禽流感检测方法研究进展

1病毒的分离鉴定无菌采集病料经处理后接种9～11日龄鸡胚,收取尿囊液测定血凝活性,若为阴性则应继续盲传2～3代。对具有血凝活性的尿囊液需先用新城疫穴ND雪抗血清做血凝抑制穴HI雪试验,以排除ND感染。然后用免疫扩散等方法来检测特异性核心抗原——核糖蛋白穴NP雪或基质蛋白穴     

O型、A型及Asia1型3个型口蹄疫病毒通用套式RT-PCR检测方法的建立

为了建立针对流行于我国及周边国家主要口蹄疫病毒(FMDV)血清型的检测方法,本实验设计2对特异性引物,通过对反应条件的优化,建立了能够同时扩增O型、A型及Asia1型FMDV VP1全基因的套式RT-PCR (RT-nPCR)方法.该方法能特异性检测O型、A型和Asia1型FMDV,对其它相关动物病毒的检测结果均为阴性;比FMDV多重RT-PCR商品试剂盒敏感约1 000倍.利用该方法对10份FMDV样品进行扩增检测,结合扩增产物的克隆测序技术,对所检样品进行了准确定型.实验结果表明,该方法通用型强,可用于3个血清型FMDV的检测和分子流行病学调查.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征 (Porcine reproductiveand respiratory syndrome,PRRS)是 1 987年发现的一种新的猪病 ,它主要是引起母猪的繁殖障碍 ,如流产、早产、死胎、木乃伊胎和呼吸道症状的一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)引起的接触性传染病。此病最初在美国首先被发现 ,随后相继在世界各国报道 ,我国台湾省也有疫情的报道。 1 995年我国首次从进口猪中检出 PRRS阳性猪 ,并从中分离到 PRRSV。 1 996年郭宝清等首次从国内 PRRS血清阳性猪群中分离到 PRRSV,从而证实了我国也有此病的流行[1] 。由于 PRRS主要是引起母猪的繁殖…     

绵羊支原体肺炎的诊断及防制

1 发病情况 2005年11月18日,本校由于教学需要,从四川省雅安市周边不同地区购买山羊50只,按正常情况混合饲养,并给驱虫药.第4天发现部分羊精神不好,食欲下降,夜间羊咳嗽加重,体温升高,肌肉注射青霉素和链霉素,效果不佳,症状加剧,后波及全群,有30只羊发病,死亡3只,发病率达60%,死亡率达10%.     

Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立

根据获得的Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒（DHVⅠ）RNA聚合酶基因序列，应用Primer Premier5．0软件设计了1对引物，建立了检测DHVⅠ的RT-PCR方法。该法能从DHVⅠ中扩增到440bp的条带，而对正常鸭胚尿囊液、健康鸭肝、鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅细小病毒、雏鹅新型病毒性肠炎病毒、禽流感病毒（H5N2亚型）、鸭病毒性肿头出血症病毒、鸭源多杀性巴氏杆菌（5：A）的扩增结果均为阴性。该法最低可以检测到30pg的DHV工核酸模板。RT-PCR对DHVⅠ强毒CHv-1株人工感染发病死亡鸭肝的检测结果与病毒分离和Dot—ELISA检测结果的阳性检出率均为100％，对脾、肺、脑病料的检出率显著（P≤0．01）高于病毒分离和Dot-ELISA。RT-PCR、病毒分离和Dot—ELSA对1987～2005年采集且保存于-20℃的经病毒分离已确诊为鸭肝炎的临床送检肝病料的检出率分别为100％（19／19）、36．84％（7／19）和57．98％（11／19），对2000-2005年采集且于-20℃保存的来源于中国18个省份发病鸭群的48份肝病料的检出率分别为100％（48／48）、56．25％（27／48）和75．00％（36／48）。结果表明，建立的RT—PCR方法具有良好的特异性和敏感性，可用于DHVⅠ的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。     

