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从番茄果实中提取高质量的RNA是对调控番茄果实品质、生长发育和代谢等相关基因进行分子生物学研究的基础。实验表明,已报道的相关RNA的提取方法,即使利用已经报道的从其它果实中成功提取出高质量RNA的方法,也不能从番茄果实中分离出高质量的RNA。
这主要是由于番茄果实中多糖、多酚类物质及其他次生代谢,在RNA提取过程中与RNA共同沉淀,从而影响RNA的产量和质量。目前,商业化的RNA抽提试剂盒无法直接用于番茄果实RNA的提取。笔者采用4种方法对番茄果实总RNA进行提取,筛选出一种最佳的改进方法。可以从不同时期番茄果实中成功提取高质量的RNA,产量可达401.6--840.2μg/g,通过测定A260/A230和A260/A280 的比值表明,该方法排除了番茄果实中蛋白、多糖、以及多酚等次生物质的干扰,提取到了高质量番茄果实总RNA;1.2%琼脂糖电泳结果表明RNA在整个提取过程中结构完整,未发生明显降解;所提取的RNA用于cDNA-AFLP等到了清晰的表达图谱,这表明其质量完全可满足下一步分子生物学研究。 相似文献
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以红富士苹果为试材,从颜色、硬度、可滴定酸、可溶性固形物含量、维生素C含量、质量损失率以及感官评定等方面研究不同含量的银杏叶提取液浸泡处理对鲜切红富士苹果的保鲜效果。结果表明,在4 ℃贮藏条件下,与对照(无菌蒸馏水浸泡处理)相比,银杏叶提取液处理能在一定程度上提高鲜切苹果的感官品质,抑制褐变,减少水分散失,延缓硬度下降,维持可溶性固形物、可滴定酸及维生素C等营养物质的含量,较好地保持鲜切苹果的品质,其中总黄酮含量为0.5 g/L的银杏叶提取液处理保鲜效果最佳。 相似文献
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‘秦冠’和‘富士’质地差异的解剖学观察及相关酶活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以质地品质差异明显的2个苹果品种‘富士’和‘秦冠’为试材,观察发育过程中果肉细胞显微结构,测定果实的脆度和硬度及细胞壁相关代谢酶和淀粉酶(AM)的活性,并进行相关性分析,找出导致这2个品种质地差异的关键因素。结果表明:1花后85d前,2个品种的果肉细胞大小相似,而在花后85d时,‘富士’果肉细胞明显增大,显著大于‘秦冠’果肉细胞,并且在花后115d时细胞又一次显著增大。而‘秦冠’果肉细胞仅在花后100d时显著增大,此后增长不显著。2在果实发育过程中,‘秦冠’和‘富士’的果实硬度和脆度均逐渐降低。‘富士’果实的脆度一直较‘秦冠’高。花后100d前‘富士’果实的硬度高于‘秦冠’,而花后115d至果实成熟期间均显著低于‘秦冠’。3花后115d以后‘秦冠’的果胶甲酯酶(PME)活性明显高于‘富士’,而‘富士’的β-半乳糖苷酶(β-Gal)活性明显高于‘秦冠’。相关性分析表明,多聚半乳糖醛酸酶(PG)和PME活性与‘秦冠’的质地呈显著负相关,而β-Gal活性与‘富士’的质地呈显著负相关。可见,随着果实生长发育,‘秦冠’和‘富士’质地品质的差异除表现在果肉细胞显微结构上外,还与一些代谢酶密切相关,PG和PME是‘秦冠’果实质地变化的关键酶,而β-Gal在‘富士’质地变化中发挥关键作用。 相似文献
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‘奥德’是从野生酸樱桃中经实生选种选育出的新品种。单果质量5.5 g,总糖为10.36%,总酸度为1.45%,可溶性蛋白质1.40%,果实出汁率达到85.2%。矮化,抗旱、耐盐碱、抗裂果、抗病虫性强,固地性强,已在陕西、甘肃、山西、河南、山东等地栽培。 相似文献
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旨在探究生长期叶面喷施钙、硅和钙+硅对‘瑞阳’苹果果实品质、总钙含量、钙组分含量和组成比例的影响,为生产上科学补钙,改善‘瑞阳’苹果果实品质提供科学依据。以5 a生‘瑞阳’为试验材料,分别喷施清水、氯化钙、硝酸钙、糖醇钙、硅、氯化钙+硅、硝酸钙+硅、糖醇钙+硅,在幼果期每隔15 d喷施1次,共喷2次;在果实膨大期每隔20 d喷施1次,共喷2次;在果实成熟期喷施1次;生长期共计喷施5次。于花后120 d采样,测定果实单果质量、横纵径、果实硬度、可溶性固形物、可滴定酸、果皮色泽等果实品质指标,以及果实总钙含量和不同钙组分含量和所占比例。结果表明,钙、硅和钙+硅处理均可以提高果实总钙含量,且钙+硅处理的效果优于钙或硅处理,其中糖醇钙+硅处理的总钙含量最高。各处理均能提高果实中的水溶性钙、果胶酸钙以及草酸钙含量和比例,降低磷酸钙的含量和比例。果实中总钙与钙组分中水溶性钙、果胶酸钙和草酸钙含量呈正相关,且它们均与磷酸钙在含量呈负相关。在提升果实品质方面,糖醇钙+硅的处理效果最好,与对照相比,在单果质量、硬度、可溶性固形物、固酸比和a*均显著提高4.73%、20.29%、13... 相似文献
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为了研究长期干旱条件下Mdm-miR160-MdARF17-MdHYL1 调控网络在苹果生长发育中的作用,以GL-3和Mdm-miR160e OE、MdARF17 RNAi、MdmARF17 OE、 MdHYL1 OE及MdHYL 1 RNAi转基因苹果为试验材料,进行为期3个月的长期干旱处理,测定苹果株高、根干质量、根冠比以及叶片净光合速率、胞间CO2浓度、气孔导度、蒸腾速率、叶绿素荧光值和水分利用效率。结果表明,在长期干旱胁迫下, Mdm-miR160e OE转基因苹果植株更矮化,根冠比、根干质量、光合能力及水分利用效率大于GL-3植株,具有更强的耐旱性; MdARF17 RNAi植株比GL-3更矮,且具有更大的根冠比、根干质量、光合能力和水分利用效率,而MdARF17 OE与之相反; MdHYL1 RNAi植株对长期干旱胁迫更敏感,其株高大于野生型且具有更小的根冠比、更低的光合能力和水分利用效率,而 MdHYL1 OE植物对长期干旱条件具有更强的适应性,生长发育表型与RNAi植株相反。综上所述,Mdm-miR160- MdARF17-MdHYL1调控网络在苹果响应长期干旱过程中发挥了重要功能,为苹果抗旱分子育种提供了候选基因。 相似文献