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重组鸡β-防御素10蛋白的原核表达及其抗菌活性的测定 总被引:5,自引:1,他引:5
鸡抗菌肽属β-防御素类,在鸡的先天性免疫中发挥重要作用.本研究将克隆得到的鸡β-防御素-10基因(AvBD10).亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中构建了重组表达质粒pGEX-AvBD10.将重组质粒转化至BL21,于37℃用IPTG诱导培养不同时间,SDS-PAGE电泳与灰度扫描显示该重组蛋白表达量占菌体总蛋白的34.3%.表达的AvBD10融合蛋白以包涵体的形式存在,分子量约为31 ku.重组蛋白经纯化后,以对数生长中期的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽胞杆菌和猪霍乱沙门氏菌为检测菌,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定了重组鸡AvBD10蛋白的抗菌活性.结果显示.重组鸡AvBD10蛋白对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽胞杆菌有抗菌活性.此外,重组鸡AvBD10蛋白在70℃~100℃及在pH4~pH10条件下仍具有抗菌活性. 相似文献
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采用两种不同的方法提取鸡胸腺肽,计算胸腺肽得率,鉴定和比较提取物的生物学活性。结果显示,两种方法的提取物在体外不仅能使脱E受体的淋巴细胞恢复其E受体的功能,并能促进体外培养的淋巴细胞增殖;而且能增强鸡的淋巴细胞增殖能力,增加鸡外周血中γ-干扰素的含量。除了E玫瑰花环实验,各项体内外的活性检测均显示第二批鸡胸腺肽具有较高的活性,并且与购买的人用胸腺肽相当。本研究的结果表明,提取方法二操作简便,产率高,其提取物生物学活性较高,可用于兽医临床研究。 相似文献
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研究翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌活性及小鼠感染模型的防治效果。利用传统水煎法制备翼草景香水煎液,用HPLC方法测定翼草景香水煎液中红景天苷浓度,并用红景天苷浓度标定翼草景香水煎液药物浓度,分别采用牛津杯法和试管2倍稀释法测定翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC),通过建立死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型,测定翼草景香水煎液浓度为0.12316 mg/mL时,在感染前和感染后给药方式下,分别给与0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL药物时对小鼠的体内感染防治作用。结果表明,当翼草景香水煎液浓度为0.49263 mg/mL时,抑菌圈平均直径为28.5 mm;MIC值为0.00385 mg/mL,经病理解剖、细菌镜检、全自动微生物鉴定及药敏系统(VTEK 2 COMPACT)系统细菌鉴定,表明死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型建立成功,当水煎液浓度为0.12316 mg/mL时,0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL预防组和治疗组小鼠死亡率分别依次为50%,41.7%,81.8%,66.7%,50%和75%。因此,翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌具有良好的体内、外抑菌活性,且其预防作用较治疗作用明显。 相似文献
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新型饲料蛋白质柞蚕免疫活性蛋白的研究应用辽宁省农科院大连生物技术研究所都兴范随着营养免疫学、免疫学及生物技术在饲料工业中应用的不断深入,使越来越多的人已将注意力转移到如何通过生物技术来调动动物自身的防御体系以及如何用自然产品来增强机体的免疫力上来。而... 相似文献
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用0.1、1.10、100和1000μg/kgTP-5ip小鼠,连续10天,使腹腔巨噬细胞吞噬功能增强。E-RFC%阳性率增加,循环抗体含量升高,红细胞免疫功能增强,最佳剂量集中在0.1~10μg/kg。 相似文献
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采用King氏改良Reitman氏法测定了60只绒山羊的血清谷一草转氨酶和谷一丙转氨酶活性的正常值,比较雌性绒山羊在不同生理状况(空怀期和妊娠期)下两种酶的活力变化,结果表明绒山羊的血清转氨酶活性与机体合成代谢有较大相关。 相似文献