不同锌源及添加水平对肉仔鸡生长性能的影响及其生物学利用率评价

本试验旨在研究碱式氯化锌(BZC)和蛋白锌(PRZ)相对于一水合硫酸锌(ZSM)的生物学利用率以及对肉仔鸡生长性能的影响。采用双因素(3×3+1)完全随机试验设计,选取720只1日龄健康雄性爱拔益加(AA)肉仔鸡,随机分为10个组,每组6个重复,每个重复12只鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,3个ZSM组分别饲喂在基础饲粮基础上添加20、40和80 mg/kg ZSM的饲粮,3个BZC组分别饲喂在基础饲粮基础上添加20、40和80 mg/kg BZC的饲粮,3个PRZ组分别饲喂在基础饲粮基础上添加20、40和80 mg/kg PRZ的饲粮。各组不同锌源添加量均以锌计。试验期42 d,分为1～14日龄、15～28日龄和29～42日龄3个阶段。分别在14和28日龄时,从各重复中选取1只接近平均体重的鸡进行屠宰,测定血浆锌含量和抗氧化指标、组织锌含量以及胰脏锌相关蛋白基因表达水平。结果表明：1)1～14日龄,与对照组相比,饲粮添加不同锌源和添加不同水平锌显著提高肉仔鸡平均日增重(ADG)和14日龄体重(P<0.05),显著降低料重比(F/G)(P<0.05),且以添加40 mg...     

补铁剂及多肽铁复合物的研究进展

缺铁性贫血作为贫血中最常见的一种,越来越受到人们的关注。随着营养与健康需求的变化和安全意识的 增强,人们致力于补铁效果好、吸收好、副作用小、安全性更高的口服补铁剂的研发。本文对补铁剂的发展和相关 研究进行综述,概述新型补铁剂的研究进展,全面阐述多肽铁复合物蛋白琥珀酸铁的原料来源、结构、机理、制 备、应用、消化吸收机制,对多肽铁复合物和蛋白琥珀酸铁的发展前景进行展望,以期对补铁剂的研究与发展提供 理论依据。     

高非蛋白氮利用能力酵母菌的筛选与诱变

蛋白质饲料资源短缺一直是制约着中国饲料工业健康平稳发展的瓶颈问题之一。单细胞蛋白（single cell protein,SCP）在解决世界粮食与蛋白饲料短缺问题存在较大潜质。经多年研究,单细胞蛋白在菌种选育、生产工艺、发酵原料等方面均取得了较大进展,但单细胞蛋白饲料成本仍居高不下,在饲料工业中一直未得到大量应用。提高生产单细胞蛋白生产菌株非蛋白氮（non-protein nitrogen,简称NPN）利用效率和生长速度,是降低单细胞蛋白生产成本的关键。本试验从多株酵母菌中筛选出NPN利用能力较强的菌株,并对其进行紫外照射诱变,以期获得菌体蛋白产量高的突变菌株。通过对14株酵母菌对不同碳、氮源利用的研究,确定其最适碳、氮源,并依据14株酵母的生长潜力、菌体蛋白产量、NPN利用能力等进行排名,筛选出综合性能较优的酿酒酵母菌M（Saccharomyces cerevisiae strain YI59）和N2（Saccharomyces cerevisiae isolate AA2）。将酵母菌M和N2作为出发菌,进行紫外照射诱变。以葡萄糖、硫酸铵为碳、氮源,依平板菌落大小与液体发酵菌体蛋白产量进行初筛和复筛,最终获得菌落较大的3株突变菌MU23、MU3和MU5。经液体发酵复筛发现,MU3和MU5菌体蛋白含量较原出发菌M有显著提高,分别提高12.93%和11.82%（P<0.05）,但菌体蛋白产量与出发菌相比无显著差异（P>0.05）;菌株MU23菌体蛋白含量与出发菌M无显著差异（P>0.05）,但菌体蛋白产量较原出发菌M有较大幅度提升,为0.26 g/L,提高13.04%（P>0.05）。综合上述试验结果,使用紫外照射诱变可以达到提高酵母菌NPN利用能力和菌体蛋白产量的目的。     

