广西水牛奶干酪成熟期理化指标变化研究

为掌握广西水牛奶干酪成熟期理化指标的变化规律,以广西水牛和荷斯坦奶牛的鲜乳为材料,按干酪生产工艺生产干酪,并研究分析干酪成熟期（70 d）理化指标的变化情况。结果表明：水牛奶和荷斯坦牛奶干酪pH值、脂肪含量在干酪成熟初期呈明显下降趋势,中后期则趋于稳定;总固体（TS）随干酪成熟期延长逐渐增加,且荷斯坦牛奶干酪比水牛奶干酪增幅大;水牛奶干酪成熟期粗蛋白（CP）、真蛋白（TP）含量呈现微弱的先升高后降低趋势,但整体变化不大,而荷斯坦牛奶干酪CP、TP含量则随成熟期延长而呈下降趋势;在游离氨基酸（FAA）方面,除荷斯坦牛奶干酪的半胱氨酸（Cys）外,其他FAA含量均随干酪成熟期延长逐渐增加。     

广西：打造国内最大良种水牛繁育基地

广西水牛研究所加快良种水牛扩繁技术研究和种源基地建设，全力打造全国最大的良种水牛繁育基地。近日，该所承担的农业部省级种养业良种工程项目——广西良种水牛种畜场二期扩建项目顺利通过了省级验收。     

水牛催乳素受体基因克隆及序列分析

扩增出广西本地沼泽型水牛（Bubalus bubalis）催乳素受体（PRLR）基因部分保守序列,用于下一步实验检测体外培养的水牛乳腺上皮细胞中催乳素受体基因的表达水平。根据已报道的奶牛催乳素受体基因cDNA序列的保守区,设计一对特异性引物。提取广西本地水牛的乳腺组织总RNA,并以其为模板,以下游特异性引物为反转录引物,在反转录酶（AMV）作用下合成cDNA;用Ex-Taq酶进行PCR扩增,得到催乳素受体基因的保守序列,长度为571bp。该扩增产物经纯化后,连接到pMD18-T载体上扩增。经序列分析结果表明：序列较保守,与GenBank上发表的奶牛催乳素受体基因的同源性达到98．9％,与绵羊的同源性达到96．5％,与猪、小鼠、人的同源性分别为86．5％、78．9%、77．1％。催乳素受体基因与奶牛相比,共有6个碱基发生了突变,其中1个为同义突变,其他5个均为错义突变,形成4个氨基酸发生变异。     

四种水牛血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶谱型的分析研究

用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法对四种水牛—摩拉(Murra)、尼里(Nili-Ravi)、广西南宁本地及其三品系杂交[Ni(■× (Mu■× Na■)■]水牛血清LDH同工酶谱型进行了分析研究。结果表明,四种水牛血清LDH同工酶谱的基本特点是 LDH_1>LDH_2>LDH_3>LDH_4>LDH_5,但也出现了 LDH_2>LDH_1、LDH_3>LDH_2、LDH_4>LDH_3和LDH_5>LDH_4的情况。同时还发现四种水牛的部分个体中,除表现正常的五条酶带外,还出现一条新的酶带(LDH_6)。其血清的LDH同工酶谱,在同一品种内不同性别间的差异很小,而在不同品种间的差异则较大。     

福建省镰形扇头蜱的生物学特性

镰形扇头蜱(Rhipicephalus haemaphysaloides haemaphysaloides)在福建省家畜体表出现于3月中旬至7月中旬,以4月下旬和5月上、中旬为寄生高峰期。经人工饲养观察。该蜱属于三宿主蜱,每年发生1代。雌蜱吸血期6-14 d,产卵期14-27 d,卵期25-43 d。幼蜱吸血期2-5 d,若蜱吸血期2-4 d,自雌蜱吸血至下一代成蜱出现共需72-127 d.雌蜱一生共产卵1252-5970粒,以未吸血成蜱越冬.未吸血的幼蜱和若蜱分别能存活2-3个月和3-4个月.     

水牛Smad4基因的克隆及其真核表达载体的构建

为了阐明Smad4基因在水牛卵巢颗粒细胞增殖及胚胎发育中的分子机制,试验采用RT-PCR扩增并克隆水牛Smad4基因,对其核苷酸序列和蛋白质序列进行生物信息学分析,构建Smad4基因的真核表达载体,通过脂质体转染法转染体外培养的牛卵巢颗粒细胞。结果表明,试验克隆得到水牛Smad4基因编码序列,编码区全长为1 662 bp,编码553个氨基酸。通过BLAST对水牛Smad4基因的核苷酸序列进行同源性比对,结果显示,水牛Smad4基因与牛的同源性为99%,与绵羊、猪、马、人的同源性分别为98%、96%、96%和95%。系统进化树分析表明,Smad4基因在不同物种的进化过程中具有高度的保守性。试验成功构建了水牛Smad4基因的真核表达载体pEGFP-N1-Smad4,并在水牛卵巢颗粒细胞中表达出较强的绿色荧光蛋白Smad4-EGFP融合蛋白。本研究成功克隆了水牛Smad4基因,并成功构建了Smad4基因的真核表达载体,为进一步研究Smad4基因在水牛胚胎发育过程中的分子机制奠定基础。     

