高产纤维分解酶黑曲霉诱变选育与发酵条件优化

本试验旨在研究高产纤维分解酶黑曲霉诱变选育与发酵条件优化。通过对黑曲霉X1诱变选育(紫外、硫酸二乙酯、紫外-硫酸二乙酯复合诱变),获得产纤维分解酶能力强的突变菌黑曲霉,并对其产酶发酵条件和水解秸秆能力进行研究。结果表明,黑曲霉X1经紫外、硫酸二乙酯及紫外-硫酸二乙酯复合诱变,筛选出1株产酶能力高的突变菌黑曲霉X1U4-1;与原菌相比,突变菌滤纸酶活性提高了66.7%,β-葡萄糖苷酶活性提高了22.3%,木聚糖酶活性提高了3.8%,还原糖含量(12 h)提高了6.8%。黑曲霉X1U4-1最适发酵产酶条件为发酵时间72 h,玉米芯∶麸皮=3∶7,接种量1.2 mL,硫酸铵浓度4%;在此条件下,滤纸酶活性达到0.77 U/g,纤维素酶活性达到93.80 U/g,木聚糖酶活性达到9 383.18 U/g。本研究表明,采用紫外-硫酸二乙酯复合诱变可有效改善黑曲霉产酶性能和水解秸秆能力。     

降解石榴皮单宁菌株的筛选及鉴定

旨在分离、筛选出可降解石榴(Punica granatumL.)皮单宁的微生物,从自然条件下霉变的石榴皮上挑取野生菌株划线分离,获得纯种菌株,使用含单宁酸的溴酚蓝培养基初筛,再经含石榴单宁的液体培养基复筛。结果筛选出5株野生菌株,依次编号为1#~5#,其中3#和5#菌株的生物耗氧量(COD)去除率分别为60.7%和54.8%,经形态学观察初步鉴定这2株菌株同属于黑曲霉(Aspergillus niger)。     

两种真菌纤维素酶饲用研究初报

以麸质饲料为培养基，培养黑曲霉Ｆ２７（ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒＦ２７）和绿色木霉Ｔ１（ＴｉｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｖｉｒｉｄｅＴ１）生产纤维素酶。两种真菌的ＣＭＣ酶活力均低于在稻草粉营养盐培养基中的酶活力，麸质饲料的还原糖含量明显下降。表明饲用纤维素酶以外加酶法为佳。在猪和家禽消化系统环境条件下，黑曲霉Ｆ２７的纤维素酶的作用适宜温度范围、热稳定性和对麸质饲料、肉鸡饲料及猪饲料的糖化率等方面，均优于绿色木霉Ｔ１。在作用适宜ｐＨ值范围和ｐＨ稳定性方面，此两种真菌的纤维素酶具有一定的互补性。     

柑桔皮渣发酵高蛋白饲料菌种筛选与工艺研究

以柑桔皮渣为原料,研究微生物发酵生产高蛋白饲料的菌种、辅料及工艺条件.结果表明,混合菌种发酵的产品粗蛋白含量优于单一菌种发酵,添加氮源的产品粗蛋白含量比不添加氮源的高;当黑曲霉、米曲霉和扣囊腹膜胞酵母的混合比例为2∶3∶1,培养基中柑桔皮渣85 %,麸皮15 %,含水率达70 %,接种量为0.4 mL/g,自然pH,发酵温度28 ℃,发酵时间4 d时,发酵产品的粗蛋白含量可从10.37 %提高到34.40 %.     

黑曲霉发酵麦麸生产β-葡萄糖苷酶的培养基组成的优化

以黑曲霉为发酵菌株,研究其β-葡萄糖苷酶液体发酵的最佳培养基组成。通过对不同碳源、氮源、磷酸盐、金属离子、氨基酸、表面活性剂等单因素研究,发现麦麸、(NH_4)_2SO_4和KH_2PO_4对产酶有促进作用。3因素二次通用旋转组合设计试验得到该菌株产β-葡萄糖苷酶的优化培养基组成为:麦麸28.4 g/L,(NH_4)_2SO_41.2 g/L,KH_2PO_42.0 g/L,发酵液β-葡萄糖苷酶酶活达到(1 493.90±12.09)U/mL。     

黄芪对黑曲霉植酸酶代谢活性的影响

利用FeSO4-钼蓝法研究了中草药黄芪(Astragalus membranaceus)粉末、黄芪水提取液对黑曲霉(Aspergillus niger)植酸酶在固体培养基和液体培养基中代谢活性的影响.结果表明,在0.03 g/mL的黄芪粉末和0.03 g/mL的黄芪水提取液作用下,44h时黑曲霉中植酸酶活性最高.与对照相比,固体培养基中加入黄芪粉末和黄芪水提取液的吸光度分别提高了33.6％和37.8％,液体培养基中加入黄芪粉末和黄芪水提取液的吸光度分别提高了21.0％和28.7％.在最佳培养时间,植酸酶活性均随着黄芪浓度的增大而呈下降趋势,其中加入黄芪粉末的液体培养基变化幅度最大,植酸酶活性浓度0.01 g/mL是浓度0.05g/mL的1.64倍;加入黄芪水提取液的液体培养基中植酸酶活性浓度0.01 g/mL是浓度0.05 g/mL的1.54倍;加入黄芪粉末和黄芪水提取液的固体培养基中植酸酶活性浓度0.01 g/mL分别是浓度0.05g/mL的1.50和1.42倍.     

土壤中产淀粉酶菌株的分离、鉴定及提高产酶能力的研究

利用形态分析结合18S rDNA序列分析鉴定菌株,采用物理诱变、化学诱变及复合诱变等方法诱变菌株,进一步筛选获得了具有更高产淀粉酶能力的菌株。研究表明：通过筛选获得具有高产淀粉酶能力的真菌菌株fu-1,鉴定为黑曲霉,命名为黑曲霉An。An进一步经紫外诱变、化学诱变筛、复合诱变筛选出产酶活力最大的菌株。成功得到了高产淀粉酶活力的菌株An-7c-2u。     

黑曲霉发酵对黄柏中游离态小檗碱含量的影响

中药材黄柏经黑曲霉菌液发酵15 d后,将发酵后药材烘干、氨醇水浸泡、索式提取等方法处理,与未发酵原药材比较小檗碱含量变化。检测结果表明,经黑曲霉菌液发酵过的黄柏中游离态小檗碱含量较高。该结论可为进一步开发中药发酵饲料添加剂提供依据。     

氮离注入选育β-葡聚糖酶高产为菌株的研究

为获得工业化生产的高产β-葡聚糖酶菌株,试验采用低能氮离子(N )注入诱变筛选的方法,对出发黑曲霉(Aspergillus niger)菌株Y2449进行改良,获得高产菌株SD16.突变株黑曲霉SD16产β-葡聚糖酶酶活由出发菌Y2449的73.00 U/mL提高到493.24 U/mL,产量提高到亲株的7倍,高产菌株SD16经连续5代培养传代,产酶性能稳定.     

复合诱变选育高产β-葡聚糖酶菌株

以黑曲霉SD16为出发菌株,经紫外线和N 注入诱变处理,选育高产β-萄聚糖酶菌株.结果表明:紫外线的最佳照射时间为10min,N 最佳注入剂量为70×2.6×1012 N /cm2;突变高产菌株AN1的β-葡聚糖酶酶活由出发菌株SD16的493.2 U/mL提高到902.5 U/mL.且突变菌株AN1经传5代培养,产酶性能稳定.