A型禽流感病毒通用型核酸检测标准样品的研制及不确定度分析

利用基因克隆和体外转录技术,制备A型禽流感病毒通用核酸检测阳性标准样品。根据禽流感基质蛋白基因M的序列,设计全长开放阅读框的克隆引物,RT-PCR获得相应片段,连接至pGEM-T载体,测序后采用体外转录方法制备RNA纯品,初步定量稀释后,混合分装作为核酸标准样品候选物。采用实时荧光定量RT-PCR方法进行均匀性和稳定性检验,并委托外部实验室采用外标实时定量RT-PCR方法对转录的RNA片段进行定值。通过绘制荧光定量标准扩增曲线和协作标定的方式,计算标准物质含量（拷贝）,并进行不确定度的估算。均一性结果显示瓶间差异小于5%,稳定性试验表明室温20~25℃（相对湿度20%~50%）14d,2~8℃3个月以及-20℃保存1年的含量均无明显变化。核酸标准物质定值为（3.120±0.345）×10^8拷贝数,可用作禽流感病毒通用核酸检测的标准质控品。     

马动脉炎病毒血凝抑制试验与微量中和试验的对比研究

195 5年在美国俄亥俄州 Bucyrus地区某牧场的马群暴发急性马病毒性动脉炎 ,主要发生于妊娠母马并引起流产 ,其特征性病理变化为病变器官小动脉膜变性和坏死 [1]。随后 Doll等从流产的胎儿组织中分离出病毒 ,并命名为马动脉炎病毒 (EquineViral Arteritis,EAV) ,后该分离株 (Bucyrus株 )被称为马动脉炎病毒的原型病毒。目前 ,从血清学调查来看 ,该病分布于世界各国 ,严重影响养马业的发展 ,甚至造成严重的经济损失 [2～ 4 ]。马动脉炎病毒是一种有囊膜的负链 RNA病毒 ,在分类上与猪繁殖与呼吸综合征病毒 (Porcine Reproductive andResp…     

新型A型H1N1猪流感疫情动态及防控措施

2009年3月18日由墨西哥发端的人类大流行性甲型(A型)H1N1流感疫情迅速在全球蔓延,并已扩散到中国。新型A型H1N1流感突破种间屏障由人传染给猪、禽,并相继在北美、南美、大洋洲出现疫情。2009年4月21日,新型A型H1N1猪流感疫情首次在北美的加拿大发生;2009年6月24日,在南美的阿根廷发生猪流感疫情;2009年7月24日,远在大洋洲的澳大利亚也出现猪流感疫情;更糟糕的是在2009年7月23日,在南美紧邻阿根廷的智利的禽类(火鸡)首次发生A型流感疫情。此次新型A型H1N1流感疫情呈现大流行病学显著变化:①突破种间屏障由人传染给猪、禽;②突破地理屏障,在三大洲先后暴发规模不等、强度不一的多起疫情。因此,我国卫生主管部门、兽医主管部门和出入境检验检疫部门应高度戒备,密切关注,采取严格的生物安全措施,严防疫情疫病跨越国境,特别是防止新型A型H1N1流感疫情在人群、猪群、禽群之间相互传播,避免疫情在人类和动物进一步扩散。     

对虾Taura综合症病毒Taqman实时定量RT-PCR检测方法的建立与应用

建立了Taqman实时定量RT-PCR方法检测对虾的Taura综合症病毒(Taura syndrome virus,TSV).选取TSV基因组的保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,扩增产物长度为73 bp.以含有TSV目的扩增片段的质粒为标准品,进行实时定量RT-PCR反应,结果表明质粒DNA在6～6×106个拷贝,共7个数量级的范围内有"S"型扩增曲线.根据病毒拷贝数与Ct值制备了标准曲线,可以用于病毒的定量分析.该方法的检测灵敏度为6个病毒粒子.该方法的重现性好,组内的实验变异系数为0.04%～2.70%,组间实验变异系数为0.92%～4.67%.引物和探针对于对虾基因组RNA、黄头病毒RNA都没有扩增反应,表现出良好的特异性.实时定量RT-PCR检测TSV方法的建立,对于虾病的临床诊断及流行病学研究具有重要意义.     

进境伴侣动物的检疫

随着我国改革开放及对外贸易发展，进出境旅客数量日渐增多，携带伴侣动物的数量、种类、范围也在不断增加和扩大。由于伴侣动物具有隐蔽性、随机性和非专业性等特点，给检疫工作带来一定困难。如何搞好进出境伴侣动物的检疫，防止危险性动物疫病的传入，确保人畜健康，是动植物检疫工作人员急需解决的一个问题。青岛动植物检疫局自1993年5月起（青岛至仁川的国际客货航班开通），多次截留入境伴侣动物，为认真搞好检疫，我们主要做了以下几个方面的工作。一、广泛宣传动植物检疫的重要意义，提高旅客对动植物检疫工作的认识，增强法制观念…     

泥蚶苗中间培育技术研究

利用虾池进行泥蚶苗中间培育、初始培育密度100万粒／亩，平均壳长1．93mm，经过3个月的培育，长至平均壳长5．6mm，中间培育成活率为47．3％。     

鸡马立克氏病毒超强毒及其防制措施

马立克氏病（Marek’sDisea。，MD）是一种由B群疤疹病毒引起鸡的最常见的淋巴组织增生性疾病，以外周神经和其它组织的单核性细胞浸润为特征。本病传染性强，造成的经济损失十分巨大。所以，一直是国内外最受重视的禽病之一。马立克氏病病原为马上克氏病毒（MDV），根据MDV毒株抗原差异及其生物学特性，将MDV及其抗原相关病毒分成三个血清型、血清1型包括所有强毒及其致弱毒，血清11型为天然不致瘤病毒，血清巨型为火鸡技疹病毒。其中血清I型MDV，根据其致病性又可分成四个亚型（Schat，1982），即超强毒株d强毒株，毒力温和株及强…     

动物源性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

大肠杆菌和金黄色葡萄球菌是医学和兽医临床上最常见的病原菌,给人类的健康和畜牧业的发展造成严重的损害。随着抗菌药物的广泛使用,细菌耐药性问题日益突出[1]。20世纪90年代前后所分离的致病性大肠