中国水牛血液蛋白多态性研究：Ⅱ.水牛血液蛋白多态性…

在不同生态环境下，供试水牛类群血中的Ｔｆ，Ａｌｂ及Ｈｂ等蛋白质，有相同的多态性，多位点的基因频率与其生态环境之间，均无显著性差异。     

家养水牛催乳素基因编码区结构特征

 催乳素具有促进生长发育及维持泌乳、进行免疫调节等生物学功能,但目前家养水牛 PRL基因的变异特征及其与水牛性状间的关系还不清楚。本研究采用PCR SSCP及PCR产物直接测序技术,检测不同沼泽型和河流型水牛群体 PRL 基因各外显子的遗传变异,将各外显子序列进行拼接得到编码区序列,对其进行生物信息学分析,结果表明：水牛成熟催乳素含199个氨基酸残基,其编码蛋白呈酸性,碱基使用率为A 25.96%,T 22.95%,C 28.14%,G 22.95%,平均碱基组成差异较小,偏好性密码子占密码子使用总数的48.21%。在沼泽型水牛群体中检测到c.G192A、c.C427T和c.C606T共3种核苷酸替换,均为同义替换,产生8种单倍型,在河流型水牛群体中检测到c.C606T替换,为同义替换,产生2种单倍型,不同单倍型个体未产生表达差异。序列比对分析表明,水牛PRL基因编码区序列在进化过程中未受到人工选择的影响,可能是因为功能的约束使其编码区序列表现得十分保守。     

补饲硒和维生素E对泌乳水牛隐性乳房炎发病率的影响

本试验旨在研究补饲硒和维生素E对泌乳水牛隐性乳房炎发病率的影响。将70头泌乳水牛按胎次、泌乳阶段、产奶量、体重相似的原则随机分成2组,均饲喂基础饲粮(2.0 mg/d硒和120 IU/d维生素E),试验组补饲1.6 mg/d硒和200 IU/d维生素E,每组各35头。试验期107 d,前7天为预试期。检测隐性乳房炎发病率、血浆硒、维生素E含量以及谷胱甘肽过氧化物酶活性的变化。结果表明:与对照组相比,试验组隐性乳房炎乳区发病率60 d时下降了34.06%,90 d时下降了43.11%,2组间个体发病率和乳区发病率差异均不显著(P>0.05);正试期内试验组血浆硒和维生素E含量均显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),60 d时,试验组血浆谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组(P<0.05)。结果提示,与饲喂2.0 mg/d硒和120 IU/d维生素E相比,泌乳水牛补饲1.6 mg/d硒和200 IU/d维生素E显著提高了血浆中硒、维生素E含量及谷胱甘肽过氧化物酶活性,并有降低隐性乳房炎发病率的趋势。     

不同激活方法对水牛ICSI介导转基因效果的影响

本研究探讨了不同激活方法对水牛ICSI介导转基因效果的影响。水牛体外成熟卵进行ICSI介导转基因（ICSI—mediatedgenetransfer。ICSI．Tr）操作后，先用5ixmol／L的离子霉素（ionomycin，Ion）激活处理5min，然后分成3组，再分别用10μg／mL放线菌酮（cycloheximide，CHX）培养5h（CHX5h组）、10μg／mLCHX培养3h后再用2mmol／L的二甲氨基嘌呤（6-DMAP）培养2h（CHX3h-DMAP2h组）或用培养液（CM）培养3h后再用2mmol／L6-DMAP培养2h（CM3h．DMAP2h组）。结果显示，CHX5h组的分裂率、早期胚胎基因表达率和囊胚发育率最高，且显著高于CM3h．DMAP2h组（66．7％比49．5％，p〈0．05；66．7％比40．0％，p〈0．01；22．2％比9．9％，p〈0．05）。ICSI18h后检查原核形成率，发现CHX5h和CHX3h．DMAP2h处理组的完整精子头百分率显著低于CM3h-DMAP2h处理组（p〈0．05），2原核（pronucleus，PN）百分率则显著提高（42．4％比23．8％，p〈0．05；44．6％比23．8％，p〈0．01）。以上结果表明，在水牛ICSI介导转基因时，Ion联合CHX较Ion联合6-DMAP激活重构胚效果好。