华山新麦草α-醇溶蛋白基因的克隆及原核表达分析

 【研究目的】克隆华山新麦草（Psathyrostachys huashanica）的α-醇溶蛋白基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】采用同源克隆法从华山新麦草基因组DNA中分离克隆出α-醇溶蛋白基因并进行序列分析,将克隆的华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5克隆到表达载体pET-28a (+)上,获得重组质粒pET28a-Gli-Ns转化大肠杆菌BL21 (DE3)并诱导表达。【结果】从华山新麦草基因组DNA中克隆了4个α-醇溶蛋白基因：Gli-Ns-2 (FJ713595)、Gli-Ns-3 (GQ139525)、Gli-Ns-4 (GQ139526)和Gli-Ns-5 (GQ139527)。序列分析表明,4条序列具有α-醇溶蛋白基因的典型结构特征,含有8个或9个半胱氨酸残基,序列FJ713595为假基因。利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核系统中特异性表达。Western-blot证实融合蛋白可成功表达。【结论】克隆了4个华山新麦草的α-醇溶蛋白基因序列,基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核表达系统中成功表达,为小麦品质改良提供了新的候选基因。     

超声波处理提取华山松籽油的研究

研究了超声波强度、处理时间、处理时溶剂用量、处理次数对华山松籽油提取率的影响,得出最佳处理条件为超声波强度200kW/m2,处理15min,样品与溶剂比(g∶mL)为1∶7,超声波处理2次,华山松籽油提取率较理想。     

普通小麦—华山新麦草异代换系和附加系的C—分带鉴定

利用染色体C-分带技术,对普通小麦-华山新麦草异代换系和附加系进行了细胞学鉴定。鉴定结果表明,普通小麦-华山新麦草的3个异代换系H921-6-12为5A/Nh5代换、H922-9-12为3B/Nh4代换、H924-3-4为3D/Nh4代换,2个异附加系H8911-1-2-6为Nh4附加、H9014-154-2为Nh7附加。初步推断华山新麦草的Nh5和Nh4染色体分别能补偿普通小麦的5A和3B,3D的缺失。     

华山新麦草穗发芽抗性相关基因AIP2的克隆及其序列分析

为了挖掘和利用华山新麦草(Psathyrostachys huashanica,2n=14,NsNs)的优良基因,拓宽小麦穗发芽抗性基因资源,以华山新麦草为材料,采用同源克隆的方法克隆AIP2基因,利用生物信息学软件分析其基因结构及功能。结果表明,从华山新麦草中成功克隆AIP2基因,该基因的开放阅读框为840bp,编码279个氨基酸残基,结构域预测结果显示AIP2蛋白含有完整的Ring保守域,属于锌指环家族成员。AIP2的gDNA含5个外显子,4个内含子,华山新麦草AIP2氨基酸序列与感穗发芽小麦品种中优9507的AIP2氨基酸序列的相似性为84%,与中优9507相比缺失了44个氨基酸,与抗穗发芽的乌拉尔图小麦的AIP2氨基酸序列的相似性为80%,华山新麦草和乌拉尔图小麦都有氨基酸缺失,推测这些缺失的氨基酸可能与华山新麦草穗发芽抗性强有很大关系。本研究为小麦穗发芽抗性改良提供了新的候选基因。     

华山松林幼树天然更新影响因子分析

对松华坝水库华山松林幼树更新情况进行调查，分析了林分组成、郁闭度、灌木盖度以及坡位等因子对幼树更新的影响。结果表明，华山松混交林的幼树天然更新效果要好于纯林；中等郁闭度（0．50—0．79）条件下幼树天然更新效果最好；随着灌木盖度的增加，华山松幼树每hm^2株数也随之增加；坡下部幼树的天然更新效果好于坡上部。     

华山松种子园主要低产因子分析

针对普遍存在的华山松种子园种子产量低这一问题，我们于１９９５年至１９９７年选择我国最在的平坝华山松种子园作为主要试点，对影响种子产量和质量有关的遗传和环境因子进行了较为系统，深入的研究，本文侧重于造成氏产的主要环境因子综合进行了分析探讨，并提出相应的解决措施和建议。     

衡山求寿圣地景独秀

“恒山如行，岱山如坐，华山如立，嵩山如卧，唯有南岳独如飞。” 清人魏源《衡岳吟》如此赞美南岳衡山的俊秀脱逸。五岳之中。衡山因气候得宜，处处茂林修竹，终年翠绿，自然景色十分秀丽，有“南岳独秀”的美誉。     

秦岭南坡华山松林潜在火险性影响因子的研究

应用３７块标准地、１８５个样方的调查资料，在地表总易燃可燃物载量，枯落物含水率为１０％时的易燃可燃物总含水量２个因子上，对秦岭南坡华山松林的５个林型进行潜在火险排序；以山坡下部华山松林型为代表，结合测定树无声支易燃可燃物密度，研究了林势混交比对地表火和树冠潜在火险性的影响，对此并进行了数量化趋势描述；文中同时也探讨了林分潜在火险性的研究方法。     

X射线水衬比法测定华山松种子生活力的研究

通过研究，运用Ｘ射线摄影技术，经浸种，培养，干燥，射线摄影，在４天内即可准确判断出华山松种子的潜在发芽能力－生活力，制作了射线科的标准图片，确定了最佳判图条件是：２５℃侵种４８ｈ，２５℃培养４８ｈ，４０℃干燥５ｈ；判图标准是：有生活力的种子的潜在发芽胚及胚乳之间界线模糊不清，胚隐红可见，胚乳亮度均匀。     

“锐劲特”之华山论剑

花开两朵,各表一枝。话说自中国"三唑磷"狂追"稻纵卷叶螟",之后刺激德国"拜耳"怀孕,顺利产下新一代更负胜名的混血儿"锐劲特"。以至天下豪雄群起,笑傲江湖,便有了"锐劲特"之华山论剑也。"哧……",未见其人,先闻其声。随着空中一阵轻响,满天水雾里到处是千军万马的"锐劲特"以泰山压顶之势罩向众水稻。