奶牛新鲜粪便致病性大肠杆菌分离鉴定

致病性大肠杆菌不仅是全球性腹泻的主要病因而且可导致出血性结肠炎(HC)等多种疾病.与人类疾病相关的致病性大肠杆菌血清型存在于牛肉,牛奶和不少动物的粪便中[1-2].为此,对内蒙古包头规模化奶牛场荷斯坦奶牛的新鲜粪便进行了致病性大肠杆菌的分离鉴定,以期为该地区大肠杆菌病的发生、传播以及进一步研究大肠杆菌的危害性和控制提供依据.     

斯氏副柔线虫rDNA-ITS片段的克隆及序列分析

运用PCR方法以保守引物NC5、NC13、NC13r和NC2扩增从内蒙古地区骆驼皱胃分离的3条斯氏副柔线虫（Parabronema skrjabini）rDNA的内转录间隔区1（ITS1）、5.8S序列和内转录间隔区2（ITS2）。将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGM-T载体,用PCR技术及酶切鉴定阳性菌落,对阳性菌落质粒DNA进行测序。结果表明线虫1（P.sk1）扩增的ITS片段大小为837 bp,包含部分的18S、28S及全部的ITS1（298 bp）、5.8S（157 bp）及ITS2（281 bp）序列;线虫2（P.sk2）扩增的ITS1片段大小为372 bp,包含部分的18S、5.8S及全部的ITS1（296 bp）;线虫3（P.sk3）扩增的ITS2片段大小为484 bp,包含部分的5.8S、28S及全部的ITS2（284 bp）序列。同其它属线虫同源性比较ITS2序列同源性在30.2%-60.1%。本研究系首次报道骆驼斯氏副柔线虫的ITS序列,为斯氏副柔线虫分子生物学的进一步研究奠定基础。     

绵羊基因组中内源性绵羊肺腺瘤病毒相关序列的确定

绵羊都含有与绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)密切相关的15~20拷贝内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)相关序列。宿主可利用内源性病毒来预防致病性反转录病毒的感染,一些内源性病毒可以有效地干扰相关外源性病毒的复制。本试验通过分子生物学手段确定了蒙古绵羊基因组中含有enJSRV6和enJSRV10两个内源性病毒基因而内蒙古白绒山羊中未发现。通过比较内、外源病毒LTR序列的酶切图谱,获得专一作用外源性病毒的核酸内切酶M spⅠ、TfiⅠ、BsaWⅠ,如果将酶切与聚合酶链式反应(PCR)相结合,不需要经过测序就可分辨enJS-RV和外源性绵羊肺腺瘤病毒(exJSRV),形成"酶切-PCR"检测技术,将为绵羊肺腺瘤病的快速诊断提供了新的手段。     

内蒙古绒山羊毛囊发育不同时期皮肤中BMP4基因的表达

试验应用RT-PCR技术对骨形态发生蛋白4(BMP4)基因在内蒙古绒山羊毛囊发育不同时期的表达情况进行了定量检测,为深入探讨该基因对毛囊发育的作用及机理提供线索和依据.     

奶牛环境性乳房炎临床分离株免疫原性分析

试验选择2株大肠杆菌(A1、A2)及2株克雷伯菌(K1、K2 )对其菌体蛋白图谱和全菌抗原转印图谱进行了研究,用建立的全菌包被ELISA试验检测兔血清中抗体水平和交叉保护性,筛选到2株具有典型抗原谱、保护性抗原全面的菌株.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株ORF6基因的克隆与原核表达研究

根据GenBank中美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF6基因序列,设计合成一对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增出PRRSV的ORF6基因(M基因)。将所扩增片段克隆入原核表达载体pET-32a(+),pET-ORF6重组质粒转化DH5a宿主菌后,经双酶切、PCR鉴定后挑选阳性克隆测序鉴定并对插入的ORF6基因序列进行分析。结果表明,ORF6基因的原核表达载体构建成功。ORF6基因推导的氨基酸与美洲型相应基因的同源性为96.0%～100%,与LV株的同源性为79.9%,系统进化树表明该PRRSV属于美洲型。将构建成功的重组质粒pET-ORF6转化BL21,诱导后经SDS-PAGE和Western-blot分析表明:克隆在HIS标签的膜基质蛋白基因与HIS获得了高效表达,表达的融合蛋白HIS-M分子量约为39kDa,并且有免疫学反应活性。     

