基于KASP标记的葡萄品种鉴定

【目的】开发一组能够区分中国主栽葡萄品种的竞争性等位基因特异性PCR（KASP）分子标记,为中国葡萄品种保护、品种登记和市场维权等提供技术支撑。【方法】基于前人筛选的60个葡萄高多态性SNP位点,转化为KASP标记。分别使用23份代表性品种和76份主要栽培品种对转化成功的KASP标记进行初筛、复筛、验证,获得一组高质量的KASP标记,并用于构建76份葡萄品种的DNA指纹图谱。【结果】60个SNP位点有3个不具备基因组特异性,6个无法设计KASP-PCR引物,最终51个SNP成功转化为KASP标记,转化率达到89.47%。利用LGC-SNPline平台对23份代表性品种进行基因分型,51个KASP标记全部成功分型。基于次要等位基因频率（MAF）大于0.25、多态性信息含量（PIC）大于0.35、缺失率小于0.2、杂合率小于0.6等参数,初步筛选出27个优质KASP标记。使用构建指纹图谱的76份品种复筛出22个高质量KASP标记。22个KASP标记的缺失率均小于0.12,PIC均大于0.3,杂合率在0.4—0.6的标记占77.27%,MAF大于0.3的标记占95.45%。此外,利用这22个标记对同一品种不同树体提取的23份代表性品种的DNA扩增检测,前后两次检测分型结果稳定一致,表明这22个标记具有较好的重复性和稳定性。进一步将基于22个标记获得的76份葡萄品种分型结果转化为二元编码数据,得到76份葡萄品种的指纹图谱。经邻接聚类分析和群体结果分析,可将76份葡萄品种分为3类,并能正确区分二倍体和多倍体。仅用10个标记（VIT_15_18567587、VIT_6_4258638、VIT_8_3320936、VIT_12_22228357、VIT_11_19390306、VIT_16_17950801、VIT_18_11138668、VIT_12_739916、VIT_16_13454358、VIT_16_21202286）就能区分70份品种,其中有54份品种达到品种鉴定的标准（差异位点数≥2）。【结论】从60个葡萄SNP中成功转化51个KASP标记,并筛选出22个高质量KASP标记,构建了76份葡萄品种的SNP指纹图谱,首次验证了KASP技术在我国葡萄品种鉴定中的可行性。     

AM真菌对长果颈黄芪生物量及次生代谢产物的影响

为了解丛枝菌根真菌（AM真菌）对长果颈黄芪植物生长与主要活性成分含量的影响,通过设立室内接种AM真菌、不接种AM真菌以及室外自然状态下3个处理组,以植物生物量、毛蕊异黄酮和黄芪甲苷含量等为指标,考察AM真菌对长果颈黄芪植物品质的影响。结果表明,AM真菌对长果颈黄芪的地上部分和地下部分的生物量没有太大影响,但对根中黄酮类和皂苷类成分含量有显著影响,AM真菌与长果颈黄芪中的黄酮类和皂苷类成分含量呈正相关。AM真菌的施用能够提高长果颈黄芪的植物药用品质。     

杜仲优良品种及无性系DNA指纹图谱的构建

选用3个杜仲无性系筛选出了32条随机扩增多态性DNA引物,用来评价这一技术在鉴定不同杜仲品种及无性系中的应用.32条引物共扩增出191条带,其中多态性条带数为117,多态性比率为61.26％.聚类分析结果表明,在相似系数为0.82时,可以将14个品种及无性系划分为5类.其中的3个引物可以完全区分所有14个品种及无性系.研究结果为杜仲优良品种及无性系的分子鉴定及遗传资源管理提供参考.     

