褐藻多酚的生物活性及提取技术研究进展

本文对不同褐藻中的褐藻多酚存在的形式进行了分析,综述了褐藻多酚抗菌、抗氧化、抗凝血、抗肿瘤以及化学防御等生物活性的研究进展,并比较了有机溶剂浸提、超声波辅助提取、微波辅助提取以及有机溶剂萃取纯化等方法的提取效果,旨在为褐藻多酚的进一步研究和利用提供参考依据.     

皱纹盘鲍脯氨酰内肽酶的分离纯化及性质

脯氨酰内肽酶(Prolyl Endopeptidase,PEP)广泛分布在动植物和微生物体内,参与细胞生长和代谢调控。PEP在哺乳动物生殖器官的生长发育过程中起着重要作用,但贝类PEP与性腺发育是否有关尚未有相关报道。本研究以皱纹盘鲍为对象,采用荧光定量PCR技术(qRT-PCR)在性腺检测到有最高的基因表达量和较高的酶活性。通过硫酸铵分级沉淀和连续柱层析,从皱纹盘鲍性腺中分离纯化得到分子量约为82 ku,等电点约为5.5的PEP,其最适温度和最适pH分别为25 °C和6.0,在15~25 °C和pH 5~8能够保持较高的酶活性。利用LC/MS/MS分析纯化蛋白,得到182个氨基酸残基,与皱纹盘鲍脯氨酰内肽酶一致。圆二色谱分析显示,温度对PEP二级结构有较大的影响,拟合热变性温度为51.4±0.2 °C。为了进一步探究PEP在鲍鱼性腺发育过程中的作用,对不同发育时期(生长初期、前期、中期和后期)的雌雄鲍鱼,采用免疫印迹(Western Blot)和qRT-PCR分析性腺中PEP的蛋白和基因表达水平。结果表明,PEP在雄性和雌性性腺的各个时期均能被检测到,在雄性性腺的成熟中期和雌性性腺的成熟后期表达量最高。PEP在鲍鱼性腺不同发育时期时表达量的差异表明其可能参与到性腺发育的过程。     

黄鳍鲷肌肉中弹性蛋白酶基因全长克隆及生物信息学

研究表明弹性蛋白酶(elastase,Ela)参与调控嗜水气单胞菌引起的细菌性溃疡病,对控制鱼类养殖中免疫疾病有重要作用.本研究根据已报道脊椎动物的Elas基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR和RACE技术克隆获得黄鳍鲷Ela基因(AlEla)cDNA序列全长,并对其进行生物信息学分析.结果显示,AlEla基因全长...     

海藻多糖在乳品工业中的应用研究进展

海藻多糖来源丰富,可以分为褐藻多糖、红藻多糖、蓝藻多糖、绿藻多糖等。国内外大量研究表明,海藻多糖作为海藻生物活性物质之一,具有多种生理保健功能,如免疫调节、抗氧化、降血脂、抗肿瘤、抗炎、保护肝脏、防辐射等。海藻多糖具有增稠、稳定、保水等多种食品功能,已经广泛应用于食品工业中。本文对海藻多糖的制备方法和生理保健功能,特别是海藻多糖在乳品工业中应用的研究进展进行回顾,并展望今后研究应用的热点和趋势,为其更广泛地应用于乳品工业提供一定的理论参考。     

液态发酵大豆抗氧化活性肽条件的优化

筛选和优化液态发酵法生产大豆抗氧化活性肽的条件.以总抗氧化活性的强弱为指标,通过对发酵温度、种龄、pH值、接种量、料液比、发酵时间等条件作单因素、析因试验确定主要影响因素,并采用最速上升试验和中心组合二次旋转回归响应面法优化pH值、接种量.优化获得液态发酵大豆抗氧化活性肽的最佳工艺参数为发酵温度37℃,种龄36 h、pH值为7.39,接种量为5.19%,料液比4%,发酵时间36 h.在此条件下发酵产物总抗氧化活性795.75 U·g-1(豆粕),试验值与预测值基本相符.     

