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设计带有EcoRV和XhoI酶切位点的上下游引物PCR扩增嗜热菌Dictyoglomus thermophilum DSM 3960的GH39家族的β-木糖苷酶Xln-DT编码基因,利用基因拼接技术将其重组至p ET-20b质粒中pelB信号肽基因的下游,重组质粒转化大肠杆菌表达宿主Escherichia coli BL21,构建分泌融合表达型基因工程菌pelB-Xln-DT。经异苯基-β-D-硫代半乳糖苷诱导,pelB-Xln-DT酶活为2.1 U/m L。粗酶液pelB-Xln-DT的最适温度为85℃,较原酶提高了10℃,最适p H为5.5,比原酶降低了0.5; pelB-Xln-DT在85℃下的热稳定性比原酶有了一定提高,保温1 h后酶活基本不变,保温2 h其剩余酶活为82.0%,而Xln-DT在85℃下保温1 h后其剩余酶活为70.4%;在p H 4.0~7.0的范围内,pelB-Xln-DT具有良好的p H稳定性。引入pelB信号肽后不但能够提高蛋白的可溶性表达,还能提高酶蛋白的热稳定性。以pelB-Xln-DT作为全细胞催化剂转化三七皂苷R1生成人参皂苷Rg1,研究了转化温度、转化时间、三七皂苷R1添加量、重复次数等因素对转化效率的影响。结果表明,全细胞催化剂用量1.0 U/m L,在温度37℃下,3 g/L的三七皂苷R1反应3 h后的摩尔转化率达到91.6%,重复利用10次后,转化率仍能达到46.7%,显示出pelB-Xln-DT良好的重复催化性能。 相似文献
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[目的]研究人参水提物对VERO细胞在体外培养中的氧化损伤。[方法]采用细胞体外培养技术、MTT比色法、SOD和MDA试剂盒法、原子力显微镜(AFM)观察法,研究人参水提物对VERO细胞氧化损伤的机制。[结果]人参水提物对VERO细胞能够起到明显的增殖抑制作用。人参水提物对VERO细胞具有一定的的氧化损伤作用且有一定的剂量及时间依赖性。原子力显微扫描成像结果表明正常生长的VERO细胞表面光滑、细胞体积饱满,而人参水提物处理组细胞膜损坏现象明显,细胞表面的粗糙度较大。[结论]人参水提物对VERO细胞具有一定的氧化损伤作用,其作用机制可能与细胞膜的损伤有关。 相似文献
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泥鳅人工繁殖及苗种培育技术 总被引:1,自引:0,他引:1
泥鳅(Misgurnus anguilicaudatus)原为野生种,属鲤形目、鳅科、泥鳅属,因其味道鲜美,肉质细嫩,营养丰富,被誉为"水中人参"。目前,我国泥鳅养殖所需的苗种主要是人工捕捞的野生苗,加上化肥、农药、工业三废等污染,导致泥鳅野生资源锐减,野生苗种资源已不能满足规模化养殖的需要。2013年,江苏省宿迁市农科院承担了江苏省水产三新工 相似文献
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<正>本刊讯12月11日,福建省花卉协会盆栽植物与进出口分会邀请荷兰瓦赫宁根大学教授尤科特(Uikt)到漳州举办荷兰花卉产业与花卉产品采后技术讲座。漳州市花卉进出口企业负责人、技术负责人、花卉从业人员及闽南师范大学学生近百人听取讲座。 相似文献
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10月16日,2011年全国执业兽医资格考试在全国31个考区74个考点1653个考场顺利进行。据悉,今年全国共有41937人参加了考试。其中,参加兽医全科类考试40407人,水生动物类考试1530人。 相似文献
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