两种牛蛙活性肽结构及体外抗肿瘤细胞增殖作用的研究

试验旨在研究新发现的两种牛蛙活性肽对人肺癌细胞NCI-H446、人乳腺癌细胞MCF-7及小鼠白血病细胞K562 3种肿瘤细胞体外增殖的影响,为新的多肽抗肿瘤药筛选提供依据。本试验利用圆二色谱(CD)法检测两种新牛蛙活性肽的二级结构,通过MTS细胞毒试验测定不同浓度的两种新牛蛙活性肽对人肺癌细胞NCI-H446、人乳腺癌细胞MCF-7及小鼠白血病细胞K562 3种瘤细胞体外增殖的影响。圆二色谱法结果显示,Temporin-Lb的二级空间结构为聚脯氨酸Ⅱ型螺旋(PPⅡ)结构,Catesbeianin-1a的二级空间结构为无规则卷曲。MTS细胞毒试验结果显示,给予Catesbeianin-1a的3种瘤细胞培养24 h后,瘤细胞形态无明显变化,正常增殖,而给予Temporin-Lb的3种瘤细胞培养24 h后,瘤细胞发生皱缩、细胞变圆、脱落甚至死亡,增殖受到抑制,其中对Temporin-Lb在4~40 μmol/L浓度范围内对小鼠白血病细胞K562的抑制效果最为明显。结果表明,新牛蛙活性肽Temporin-Lb具有一定的抑瘤作用,Catesbeianin-1a对瘤细胞的体外增殖没有明显影响。     

鸡传染性支气管炎H120鸡胚毒与细胞毒的免疫效力比较试验

试验以相同病毒量的鸡胚毒及细胞毒分别免疫试验鸡,结果表明,两者的免疫效力无明显差异。随着鸡免疫病毒量的适当增加,免疫效果趋好,每只鸡免疫103EID50病毒量时,攻毒保护率可达70%~90%;每只鸡免疫104~105EID50病毒量时,攻毒保护率可达90%。     

猪繁殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的研制

利用PRRSV河南分离株研制了细胞毒油乳剂灭活疫苗(简称灭活疫苗),健康猪首免后,第5 d可检到抗体,第35 d抗体达到高峰,第63 d抗体仍维持较高的水平.试验结果表明,灭活疫苗对健康猪均能产生较强的保护力,猪免疫后20~35 d出现抗体高峰,并可持续3个月以上.应用试验结果显示,灭活疫苗免疫保护率均达92%以上.     

钩枝藤提取物的生物活性

通过观察钩枝藤乙醇提取物治疗感染了伯氏疟原虫小鼠的感染率和存活率判断钩枝藤乙醇提取物的抗疟活性;采用MTT法测定钩枝藤乙醇提取物体外细胞毒活性;采用滤纸片琼脂扩散法测定钩枝藤乙醇提取物抗菌活性;采用Ellman比色法测试钩枝藤乙醇提取物抗乙酰胆碱酯酶活性。结果表明,该提取物能较好地抑制伯氏疟原虫的生长,改善小鼠的存活状况;对人白血病细胞K562、胃癌细胞SGC-7721、肝癌细胞BEL-7402均具有较好的抑制作用;对人体病原菌和农业病原菌表现出较强的抑菌活性;对乙酰胆碱酯酶表现出一定的抑制作用,但不如阳性对照他克林。     

鸡传染性法氏囊病细胞毒的浓缩粗提

应用聚乙二醇（ＰＥＧ６０００）沉淀法浓缩粗提鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞毒,经毒价和紫外光ＯＤ值测定,浓缩病毒的毒价较浓缩前平均提高１个滴度;浓缩液中病毒含量及纯度是浓缩前的６倍以上。浓缩病毒与ＩＢＤ阳性血清和ＩＢＤ高免卵黄抗体ＩｇＹ琼扩反应呈弱阳性。加氯仿离心去除细胞杂蛋白后用ＰＥＧ沉淀ＩＢＤＶ细胞毒的方法,简便可行。     

一种国外沉香中2-(2-苯乙基)色酮类化合物研究

为了了解一种国外沉香中的2-(2-苯乙基)色酮类化合物,采用多种色谱分离技术从该沉香的乙醇提取物中分离得到6个化合物,通过波谱学方法分别鉴定为：6-羟基-8-氯-2-[2-(4°-羟基苯基)乙基]色酮（1）,6-羟基-2-[2-(3°-甲氧基-4°-羟基苯基)乙基]色酮（2）,6-羟基-7-甲氧基-2-[2-(4°-羟基苯基)乙基]色酮（3）,沉香四醇（4）,5α,6β,7β,8α-四羟基-2-[2-(4°-甲氧基苯基)乙基]-5,6,7,8-四氢色酮（5）和6-羟基-2-[2-(3°-甲氧基-4°-羟基苯基)乙烯基]色酮（6）。化合物1为新的2-(2-苯乙基)色酮。对化合物2~6的细胞毒活性测试结果表明,化合物6对5株人体肿瘤细胞均表现出一定活性,其中对人慢性髓原白血病细胞K562和人肝癌细胞BEL-7402具有显著抑制活性,半数抑制浓度（IC₅₀）为2.87和 4.75 μg/mL,化合物2、3、5对5株人体肿瘤细胞表现出中等活性,IC₅₀范围为9.91~45.38 μg/mL。     

大豆分离蛋白载药性能研究

以大豆分离蛋白(SPI)为主要原料,采用真空冷冻干燥技术制备以SPI为载体的姜黄素纳米粒(SPI-Cur)。利用高分辨透射电子显微镜和激光粒度仪表征纳米粒的形态和粒径;通过高效液相色谱仪在430 nm处分析SPI-Cur的释放行为,测定SPI-Cur的载药率、包封率;并采用MTT法考察了Cur和SPI-Cur对人食管癌细胞株TE-1的体外抑制作用。结果表明:经SPI包被的Cur表面粗糙度增加、电位升高,制备的SPI-Cur粒径在186.7 nm左右,载药量和包封率分别为3.08%和33.90%,包被后的SPI-Cur出现明显的缓释行为,当Cur浓度在4.0μg·mL~(-1)以上时,食管癌细胞的生长受到明显抑制,细胞存活率与姜黄素存在时间依赖和剂量依赖关系。     

犬细小病毒细胞毒蜂胶佐剂灭活抗原对山羊的免疫效果研究

应用犬细小病毒(CPV)细胞毒,F81细胞系传代培养增殖病毒,以该细胞毒液经甲醛灭活后制备成蜂胶佐剂灭活抗原,用以免疫山羊,观察其免疫效果.结果显示,以5mL/只恒定剂量接种山羊,经4次连续免疫后CPV抗体水平整体较低,第28天测定HI效价在27(1∶3128),而以5mL/只递增剂量4次连续免疫山羊后,抗体水平整体较高,第28天测定,抗体HI效价在29(1∶512),较恒定剂量免疫组高2个滴度水平.结果表明,采用犬细小病毒细胞毒蜂胶佐剂灭活抗原高免山羊可获得高效价的特异性抗血清.