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为建立一种操作简单并且能获得大量猪血管内皮细胞的分离培养方法,本研究采集新生健康长白猪脐带,取其脐静脉血管,灌注0.1%的Ⅰ型胶原酶,于37℃水浴消化10 min后收集内皮细胞,培养于含20%胎牛血清的M199培养基中,长满单层后用胰酶消化传代培养。并对培养的细胞形态学、相关抗原和其他特征以及对病毒的易感性进行鉴定。结果表明,Ⅰ型胶原酶消化后可获得大量内皮细胞,细胞培养后的形态学观察显示细胞贴壁生长良好,呈典型的铺路石状排列;第Ⅷ因子相关抗原和细胞摄取乙酰化低密度脂蛋白均呈阳性,内皮细胞比率可高达100%。传3代后的生长曲线显示细胞传代后延迟期小于1 d,对数生长期约3 d,第5 d进入平台期,第7 d开始脱落死亡。病毒感染试验表明所获得的内皮细胞对猪瘟病毒高度易感,病毒生长与常用的PK-15没有区别。上述研究结果表明本研究建立的血管内皮细胞分离培养方法简便有效,为大量制备原代血管内皮细胞提供了可靠的方法。 相似文献
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为探究鸭胚睾丸支持细胞的分离培养方法,选取24日胚龄的麻鸭鸭胚40个,取出睾丸,采用胶原酶Ⅳ与胰蛋白酶二步消化分离睾丸细胞,差异贴壁与低渗处理的方法进行纯化,于37℃,体积分数5%二氧化碳条件下培养,最终得到纯度较高的支持细胞.经染色鉴定,发现罗丹明123染色显示支持细胞中富含线粒体;AKP检测发现80%的细胞呈AKP阴性;吖啶橙染色显示支持细胞细胞质中富含RNA;油红O染色显示睾丸支持细胞细胞质中含有大量脂肪滴,细胞核内可见双极小体.本试验结果说明采用胶原酶Ⅳ与胰蛋白酶结合消化,经差异贴壁与低渗出处理纯化,可得到较高纯度的支持细胞;结合罗丹明123染色法、AKP染色法、吖啶橙染色法与油红O染色法可有效鉴定支持细胞. 相似文献
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本文探讨了利用茎尖离体培养法进行草莓快速繁殖的方法。主要摸索了激素对试管苗的分化、生根的影响及移栽成活的技术要点。 相似文献
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天南星科植物组培快繁技术 总被引:2,自引:0,他引:2
天南星科观赏植物因其种类繁多、品种各异、美观耐看、极具观赏价值而成为近年来国内发展较快的花卉种类之一。这些热带、亚热带植物比较适应广东的气候条件,栽培设施要求和种植成本较低,投资风险较小,回报率高,经过近几年的迅速发展,广州及珠江三角洲地区已成为我国室内观赏植物的繁殖栽培中心和集散地。 相似文献
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<正> 培养动物性活饵料对扩大蛋白质饲料来源,发展养殖生产具有重要意义。1973年我所为解决鲟鱼苗种培育试验所必需的活饵料的问题,曾对重庆市长寿地区的水生寡毛类动物进行普查,得知苏氏尾鳃蚓(Branchiura sowerdyi)和霍甫水丝蚓(Limnodrilus hoffmeistteri)为其优势种,经大量采集 相似文献
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基于工业互联背景下传统产业升级和转型的需求,笔者分析了复合型人才培养的特点和困难,构建了1+1+1+X信息技术与专业教学融合培养模式,针对吉林工业职业技术学院的专业群特点,设置了模块化课程内容.实践表明:该模块化教改方案基本满足了围绕多业交融协同发展的业态需求,形成了专业群复合型发展的态势. 相似文献