海藻液体肥对蔬菜产量及品质的影响

采用由酶解法和酸解法制得的海藻液体肥,在蔬菜作物上进行浸种和叶面喷洒试验,结果表明:海藻液体肥能显著提高种子发芽率,促进作物的生长发育,提高作物产量,改善作物品质。用海藻液体肥浸种,可使种子发芽率提高12%左右,将其用于叶面喷洒,可使作物增产10%~147%,果实中总糖、维生素C、叶绿素含量均有提高。     

鱼皮明胶蛋白膜的制备及其性质改良

利用罗非鱼鱼皮提取明胶制备蛋白膜,考察了浸提条件和戊二醛的添加对明胶蛋白膜性质的影响.结果表明,利用罗非鱼鱼皮可以制备成无色透明的明胶蛋白膜.在80℃水浴条件下,伴随着明胶浸提时间的延长,膜的抗拉伸强度（TS）出现先上升后下降的趋势,在浸提时间为1.0 h时达到最大值.而膜的断裂延伸率（EAB）和水蒸气透过率（WVP）则随着浸提时间的增加而下降.然而,浸提时间对膜的透光率没有显著影响.另一方面,当利用质量分数为1%～4%（相对明胶蛋白）的戊二醛对蛋白膜进行改性时,膜的TS、EAB、WVP和溶解性均明显下降,而蛋白膜的色泽变黄,紫外线阻隔能力增强.利用SDS-PAGE分析发现,戊二醛的添加会使明胶分子发生交联反应,且反应更易在高分子成分之间发生.     

克氏原螯虾原肌球蛋白的纯化及过敏原性分析

以13份甲壳类动物过敏患者血清的Western—blotting分析,确定克氏原螯虾主要过敏原为36ku蛋白质．通过盐析、等电点沉淀及热处理等方法纯化该蛋白质,以兔抗拟穴青蟹原肌球蛋白（Tropo-myosin,TM）多克隆抗体的Western—blotting分析,确定该蛋白质为TM．同源性分析表明,克氏原螯虾TM与南美白对虾TM、拟穴青蟹的氨基酸序列相似性较高（〉90％）．酶切位点预测显示,它分别有49个胰蛋白酶和6个胰凝乳蛋白酶的酶切位点．模拟胃肠液消化实验结果显示,纯化TM不易被胃蛋白酶降解,易于被胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶降解,进一步的Western—blotting和抑制性ELISA分析结果显示,其消化产物仍具有一定的免疫活性．采用蒸煮处理可降低TM的消化稳定性及免疫活性,且蒸煮处理时间越长,效果越显著．说明。TM为克氏原螯虾主要过敏原．与其他甲壳娄动物TM的序列相似件较高．     

电阻抗分析在菊苣根冻害检测中的应用研究

以菊苣(CichoriumintybusLvarfoliosumcv.)根为试材,分析了低温下电阻抗和钾离子渗漏速率的变化及其与细胞膜透性变化的定量关系。结果表明:随着低温贮藏时间的延长和冻害的发展,菊苣根细胞膜透性增大,钾离子渗漏速率上升,组织的电阻抗值下降。3种温度下(0℃,-1℃,-3℃)贮藏的菊苣根其电阻抗值的变化均与钾离子渗漏速率呈显著的负相关关系。电阻抗对频率作图显示,在低频率范围(20～100Hz)可得到最大而且较稳定的电阻抗值。因此,电阻抗分析方法可以用来检测和评价植物的冻害     

Ｃｄ、Ｐｂ单一及复合污染下土壤酶生态抑制效应及生态修复基准研究

由于土壤酶活性可有效地反映土壤重金属的污染程度,因此,本文通过研究Cd、Pb单一及复合污染对土壤酶(脱氢酶、磷酸酶、脲酶、过氧化氢酶、淀粉酶和蔗糖酶)活性的影响,以期选取合适的土壤酶指标作为Cd、Pb污染的生物标记物,为建立Cd、Pb污染生态修复的基准提供科学依据。研究结果表明,不同的土壤酶活性对Cd、Pb的敏感性各不相同,并且酶活性随土壤重金属浓度增加表现为叠加效应或拮抗效应。Cd、Pb单一及复合污染对脲酶活性抑制作用显著,Cd、Pb复合污染对脲酶活性表现为叠加效应,因此,脲酶可作为土壤Cd、Pb污染的生物标记物。通过半数生态剂量模型研究发现:Cd、Pb污染下,50%脲酶活性受抑制的毒性阈值分别为2273和2703;Cd污染土壤的生态修复基准值为1.33mg·kg-1,Pb污染土壤的生态修复基准值为106mg·kg-1。