NLRP3炎症复合体的体外构建

为体外构建NLRP3炎症复合体,利用PCR方法扩增目的基因NLRP3、IL-1β、ASC和Pro-Caspase-1,分别连接到相应的载体中,构建重组真核表达质粒p3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA,利用Lipofectamine2000试剂转染到HEK293T细胞后,采用Western blot方法验证各蛋白的表达情况;通过质粒共转染体外构建NLRP3炎症复合体,采用ELISA方法检测IL-1β生成情况。结果显示,3XFLAG-NLRP3、pEGFP-C1-ASC、pEGFP-C1-IL-1β、PCI-CASP-HA重组质粒均被成功构建,各蛋白于HEK293T细胞内均被成功表达;质粒共转染后ELISA检测到高水平的IL-1β生成,表明NLRP3炎症复合体体外构建成功。NLRP3炎症复合体在体外的成功构建,为进一步研究其激活机制奠定了基础。     

马乳脂肪球膜蛋白组鉴定及潜在功能分析

试验旨在研究马乳脂肪球膜（milk fat globule membrane,MFGM）蛋白组成及潜在的生物学功能。选取12匹5岁左右、平均体重为450~500 kg的健康纯血母马作为试验动物,主要饲喂干牧草,所有马匹饲养和管理条件均相同。将12份样品以每组4份进行混合,分离提取产后第60天马乳中MFGM蛋白,进行高分辨质谱仪鉴定和生物信息学分析。结果显示,马MFGM组分中共鉴定出310种表达蛋白,这些蛋白主要参与的生物过程为生物调节、刺激应答、定位、多细胞生物过程、运输、信号、细胞通讯、发育过程、细胞分化和免疫系统过程等;细胞成分主要为胞外区域、膜、囊泡、核仁和线粒体等;分子功能主要为催化活性、蛋白质结合、碳水化合物衍生物结合和小分子结合等。KEGG通路分析表明,MFGM蛋白主要参与血小板活化通路、内吞、脂肪酸生物合成和Ras信号通路等。马乳MFGM蛋白的蛋白质互作网络分析图中共包含215种蛋白质。本研究结果揭示了马乳MFGM蛋白质组的复杂性,为解析其营养和生物学功能提供了科学数据。     

Serine-to-glycine ratios in low-protein diets regulate intramuscular fat by affecting lipid metabolism and myofiber type transition in the skeletal muscle of growing-finishing pigs

Serine and glycine are 2 of the first-affected nonessential amino acids in low crude protein (CP) diets for pigs. Therefore, we explored the effects of different dietary serine-to-glycine ratios on growth performance and lipid metabolism in growing-finishing pigs. A total of 160 crossbred healthy barrows, with a similar body weight of around 59.50 kg, were randomly allotted into 1 of 5 treatments (8 pens per treatment and 4 pigs per pen). The serine-to-glycine ratios of the 5 dietary treatments were as follows: diet A (NORMAL group), 1.18:1 (16% CP); diet B (LOW group), 1.2:1 (12% CP); diet C (S2G1 group), 2:1 (12% CP); diet D (S1G2 group), 1:2 (12% CP); and diet E (S1G1 group), 1:1 (12% CP).We found that the pigs fed a low CP diet (12% CP), when maintaining serine-to-glycine ratio at 1:2 and a total amount of 1.44%, had the same average daily gain as the pigs fed a normal CP diet (16% CP) (P > 0.05), but they had increased intramuscular fat (P < 0.05). Furthermore, they exhibited higher expression of genes involved in lipid oxidation (P < 0.05), which was regulated by modulating methylation levels in the promoters of acyl-CoA oxidase 1 (ACOX1) and acyl-CoA dehydrogenase medium chain (ACADM). When compared with the pigs fed a normal CP diet, these pigs had more oxidative myofibers (P < 0.05), which were regulated by AMPK-PGC-1α and Calcineurin-MEF2/NFAT pathways in a coordinated manner. Our findings suggested that a dietary serine-to-glycine ratio of 1:2 is beneficial for improving meat quality in pigs fed a low CP diet.     

四神叶形吸虫的DNA含量及蛋白质电泳分析

四种叶形吸虫成虫初级精母细胞核ＤＮＡ含量测定表明，寄生于较高等鱼类宿主的中华叶形吸虫和鳗鲡叶形吸虫的ＤＮＡ含量较高（Ｃ值分别为０．２５ｐｇ和０．２６ｐｇ），而寄生于较低等鱼类宿主的鲶叶形吸虫和巴氏叶形吸虫的ＤＮＡ含量较低（Ｃ值分别为０．２１ｐｇ和０．２０ｐｇ）。这四种叶形吸虫成虫全蛋白质浓度梯度凝胶电泳分析进一步显示，中华叶形吸虫与鳗鲡叶形吸虫构成一近缘亚群（Ｓｍ＝０．６５７９，Ｄ＝０．４１８７），而鲶叶形吸虫和巴氏叶形吸虫构成另一近缘亚群（Ｓｍ＝０．６１７６，Ｄ＝０．４８１９）；这两个亚群间的相似系数值（Ｓｍ）小于０．５３，遗传距离值（Ｄ）大于０．６４。以上结果从分子水平上再次证实将叶形吸虫属划分为两个亚属是有根据的。     

