白菜型冬油菜新品种天油5号选育报告

冬油菜新品种天油5号（系谱号986—2-1）是天水市农业科学研究所以白菜型冬油菜品系“St40—1”为母本、引进的双低白菜型春油菜品种“网8”为父本杂交选育而成。在2003—2005年区试中,平均产量2668．70kg／hm^2,较对照品种天油1号增产13．81％,最高单产达2475．00kg／hm^2。该品系表现优势强,植株繁茂,根系发达,高产、稳产,适应性广,含油量41．12％、芥酸29．78％、硫甙93．0μmol／g。适宜在甘肃省东部和中部海拔2000m以下地区推广种植。     

四川近年小麦区试品系中Yr5、Yr10和Yr15的分子标记检测

为了有效的利用近年来在四川具有稳定抗条锈病的3个抗性基因Yr5、Yr10和Yr15,利用Yr5基因的CAPS标记及方法、Yr10基因的SCAR标记及方法、Yr15基因的SSR标记及方法,筛选了2004、2005年度四川省小麦区试中抗条锈的小麦材料,发现在总共72份材料中,有4份材料有Yr5基因的CAPS标记带,1份材料有Yr10基因的SCAR标记带,8份材料有Yr15基因的SSR标记带。说明这三个抗锈基因在四川小麦育种中还有很大的应用前景。     

外源雄激素促进绵羊附睾GPx5基因的表达

为研究外源雄激素丙酸睾酮对绵羊附睾特异表达基因谷胱甘肽过氧化酶5(GPx5)的影响,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清和附睾头部内睾酮(T)、二氢睾酮(DHT)的含量,及附睾头部雄激素受体(AR)蛋白表达量;应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测了附睾头部GPx5-mRNA和AR-mRNA相对表达量;并结合免疫印迹(WB)法检测了附睾头部GPx5蛋白相对表达量。结果表明:丙酸睾酮处理(TPT)组与对照组相比绵羊血清DHT含量,附睾头部T含量、DHT含量均显著提高,分别是对照组的0.5、6.0、0.8倍;GPx5-mRNA和ARmRNA相对表达量显著提高,分别是对照组的0.75和0.77倍(P0.05);AR及GPx5蛋白表达量显著提高,分别是对照组的0.63和0.58(P0.05)。因此,外源雄激素丙酸睾酮可大量提高绵羊附睾头部GPx5基因的表达,对绵羊附睾头部GPx5基因的表达具有促进作用。     

隆昌麻鸭脏器中铜含量的测定研究

[目的]为隆昌麻鸭的开发及养殖提供基础数据。[方法]研究5-Br-PADAP分光光度法测定铜含量的显色体系,并用于隆昌麻鸭脏器中铜含量的测定。[结果]隆昌麻鸭脏器铜含量的线形范围为0~7.5μg/25 ml,回归方程为A=0.031 05C-0.0197,相关系数r=0.9991,加标回收率为97.5%~104.2%。隆昌麻鸭各脏器中铜含量的大小顺序为：肝脏〉心脏〉肾脏〉菌肝〉肺。[结论]该方法操作简便、灵敏度高,可用于隆昌麻鸭脏器中铜含量的测定。     

基于荧光熔解曲线模式RT-PCR快速检测H5N1亚型禽流感病毒

针对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的HA、NA基因保守序列设计2对引物,建立了SYBR Green Ⅰ双重荧光RT-PCR(RRT-PCR)方法,实现了同一反应管内同时检测AIV的H5和N1亚型基因.熔解曲线分析显示,H5和N1扩增片段的熔解温度分别为(795±03)℃和(833±03)℃,无引物二聚体形成,扩增产物片段大小分别为150bp和474bp,与预期大小相符,测序结果证实为H5和N1亚型基因的靶序列.该方法能从H5N1样本中检出阳性扩增信号,熔解曲线可见H5和N1双特异峰;而H5N2样本有阳性扩增,熔解曲线仅见H5单特异峰.AIV的其他HA亚型和其他病毒的RNA、DNA 无扩增信号.本法最低可检测210拷贝·μL-1和195拷贝·μL-1 H5和N1重组质粒,敏感度分别是RT-PCR的100、1 000倍.本研究建立的基于荧光熔解曲线模式RT-PCR可用于H5N1亚型AIV的检测.     

Preparation and Identification of N-glycolylneuraminic Acid IgY Antibody

The experiment was carried out to establish a method for preparation and identification of N-glycolylneuramic acid IgY antibody.Neu5Gc was linked to carrier proteins by carbodiimide(EDC)method.After the immunization of immunogen to laying hens,the IgY antibody was gained.Neu5Gc-IgY was analyzed and identified by ELISA.The results of UV and agarose gel electrophoresis showed that the artificial antigens of Neu5Gc were successfully synthesized.The development of the IgY antibody titer was monitored by indirect ELISA.The result showed that the IgY antibody was generated at 7th day after the first immunization.The titer was gradually increased and reached its peak (1:10 000) at 63th day after the first immunization.The high titer of the IgY antibody maintained through the whole observation period.The sensitivity of anti-Neu5AGc IgY antibody was detected by the competitive blocking ELISA.The linearity about the first chicken of the standard curve showed good,the liner regression equation was y=30.28x+16.923,R²=0.9581.The IgY antibody gained in this study laid the foundation for the establishment of indirect ELISA immunoassay method for detecting Neu5Gc in red meat,milk and tumor tissues.     

不同的血清学方法对布病疫苗免疫绵羊抗体检测结果的比较研究

将国内广泛用于预防羊布病的S2和M5疫苗免疫绵羊,然后定期采血进行细菌分离和血清学检测,并比较血清学方法的检测结果。结果表明ELISA操作方便,具有较好的敏感性和特异性,建议在检疫中用敏感性较高的RBT初筛,用特异性较好的ELISA确诊,以得到较好的效果。     

土壤中细菌HC5的分离鉴定及抑菌活性测定

为了筛选出对马铃薯晚疫疫霉菌（Phytophthora infestans）有较强拮抗作用的生防细菌,从马铃薯种植地的土壤中分离细菌,并通过平板对峙法,测定分离细菌对马铃薯晚疫疫霉菌的拮抗作用。经大量拮抗实验,筛选出一株细菌HC5,经形态特征观察、生理生化特性测定和16S rRNA基因序列分析,确定该菌株为假单胞菌（Pseudomonas sp.）。抑菌试验结果表明,HC5菌株对辣椒疫霉菌（Phytophthora capsici）、黄瓜尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）、马铃薯晚疫疫霉菌、辣椒炭疽菌（Colletotrichum capsici）均有一定的抑制作用,尤其对马铃薯晚疫疫霉菌的抑菌效果显著,抑菌率达89%。采用PCR方法对菌株HC5进行多种抗生素合成基因的检测,扩增到786 bp的硝吡咯菌素片段和587 bp的氢氰酸片段,表明菌株HC5能够代谢产生这两种抗生素,单一或协同发挥拮抗作用。研究表明,菌株HC5是一株具有开发潜力的生防细菌。     

高粱幼穗离体培养再生体系的建立

6个基因型的高粱幼穗接种于YD10、L2、YLMDS和MS1诱导培养基,结果在MS1培养基上6个基因型的幼穗都诱导出愈伤组织,05DL15A诱导率最高为96.0%,四杂40诱导率最低为27.5%。获得的淡黄色颗粒状愈伤组织分化出不定芽,不定芽高8cm左右转入生根培养基再生植株。