黑麦籽粒Waxy蛋白亚基的高效分离与鉴定技术体系的构建

【目的】构建用于制备级分离及高效鉴定黑麦籽粒Waxy蛋白亚基的技术体系,为该亚基理化特性的分析、功能的发掘及Waxy种质的快速筛选等提供理论参考。【方法】设计特异引物从灌浆期间的奥地利黑麦籽粒cDNA中克隆获得Waxy,并进行体外表达;利用DuoFlow对籽粒蛋白提取物进行纯化,对峰值收集物、原核表达产物及其Ni柱纯化的重组Waxy蛋白进行SDS-PAGE分离,挖取蛋白条带进行MALDI-TOF质谱鉴定,结合经由基因序列所推导的氨基酸序列,确定回收产物的Waxy蛋白属性;在优化电泳条件的基础上构建针对Waxy蛋白的毛细管电泳体系;同时,利用部分黑麦品种对DuoFlow及CE体系的有效性进行验证。【结果】核苷酸序列分析表明,从奥地利黑麦cDNA中克隆获得一条覆盖Waxy全长的编码序列（GenBank登录号:KF559182）,其理论编码产物约为60 kD;利用DuoFlow Q1阳离子交换柱,以低浓度Tris-Hcl（20 mmol•L-1 Tris-Hcl,pH 9.5）进行蛋白挂柱,高浓度NaCl（20 mmol•L-1 Tris+1 mol•L-1 NaCl,pH 9.5）进行蛋白洗脱,214 nm波长检测,实现了对籽粒Waxy蛋白的DuoFlow高效分离;纯化产物的SDS-PAGE条带大小、质谱鉴定肽段与黑麦、小麦Waxy蛋白序列相似性的统计结果表明,DuoFlow峰值回收产物具有黑麦Waxy亚基一致的特征序列,故属于Waxy蛋白;以DuoFlow纯化产物为标准样,以0.05 mmol•L-1硼砂+15%乙腈+1%SDS溶液(pH 9.5)为缓冲液,采用分离电压20 kV,温度25℃,检测波长214 nm,压力进样,0.5 psi×5 s,在11—12 min处获得峰值约12 mAU单一主峰,图形清晰,基线水平,从而构建了Waxy蛋白的CE鉴定体系,且籽粒Waxy蛋白提取物能直接用于对该亚基的检测;同时,利用黑麦品种对上述体系的验证结果表明,DuoFlow及CE体系适于对Waxy亚基的高效分离与通量检测。【结论】从奥地利栽培黑麦cDNA文库中克隆获得Waxy完整编码序列,构建了能特异分离黑麦籽粒Waxy蛋白的DuoFlow制备级纯化体系,并确立了黑麦籽粒Waxy亚基的毛细管快速鉴定体系。     

桥山林区油松奥地利黑松生长量调查

本文对桥山林区引进奥地利黑松进行生长量对比试验研究分析,奥地利黑松适应桥山林区气候条件,具有生长迅速、生长稳定等特点,可以作为渭北黄土高原今后荒山绿化和营造防护林主要树种之一,也为今后引进新树种提供技术依据.     

奥地利针叶原木需求旺盛

奥地利：在头两个月,积雪延迟了奥地利的伐木生产。目前,针叶原木需求旺盛。由于锯材厂不确定的市场条件,签订长期合同仍需审慎。原木价格稳定在中等水平上。纸浆材不断取得稳定的价格。对薪炭材的需求仍然良好。     

“不务正业”也精彩

对于那些与单调雷同的潮流趋势对抗的人来说,生活中实实在在的东西才最重要,位于奥地利泽尔湖畔的Porsche Design Studio通过精心打造兼具功能和美观的产品丰富了我们的生活,无论工作还是休闲,无论在家中还是在路上,有它们,生活会不同。     

奥地利经营国有林的成功经验

我国国有林经营现在已陷入严重的资源与经济危困之中.奥地利国有林独立经营65年,1923年林木蓄积量为7 600万立方米,1987年已是13 900万立方米.每公顷可利用林蓄积量1923年平均为250m3,1987年已是324m3.国有林80%分布在阿尔卑斯山区,条件并不优越,但每公顷森林的产材量还在逐年增长,现在已达4.5m3左右.近百年来,奥地利对国有林坚持有计划采伐,对山地森林实行长伐期经营毫不动摇,把木材生产与改善森林状况密切结合了起来.1925年和1977年的《奥地利国有林法》明确要求,在保持森林公益机能的条件下,实行按商业原则经营,国有林局是经济实体,应做到自负盈亏.战后40余年,国有林局的林区道路密度每公顷已近24m,并拥有大量机械装备,仍是财政有盈余的企业.     

绿色城市萨尔斯堡

萨尔斯堡是奥地利第二大城市,位于奥地利西部,地处阿尔卑斯山北麓,人口约15万,城市建设整齐而风格多样。萨尔斯堡是一座音乐之城。因为他是莫扎特和指挥家卡拉扬的故乡,也是奥地利人最值得骄傲的地方。每年七月、八月都要在这座城市举行萨尔斯堡音乐节,世界上的许多著名乐团都来此演出。届时,在城市的老城中,在瑞士登广场,在莫扎特广场,在都摸教堂前,在美拿堡花园里,在大街小巷中都飘扬着美妙的音乐,这就是为什么萨尔斯堡人口不到15;     

新便携仪器有望变革禽流感检测

联合国粮农组织和国际原子能机构举办的动物卫生专家会议于2007年3月19日在奥地利维也纳开幕。专家表示,一种新研制出的便携式检测仪有望给禽流感等禽畜传染病的检测工作带来突破性进展。     

奥地利Wallersee沉积物—水界面铁锰的循环和迁移特征

对奥地利Wallersee沉积物中铁、锰的分布特征进行了分析，说明Wallersee沉积物中铁的循环比锰微弱，铁氧化物的还原作用受到了溶解氧和锰氧化物的双重控制。输入沉积物中的铁大部分都保存于沉积物中。锰氧化物的还原虽然也受到溶解氧的制约，但其还原作用仍比较激烈，孔隙水中有特征的还原峰，只不过峰位下移，所以铁对环境的敏感程度比锰高，沉积物中的铁具有环境记录意义，而锰不具有环境记录意义。铁氧化物中无定形铁氧化物优先还原，晶体铁氧化物可以向无定形铁氧化物转化，参与各种反应。     

Stora Enso公司2008年第1季度经营利润受到负面影响

芬兰：Stora Enso公司2008年第1季度的经营利润预计会接近2007年第4季度的水平,但低于2007年第1季度的利润。这是由于中欧受暴风的影响,锯材原木供应量有限而导致其价格的增长而引起的,其在一些商业领域的发展有可能被木制产品行业的糟糕表现抵消。如之前曾报道过的,Stora Enso公司试图减少奥地利、波罗地海国家和芬兰的锯材、     

利用德国黄牛改良本地黄牛的效果初报

德国黄牛原产德国和奥地利,在美洲和欧洲享有较高声誉,为肉乳兼用型品种,侧重于肉用.其毛色为金黄、黄红或黑红色,体躯长、体格大、胸深背直、四肢短而有力,肌肉强健.