干扰素诱导跨膜蛋白1对猪源冠状病毒吸附宿主细胞的影响

为探索干扰素诱导跨膜蛋白1（interferon-inducible transmembrane protein 1,IFITM1）对猪源冠状病毒复制的影响,本研究选用猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus,TGEV）高致病毒株及其宿主细胞PK15作为研究对象。正常PK15细胞接种TGEV后,实时荧光定量PCR检测感染后不同时间点PK15细胞中一些干扰素刺激基因（interferon-stimulated genes,ISGs）的mRNA表达水平;利用慢病毒表达系统构建稳定表达和稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系。将一段靶向干扰猪源IFITM1的shRNA序列及猪源IFITM1全长,分别插入pLKO.1-EGFP-Puro载体及pLVML-Myc-MCS-IRES-Puro载体中,分别构建出pLKO.1-IFITM1shRNA-EGFP-Puro及pLVML-Myc-IFITM1-IRES-Puro重组质粒。将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞后获得带有目的基因的重组慢病毒,慢病毒侵染PK15细胞后用嘌呤霉素进行筛选,获得稳定表达及稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系,分别命名为PK15-IFITM1及PK15-IFITM1^-/-,并分别用实时荧光定量PCR、间接免疫荧光试验（IFA）及Western blotting检测IFITM1干扰效率及表达情况;TGEV接种PK15-IFITM1^-/-和PK15-IFITM1,实时荧光定量PCR测定细胞中TGEV的拷贝数。结果显示,PK15细胞接种TGEV后的48 h内,一些ISGs的mRNA水平均有所上升;PK15-IFITM1^-/-细胞系的干扰效率为70%,PK15-IFITM1细胞系表达成功;在PK15-IFITM1^-/-细胞系中,IFITM1的mRNA水平显著下调,促进了TGEV的复制。反之,在PK15-IFITM1细胞系中,TGEV的复制受到了抑制。但IFITM1的表达或缺失却不影响TGEV对PK15的吸附作用。总之,IFITM1对TGEV有显著的抗病毒作用,IFITM1不影响TGEV对PK15细胞的早期吸附,这为后续IFITM1抗冠状病毒机制的研究奠定了基础。     

哺乳动物精清诱导排卵活性蛋白质研究

在动物的精清里包含一些与动物生殖生理活动密切相关的活性蛋白和多肽.驼科动物的双峰驼、美洲驼、羊驼和澳洲考拉等哺乳动物精清中含有类似促性腺激素释放激素(GnRH)作用的活性蛋白质,诱导排卵因子(ovulation inducing factor,OIF),它能引发外周血液中促黄体素(LH)峰浓度的出现和诱发母畜排卵.OIF被认为是一种新的生物活性蛋白质或潜在的新型激素.甚至报道在牛等自发排卵动物以及人精清中也存在类似的活性蛋白.这类因子的发现对于哺乳动物生殖生理及繁殖的深入研究具有重要的意义,有助于动物克服繁殖障碍及繁殖疾病的治疗等.     

Protein characterization using electrophoresis and immunofixation; a case‐based review of dogs and cats

Protein electrophoresis and immunotyping can be a useful adjunct to the standard biochemical techniques for characterizing serum and urine proteins. This paper reviews currently available and commonly used methods for diagnostic protein electrophoresis, including both agarose gel and capillary zone electrophoretic techniques and total protein assessments. Immunofixation and immunosubtraction methods for identification of immunoglobulin location and class are also presented. Practical application of quality assurance and quality control strategies in compliance with American Society of Veterinary Clinical Pathology (ASVCP) best practices are discussed. Commonly encountered serum and urine electrophoretic diagnostic patterns, including electrophoretically normal, acute‐phase protein responses, polyclonal gammopathies, restricted polyclonal/oligoclonal gammopathies, paraproteinemias (monoclonal or biclonal gammopathies), and Bence‐Jones proteinurias are also reviewed using relevant case material. Cases in which immunofixation electrophoresis are particularly useful are highlighted, and methodologies to more accurately quantify serum monoclonal proteins (M‐proteins), monitoring tests commonly used in human medicine, are discussed.