一株猪源化脓隐秘杆菌的分离与鉴定

四川内江某猪场发生疾病,病猪的肝、肺出现化脓性结节,脾出血性肿大,无菌采集病猪的病变组织进行细菌分离,得到1株革兰氏阳性菌,形态多样,呈球状、杆状或棒状,单在或成丛排列,该菌在TSA平板上生长缓慢。经细菌分离培养、16S rDNA鉴定、动物致病性试验等,结果显示该株分离菌为致病性化脓隐秘杆菌。药敏试验显示,该分离菌对头孢呋肟、氨苄西林、卡那霉素、四环素、氟苯尼考等药物有不同程度的敏感性,对于指导临床用药具有积极的意义。     

大熊猫源大肠杆菌的分离鉴定和耐药性检测

本试验在对从四川卧龙大熊猫研究中心和雅安碧峰峡野生动物园的圈养大熊猫肠道大肠杆菌分离鉴定的基础上,对其耐药性进行了检测与分析,为本地区采用高效低残留的抗生素治疗大熊猫大肠杆菌病提供依据.     

血清1、2、4、5型鸭疫里默氏杆菌的RAPD

以37℃摇震培养舜口烛缸厌氧培养，从12种培养基中选择出鸭疫里默氏杆茼的最优培养基和培养条件。以血清1、2、4、5型的鸭疫里默氏杆菌代表株A1、A2、A3、A4为研究对象，培养增殖后分别提取基因组DNA，利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术，对其基因组进行了DNA分析。从20条随机引物中筛选出8条随机引物，这8条引物对4种血清型的鸭疫里默氏杆菌的扩增图谱有较好的多态性，可作为分子标记鉴别4种不同血清型的鸭疫里默氏杆菌，同时还筛选出能在4个血清型的鸭疫里默氏杆菌代表株均出现相同的特征条带，而对照茼大肠杆菌、沙门氏茼无该条带的随机引物，从而为鸭疫里默氏杆菌病的分子诊断打下了一定基础。     

不同追播处理的Tifway生物量及追播草坪综合质量差异性研究

1998-2000年,选用多花黑麦草、多年生黑麦草、紫羊茅、匍匐翦股颖在四川农业大学草学试验基地的种间杂交狗牙根Tifway(Cynodon dactylon×C.transvaalensis)模拟运动场地进行冬季追播试验.结果表明,未处理Tifway的地上生物量随温度升高而增加,而地下生物量的变化趋势不明显,地上、地下生物量比值保持在一个稳定区间,追播处理下Tifway的地下、地上生物量比值发生明显变化.除用多花黑麦草追播的草坪质量低于Tifway单播外,其余追播处理的草坪质量均优于单播Tifway草坪,其中追播多年生黑麦草后的混合草坪质量评分最高,为7.27分(1999年,98-D-a).另外,追播草坪质量与播种量呈负相关(相关系数为-0.228和-0.212),与播种时间呈正相关(相关系数为0.461).     

犬精液冷冻液的优化试验

通过对不同配方的稀释液、添加不同剂量的维生素B12、维生素C和复合维生素B对解冻后精子存活影响的试验,结果表明,配方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种稀释液制作的冻精解冻后精子活率均大于30.00%,Ⅰ液最高,其冷冻精液解冻后活率可达43.35%±0.85%,但Ⅰ液和Ⅱ液差异不显著(P>0.05),Ⅲ液最低,差异显著(P<0.05);顶体完整率和畸形率Ⅰ液最优,差异显著(P<0.05);Ⅱ液与Ⅲ液差异不显著(P>0.05);在Ⅰ稀释液中添加维生素B12对解冻后精子的活率、精子顶体完整率影响不大,但平均值都高于对照组,并且随着维生素B12量的增加,精子畸形率有继续降低趋势;添加复合维生素B 4mL/100mL,维生素C 4mL/100mL对犬精子均有保护作用。