啶虫脒在桃上的残留消解规律与膳食风险评估

啶虫脒在桃上的检出率高且未登记,缺少安全间隔期、用药间隔期等信息可能会导致盲目用药,增加残留风险.为明确桃果上啶虫脒的残留风险,本文通过消解试验以及模拟农户施药对其残留消解规律进行了分析,并于2015-2018年对中国9大主产区桃中的啶虫脒残留进行了调查与膳食摄入风险分析.结果表明:啶虫脒在桃果皮与果肉上的消解符合一级...     

噬菌体和枯草芽孢杆菌联用对蛋鸡生产性能、蛋品质、卵巢及输卵管的影响

试验旨在研究产气荚膜梭菌噬菌体、沙门氏菌噬菌体及枯草芽孢杆菌联用对蛋鸡生产性能、蛋品质、卵巢及输卵管的影响。试验选取126只260日龄海兰褐蛋鸡，随机分成6组，每组3个重复，每个重复7只。对照组饮用清水，SD72噬菌体组、SD72噬菌体+枯草芽孢杆菌组、JDF1-6噬菌体组、SD72/JDF1-6噬菌体+枯草芽孢杆菌组和SD72噬菌体+抗生素组（0.007 5%金霉素、0.000 4%杆菌肽），分别在不同饮水器中按体积比为1∶100在饮水中添加1010PFU/mL噬菌体原液、1010PFU/mL枯草芽孢杆菌及抗生素，试验期42 d，记录采食量、平均日增重、产蛋量，分析蛋品质、卵巢及输卵管组织变化。结果显示：与对照组相比，饮水1～42 d后SD72噬菌体组、SD72噬菌体+枯草芽孢杆菌组、SD72/JDF1-6噬菌体+枯草芽孢杆菌组蛋鸡产蛋率显著提高（P<0.05），料蛋比显著降低（P<0.05）；饮水29～42 d后，SD72噬菌体组、SD72噬菌体+枯草芽孢杆菌组、SD72/JDF1-6噬菌体+枯草芽孢杆菌组蛋壳重、哈氏单位显著提高（P<0.05）;42 d饲喂周期...     

一种水溶性佐剂CS-GTA-ML对H7N9亚型禽流感灭活疫苗免疫效果评价

旨在合成一种直接溶解在生理缓冲溶剂中、可注射的功能化修饰的壳聚糖衍生物作为兽用佐剂，用于替代铝盐佐剂。壳聚糖中的氨基与环氧丙基三甲基氯化铵(GTA)中的环氧基团发生加成开环反应，偶联成CS-GTA中间体；再与4-(2-氯乙基)吗啉(ML)发生氮烷基化反应生成终产物CS-GTA-ML。产物通过FI-IR、¹H NMR、Zeta电位等表征手段检测其结构及重要成分的嫁接率；通过溶血试验、细胞活性计数(CCK-8)和组织病理分析(HE)方法评估了CS-GTA-ML的生物安全性，为注射剂型的使用提供了安全保障；配伍H7N9亚型流感灭活病毒，对雌性ICR小鼠和SPF鸡进行皮下免疫，测定对其血凝抑制(HI)效价，并通过流式分析仪初步探索脾淋巴细胞活化能力。结果显示，作为抗原递送系统，CS-GTA-ML在不同pH值的水溶液中均可溶解，其中GTA和ML的嫁接率分别约为53%,15%,且带有15.8 mV的正电荷。当质量浓度在1 g/L以下时，体外脾细胞存活率在88%以上，且对机体重要组成器官无损伤；当质量浓度高达10 g/L时，体外红细胞溶血率仅0.5%左右，具有良好的生物相容性。...     

刀豆蛋白A纯化猪流行性腹泻病毒的研究

为开发一种新型高效、低成本的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)抗原纯化方法，本研究尝试了一种基于凝集素(刀豆蛋白A，Con A)的PEDV浓缩纯化方法。通过Con A与PEDV病毒粒子的特异性结合，形成Con A-PEDV复合物，然后通过低速离心和竞争性解离即可实现病毒纯化。结果表明:1)当Con A的使用浓度为80 μg/mL，室温作用2 h，4 000 r/min离心15 min时，纯化效果较佳；2)利用Tris-HCl缓冲液(pH 7，0.01 mol/L，内含200 mmol/L甲基-α-D-吡喃甘露糖苷和50 mmol/L NaCl)进行解离时，较PBS缓冲液有更高的解离效率；3)该方法病毒回收率大约为80%，总蛋白去除率可达90%。综上，本研究利用Con A纯化PEDV是可行的，为高质量PEDV灭活疫苗的研发奠定基础。     

