人工接种种子的种子抽提液均能检测到典型的阳性细胞，血清检测的灵敏度为４．５×１０４ｃｆｕ／ｍｌ，可用于种子的检测。本研究还进行了初步的免疫荧光菌落染色（ＩＦＣ）试验