蚯蚓纤溶酶基因番茄表达载体的构建

为研究蚯蚓纤溶酶的番茄表达,构建EFE基因的番茄表达载体pF和pEF,并导入农杆菌。采用PCR法在EFE基因DNA序列上添加了表达调控元件和酶切位点后,得到新EFE基因片段,将该片段与切去GUS基因的pBI121载体相连,以构建CaMV35S驱动的EFE组成型表达载体pF;用PCR克隆得到的E8启动子片段替换pF上的35S启动子,以构建番茄成熟果实特异性表达载体pEF;最后,采用三亲交配法用重组质粒转化根癌农杆菌EHA105;结果表明:经过酶切、PCR和测序鉴定,EFE基因、E8启动子序列已重组到表达载体上,植物表达载体构建正确,并且已经转化进农杆菌EHA105中。     

平菇和香菇降解秸秆的培养研究

以P-1（平菇）和L-1（香菇）为供试菌株,经正交试验分析确定培养的最佳酶活条件为：26℃,含水量55%,菌量（P-1/L-1）3∶1,含氮量2.0%。经测定,共同培养时粗蛋白含量提高34.55%,粗脂肪含量提高3.24%,粗纤维含量降低17.30%。将2株菌分别培养进行比较发现,菌没有颉颃,2株菌共同培养制备秸秆饲料最佳。     

核桃内生细菌HT-6对致病疫霉的持续抑制作用及其抑菌特性研究

为进一步了解核桃内生细菌HT-6菌株在防治马铃薯晚疫病中的利用潜力,采取延长对峙培养时间以及致病疫霉预先培养后再接种HT-6的方法,对其抑菌特性及持续抑菌能力进行了评价。结果显示,延长对峙培养时间到第15天时,致病疫霉菌落半径为11.0 mm,与对照(40.0 mm)仍有极显著差异;以可溶性淀粉和葡萄糖代替黑麦培养基中的蔗糖,对于抑菌作用无明显影响;HT-6菌液浓度与抑菌效果关系密切,最适浓度分别为OD值1.088和1.928的菌液,其抑菌率分别为95.33%和91.78%,且随OD值升高其抑菌率降低;预先培养致病疫霉10 d后再接种HT-6菌液继续对峙培养21 d,仍可强效抑制致病疫霉生长;镜检发现受抑制的致病疫霉孢子囊数量显著低于对照,菌丝体和孢子囊的畸形率显著高于对照。     

玉蕈深层培养研究的初探

根据玉蕈深层培养适宜条件分析发酵过程中pH、溶氧量、菌丝鲜重及还原糖含量的变化确定,48h前为其调整期,48-144h处于增殖生长期;发酵培养144h,生物量达25．0mg／100mL,还原榭含量为9．0mg／mL。     

茯苓液体培养条件研究及其营养浓缩液的相关检测

研究表明，液体培养条件下，茯苓经0～48h的适应期，48～144h的增殖期后进入稳定期，发酵液pH骤降。经检测，发酵液中含有包括十六烷酸和十八烷酸在内的有机酸；发酵罐培养120h，生物量≥30g/l00mL(鲜重)。茯苓营养浓缩液多糖含量≥5．0mg/mL，氨基酸含量≥480mg/100mL。动物实验证明，茯苓营养浓缩液具有显著的抗疲劳和提高机体免疫力作用，其重金属和微生物指标均符合国家标准。     

LINC24065在体细胞核移植牛中的异常表达

旨在揭示DLK1-DIO3印记域上一个新的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)LINC24065在自然繁殖牛(natural reproduction,NR)与体细胞核移植牛(somatic cell nuclear transfer,SCNT)中的组织表达与印记状态,对进一步了解DLK1-DIO3印记域在供体核重编程中的作用提供一定的理论基础。本研究以自然繁殖牛的大脑组织为试验材料,利用RACE和RT-PCR技术,在牛的DLK1-DIO3印记域内鉴定了一个新的印记的lncRNA基因,命名为LINC24065。用基于SNP(single nucleotide polymopisms)的RT-PCR产物直接测序方法分析LINC24065在自然繁殖牛和体细胞核移植牛组织中的表达及印记状态。序列分析发现,LINC24065编码6个可变剪接体,并在自然繁殖牛被检测的7个组织中都表达,而在体细胞核移植牛组织中没有检测到可变剪接体LINC24065-V3,且其它5个剪接体呈现组织特异性表达。印记状态分析发现,LINC24065在自然繁殖牛和体细胞核移植牛的7个组织中均为单等位基因表达,但在体细胞核移植牛的大脑组织中出现了与其他组织亲本来源不同的单等位基因表达。研究结果说明,LINC24065基因在体细胞核移植牛的大脑中出现了印记紊乱,并且剪接体在组织中的表达也发生了改变。以上研究结果说明LINC24065基因与体细胞核移植牛的发育异常有关。     

草地利用和管理方式对地木耳生物量的影响

地木耳(Nostoc commune)是一种固氮蓝藻,其固氮活性是可逆的,在天然草地氮素循环中起着非常重要的作用。本研究分析了放牧、刈割、烧荒以及围封对地木耳生长动态的影响,以期为合理利用和管理天然草地提供理论依据。结果表明,围栏封育样地地木耳的生物量最高,适度放牧和刈割样地次之,重度放牧显著抑制了地木耳生长,其总生物量仅相当于围栏封育的11.2%～35.1%;烧荒处理当年地木耳生长受到抑制,但随着凋落物的积累,其生长量逐渐增加;地木耳生物量与凋落物、立枯物的量呈显著正相关（P<0.05）,凋落物和立枯物的量是影响地木耳生长的主要因素。因此,适度放牧和围栏封育有利于草地固氮蓝藻--地木耳的生长和增加草地氮素供应。     

利用香菇菌糠栽培罗勒初探

以香菇菌糠为试材,采用不同比例的香菇菌糠和花园土、砂土的混合基质种植罗勒,测定其发芽率、形态指标以及生理指标,研究了香菇菌糠对罗勒幼苗生长的影响。结果表明:适宜种植罗勒的菌糠配方为花园土、菌糠、砂子=6∶1∶1;不同比例的菌糠配方对罗勒的发芽率有一定影响,随着菌糠比例的不断增加,罗勒的发芽率也不断提高,发芽时间也随菌糠的增加有一定缩短;该试验为菌糠的循环利用开辟了一条新的途径。     

中草药对鲫鱼诱食作用的初步研究

根据中草药药理设计制成6种复合试剂，以鲫鱼为对象进行诱食活性试验，用cne-way ANOVA检验统计分析。6种中草药复合试剂对鲫鱼都有极显著的诱食效果。诱食效果不但显著，而且持续时间长。     

白灵菇原生质体制备及再生的研究

研究了酶解时间、酶解温度、菌龄和渗透压稳定剂对白灵菇原生质体制备与再生的影响。结果表明,自灵菇用1％蜗牛酶与1％纤维素酶的混合酶液制备原生质体,酶解时间应控制在3h之内,以2h为最宜;酶解温度28℃左右;适宜菌龄为5目龄;以0．6mol／L蔗糖配制酶解液和作为制备与再生渗稳剂均最优,再生率最高,可达2．1％,比以甘露醇作为渗稳剂再生率提高近3倍。