阴外动脉灌注乙酸钠对奶山羊乳腺营养物质摄取和利用的影响

选用体重和产奶量相近的4只安装有阴外动脉血插管的处于泌乳中期的关中奶山羊,采用4×4拉丁方设计,分别灌注乙酸钠0、12、16和24 g/d,研究阴外动脉灌注乙酸钠对乳腺营养物质摄取和利用的影响.结果表明:基础日粮条件下向关中奶山羊阴外动脉灌注乙酸钠与未灌注相比,可使乳脂率显著提高8.00%～11.71%(P<0.05),其他乳成分含量变化不显著(P>0.05).乳腺动脉血中乙酸和挥发性脂肪酸浓度、乙酸、丁酸和挥发性脂肪酸摄取量均有极显著提高(P<0.01).灌注乙酸钠使乳腺动静脉血中氨基酸摄取量有所降低(P>0.05),对葡萄糖和甘油三酯乳腺摄取量没有显著影响(P>0.05).灌注16和24 g/d乙酸钠组动静脉血中必需氨基酸和非必需氨基酸的比值与灌注O和12 g/d乙酸钠组相比显著升高(P<0.05).灌注乙酸钠使乳腺摄取的乳脂前体能转化为乳脂能的效率提高了1.02%～2.04%,氨基酸能转化为乳蛋白能的效率提高了4.07%～9.09%,葡萄糖能转化为乳糖能的效率提高了3.39%～5.08%.     

不同剂量猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗肌肉注射诱导仔猪细胞免疫的研究

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5)分别以200 ug,100 ug和50 ug 3种剂量肌肉注射免疫21日龄仔猪,同时设空载体对照和生理盐水空白对照.于免疫后7 d、15d、30d、45d、60d和70d采用流式细胞仪(FACS)和淋巴细胞增殖试验(MTT法)分别对免疫猪外周血中CIM+、CD8+T淋巴细胞数和淋巴细胞的转化功能进行检测.结果表明3个不同剂量的pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5基因疫苗免疫仔猪后均能诱导产生良好的细胞免疫应答,实验组与对照组比较差异极显著(p<0.01)或显著(p<0.05).大剂量基因疫苗免疫仔猪的外周血T淋巴细胞的增殖能力及CD4+、CD8+百分含量高于中剂量和小剂量基因疫苗免疫的仔猪,表现出一定的量效关系.     

全球视野下的中国草原生态系统可持续发展

探讨了为什么和怎样从全球视野实现我国草原生态系统可持续发展,这是共同性原则的要求,国际社会特别是发达国家对解决这一问题应担负更多的责任。我国草原生态系统的退化已影响周边国家和全球的生态环境。世界环境组织为实现我国草原生态系统可持续发展提供了组织保障,我国应树立资源的全球观点,在全球范围内实现资源共享和优化配置,与毗邻的国家构造自然共同体,选择国际通行的考核政绩的标准,借鉴实现可持续发展的组织形式。     

促进小麦生长的根围细菌的筛选及初步鉴定

为探明从植物根围土壤中筛选到具有高效促生作用的细菌菌株的分类地位和促生效果,并为进一步的应用奠定基础。从33个供试土样中分离得到1 700多个细菌菌株,在小麦上进行了促进生长的筛选。经过初筛、复筛,并对数据进行相关分析,最终得到2株具有良好促生效果的细菌菌株ZX-7和ZX-9,菌株ZX-7和ZX-9处理的小麦根重比对照分别增加38.8%和26.1%,鲜重比对照分别增加26.9%和19.3%、株高比对照分别增加7.4%和3.9%。通过对其16S rDNA序列分析,两菌株初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus)细菌。