家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化

从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2～ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0～ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m g左右     

结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6、CFP10基因的克隆、鉴定及其原核表达

以人型结核分枝杆菌 H37RV株基因组 DNA为模板 ,应用 PCR法对 ESAT- 6和 CFP10基因进行扩增 ,产物经纯化后与载体 PMD18- T连接、转化及酶切鉴定 ,亚克隆到原核表达载体 PGEX- 6 P- 1,构建原核重组表达质粒 ,转化入大肠杆菌 BL2 1中 ,以 1mmol/L IPTG诱导 ,进行 SDS- PAGE电泳。结果表明 ,ESAT- 6和 CFP10基因表达的融合蛋白相对分子质量分别为 32 0 0 0和 36 0 0 0 ,与实测相符。重组结核杆菌分泌蛋白 ESAT- 6和 CFP10的成功表达为结核病诊断及重组疫苗的构建打下了基础     

黑毛和牛在内蒙古呼和浩特地区的繁育

黑毛和牛肉质在日本肉牛中占绝对优势，是世界闻名的独特肉牛品种。通过胚移在内蒙古呼和浩特繁育，表现良好，生长发育指标已达到日本国内品种标准。同黑白花奶牛杂交，其杂种经育肥，32月龄体重达624．8kg，屠宰率为56．3％，净肉率为49．9％；高档肉占净肉的11．6％，优质肉占净肉的22．7％，大理石花纹等级为1、2等级牛占76％。肉的品质均高于我国地方良种。     

几种缓释肥的氮释放特性以及对草坪草生长的影响

实验室内采用水浸泡法对尿素、3种缓效肥和山西省农业科学院土壤肥料研究所研制(自研草坪肥)的缓效肥的初期溶出率和微分溶出率进行了测定.其中尿素的初期溶出率为22.75%,超出了国际上公认的缓/控释肥的初期溶出率小于15%的指标,而微分溶出率为0.22%,也小于国际上公认的缓/控释肥的微分溶出率(0.25%～2.5%)指标.其他几种缓释肥的初期溶出率为8.73%～14.42%,微分溶出率为0.30%～2.11%,符合国际上公认的缓/控释肥的初期溶出率和微分溶出率指标.田间试验比较和研究了尿素、3种缓效肥和山西省农业科学院土壤肥料研究所研制的缓效肥对草坪草的干草产量和养分含量的影响,尿素和包衣尿素处理的草坪草的生长量前期较高,后期产草量较低,呈马鞍型.其他处理的草坪草干草产量则比较平缓,肥料的氮释放特性与草坪草生长趋势相同.不同肥料处理对草坪草的中量、微量元素含量有一定的影响.     

密花香薷挥发油成分的分析研究

采用水蒸气蒸馏法和气相色谱-质谱-计算机联用法对密花香薷的挥发性成分进行了分析和鉴定.分离出93个峰,确认了其中的84种化合物,其含量占全油的88.34%.主要化学成分为大根香叶烯(18.83%);D-柠檬烯(11.17%);2,5,5-三四基-1,3,6-庚三烯(6.30%);6-亚甲基-双环[3,1,0]己烷(5.90%);氧化石竹烯(3.94%);石竹烯(3.36%);4-碳-3,5-二甲基环己-1-烯(2.88%);α-3-环己烯-1-醇(2.06%).     

几种牧草对河西走廊盐渍化土壤改土培肥的效应研究

在河西走廊盐渍化土地上种植老芒麦、扁穗冰草、碱茅和紫花苜蓿4种优质牧草,对盐渍化程度均有一定的改良效果.其中碱茅对盐渍化土壤的改土培肥效果最好,建植3年后的碱茅,与对照比较,0～20 cm土层中自然含水量增加125.99 g/kg,总孔度增加16.14%,容重降低0.27 g/cm3,pH值由8.43降到8.10,全盐含量降低52.90 g/kg,脱盐率达到76.12%,有机质增加3.67 g/kg,碱解氮含量增加18.63 mg/kg,速效磷和钾亦随之增加.     

江苏省部分规模化鸡场H5亚型禽流感免疫抗体水平的调查

用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验对江苏省13个市随机抽取51个规模化鸡场的1425份鸡血清样品进行了H5亚型禽流感(AI H5)免疫抗体的测定。所检1425份血清样品中,有1423份血清样品检测到AI H5免疫抗体,占所检样品的99·86%;免疫抗体在24以上(达免疫保护)的有1395份,占97·89%,其中免疫抗体滴度在26的有281份,占所检样品的19·72%;所抽检的51个规模场免疫抗体保护率均达80%以上,其中有40个规模场鸡只免疫抗体保护率达100%,占所检规模场数的78·43%。结果表明,该省使用的H5亚型禽流感疫苗对鸡免疫原性较好,免疫抗体较整齐;所抽样的规模化养鸡场AI H5疫苗的总体免疫情况优良。     

不同温度处理对臂形草种子发芽速率的影响

通过不同温度处理5个不同品种的臂形草种子,初步得知,采用80℃水浸种4 min,刚果臂形草种子的发芽速率最快,7 d发芽势达39.25%,发芽率达57.25%,发芽指数达7.48;采用60℃水浸泡种子14 h后,珊状臂形草种子的发芽速率最快,发芽势为13.25%、发芽率为23.25%,发芽指数为2.60.其他3个品种效果不明显,三项指标均较低,有待采用其他方法处理种子.     

中韩贸易的历史与中韩自贸区的未来

自古以来,我国就和韩国有着比较密切的贸易往来,并且随着时代的变迁,这种贸易往来关系也越来越成熟。并且这种良好的发展态势对于周边国家,东亚甚至是整个世界的经贸发展而言,都有着一定的推动作用。诚然,我国和韩国处于不同的社会阶段,但这与两国间的贸易相关并不会产生矛盾,并且,中韩自贸区的建立也为中韩两国经贸关系注入了新活力。     

VEGF在绵羊生殖管道中的表达规律

以不同发情周期雌性绵羊子宫、输卵管为研究对象,采用免疫组织化学技术,针对血管内皮生长因子（VEGF）在绵羊子宫、输卵管的表达、定位和变化规律进行了检测,同时应用相关图像分析软件对抗原染色强度进行了定量分析。结果表明：输卵管在发情0～15d,VEGF表达量在第9天达到峰值后经历波动逐渐下降过程,输卵管内膜上皮细胞是VEGF抗原的主要靶细胞;而子宫角在发情0～15d,VEGF表达量在第5天达到峰值后经历波动逐渐下降过程,子宫内膜固有层及腺体周围细胞为VEGF抗原的主要靶细胞。该研究结果为绵羊生产中进一步提高受胎率和妊娠率及频密产羔等技术的应用提供了科学依据。