甘蓝型油菜杂交种亲本指纹图谱分析

用140个随机引物对39份甘蓝型双低油菜杂交种亲本进行RAPD分析，选出40个能产生清晰多态性主带的引物重复扩增，以筛选出的9个引的扩增出重复性好的多态性主带构建39份亲本材料的DNA指纹图谱。结果表明，DNA指纹图谱可将27份亲本材料一一区分，其余12份材料可合并为4组，组内材料均为来源相同的姊妹系。指纹图谱鉴定结果与材料实际来源相吻合。     

指纹图谱技术在食醋检测中的应用

食醋指纹图谱是食醋特有品质通过特定的技术处理后,能对产品身份进行分析识别的一种技术。这种识别具有唯一性,可用于食醋产品真假和品质优势辨别。指纹图谱技术的应用,不仅可以满足食醋企业检测需要,而且可以根据指纹图谱库所采集的数据作为依据,制定恰当的食醋行业生产标准,对我国食醋产业可持续发展具有重要意义。     

黔山苍子挥发性化学成分分析及指纹图谱研究

为了构建黔山苍子(Litsea cubeba)挥发油的指纹图谱,利用水蒸气蒸馏法提取山苍子果实挥发油,采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)鉴定其化学成分及相对百分含量。以β-柠檬醛为对照,通过对10批贵州不同产地山苍子样品的测定,标定了16个共有峰,并通过浙江大学中药指纹图谱相似度计算软件计算相似度等有关参数,表明指纹图谱与定性分析相结合是黔山苍子质量控制的一种简单可靠的方法。     

普通荧光谱图法鉴别海上溢油研究

溢油鉴别是确定海上溢油事故污染源的重要的科技手段。采用普通荧光光谱法对16种油品的谱图信息进行提取鉴别。实验结果显示,对于不同种类的油品,由于其荧光光谱谱图信息相差较大,使用普通荧光光谱法很容易就可以区分开;而对于同一类型油品,由于其组分特征相似,荧光光谱的特征峰数目及其峰谷位置相近,鉴别起来存在一定困难。因此,在实际操作中可以考虑将普通荧光光谱法作为溢油鉴别程序中的初选步骤。     

采用任意引物PCR技术进行基因组差异显示

任意引物ＰＣＲ技术是通过使用短的单一引物进行聚合酶链反应，能给基因组提供几百个多态性标记，它是分析基因组间差异的有力工具。它已被广泛用于物种的分类、鉴定、估计亲缘关系、混合基因组样本的分析及创造特异探针等。其主要优点是适用于任何生物、使用的量极少及其高效性和低成本。本文对这种技术的产生、原理、特点、应用及进展作一综述。     

不同工艺即食烤鱼挥发性风味物质差异分析

采用气相色谱-离子迁移谱(Gas Chromatography-Ion Mobility Spectrometry,GC-IMS)测定不同加工工艺即食烤鱼的挥发性成分,分析比较不同工艺生产的即食型烤鱼的风味差异.结果表明:4组烤鱼样品共检测鉴定出50种挥发性物质,包括醇类、酮类、醛类、烃类和酯类.TK样品(炭烤)主要挥发性成分为醛酮类,如3-甲基丁醛、苯乙醛、丁醛、6-甲基-5-庚烯二酮等;样品P1(油炸8 min,140℃)主要挥发性物质与炭烤样品部分相同,除醛酮类外,还包括烯类,如α-松油烯、顺-罗勒烯、柠檬烯等;样品P2(油炸6 min,160℃)的挥发性物质主要为二氢-(3H)-呋喃酮、2,3-丁二酮等;样品P3(油炸4 min,180℃)的主要挥发性物质与P2部分相同,包括M-2-庚酮、1-辛烯-3-醇、呋喃酮等.以TK为参照,P1、P2、P3组样品与TK组样品特征挥发性成分有明显差异,P2与P3挥发性物质种类较为相似.通过主成分(PCA)对比分析,贡献率达90％,样本特征差异明显.通过GC-IMS对即食烤鱼挥发性风味成分分析,对烤鱼工艺改进、优化产品风味有较好的应用价值.