5%百里香酚水乳剂配方的筛选

采用转相法,对乳化剂、防冻剂和增稠剂等进行了筛选,确定了5%百里香酚水乳剂的最优配方:百里香酚质量分数为5%,溶剂乙醇质量分数为15%,乳化剂SC-102质量分数为6%,防冻剂丙二醇质量分数为1%;增稠剂琼脂的质量分数为0.2%,助表面活性剂正丁醇和水溶性氮酮的质量分数分别为1%和2%,用双蒸水补足至100%。用上述配方所制备的5%百里香酚水乳剂各项指标合格,并且经常温、冷贮(0±2)℃14 d、热贮(54±2)℃14 d未出现析油、析水、分层现象,所制备的制剂黏度小、倾倒性佳,利于分装。     

大肠杆菌O8、O9和O89血清型三重PCR检测方法的建立

为建立一种快速鉴定O8、O9和O89血清型大肠杆菌的三重PCR方法，根据GenBank登录的3种血清型大肠杆菌O抗原合成基因簇序列，设计3对检测引物，通过优化反应条件建立三重PCR方法。结果：经条件优化后的三重PCR方法可有效鉴别O8、O9和O89血清型的大肠杆菌，具有良好的特异性，对其他肉羊养殖场常见血清型的大肠杆菌和致病菌无特异扩增条带；敏感性检测显示，三重PCR方法对O8和O89血清型的最小检出量为10 pg/μL,对O9血清型的最小检出量为100 pg/μL;采用该方法对临床分离的大肠杆菌进行检测，结果与传统血清凝集方法一致。综上，本研究建立的三重PCR方法可快速、准确、特异地对O8、O9和O89血清型大肠杆菌进行检测，为养殖及肉品加工环节大肠杆菌的流行病学研究提供了更加快捷的检测手段。     

伪狂犬病毒在BHK-21悬浮细胞中的增殖特性

为考察BHK-21悬浮细胞增殖伪狂犬病毒（Pseudorabies virus, PRV）工艺参数及病毒增殖过程中代谢动力学，将PRV接种于BHK-21悬浮细胞，考察接毒时细胞密度、病毒感染复数（MOI）及收毒时间对病毒效价的影响，测定培养过程中葡萄糖（Gluc）、乳酸（Lac）和谷氨酰胺（Gln）浓度，计算病毒增殖过程中各参数代谢速率。结果显示，将MOI为0.01的PRV病毒接种BHK-21悬浮细胞，其病毒滴度在42 h达最高8.5 lgTCID₅₀/mL。代谢参数检测结果表明，BHK-21细胞在接毒36 h后细胞开始出现死亡。PRV在BHK-21悬浮细胞中的增殖特性为伪狂犬病毒的规模化培养及疫苗开发提供了技术基础。     

猪初乳中PEDV IgA抗体捕获ELISA检测方法的建立及其初步应用

为建立评价猪流行性腹泻病毒(PEDV)疫苗免疫效力的方法，本研究利用纯化的PEDV免疫BALB/c小鼠，按照常规方法制备PEDV全病毒单克隆抗体(MAb)作为捕获抗体，PEDV细胞培养上清为夹心抗原，HRP标记的羊抗猪IgA为二抗，采用棋盘滴定法对各反应条件优化后建立了用于猪初乳中PEDV IgA检测的捕获ELISA方法，并确定其临界值为0.25。采用该捕获ELISA对PEDV、PCV2b、PRRSV、PRV、JEV、PPV、FMDV与CSFV IgA抗体阳性猪初乳进行检测，结果显示，除PEDV IgA抗体阳性猪初乳检测结果为阳性外，其他病毒抗体阳性猪初乳检测结果均为阴性，表明该方法特异性强。采用该方法和BIONOTE PEDV IgA试剂盒对从1∶10开始2倍倍比稀释的16个稀释度的阳性猪初乳样品检测，结果显示该方法对阳性样品检测的最大稀释度为1∶40 960，是BIONOTE PEDV IgA试剂盒敏感性的16倍(1∶2 560)，表明本研究建立方法的敏感性高。分别采用同一批次和不同批次制备的MAb包被的ELISA板分别检测5份PEDV IgA抗体阳性和1份PEDV IgA抗体阴性...     

代森锌及其代谢物乙撑硫脲在食用百合上的残留行为与膳食风险评估

目前代森锌在百合上尚未登记，缺少安全间隔期等相关信息，可能会导致生产中超范围盲目用药。为明确代森锌在百合上的残留风险，通过田间消解和最终残留试验，研究了代森锌在食用百合上的残留特征并对其膳食风险进行了评估。结果表明:代森锌在百合中的消解动态符合一级反应动力学模型，其消解半衰期在江苏试验点为5.9 d，湖南试验点为3.8 d。采用65%代森锌可湿性粉剂，按最高推荐剂量 (有效成分3000 g/hm2) 及其1.5 倍剂量 (有效成分4500 g/hm2)，在江苏、湖南、湖北和四川4地的百合上施用，距末次施药后7、14和21 d，4地的最高残留值 (以CS₂计)鲜百合中为0.260 mg/kg，干百合中为1.290 mg/kg，均低于我国制定的鲜百合 ( 0.5 mg/kg )和干百合 ( 2 mg/kg )中代森锌的最大残留限量 (MRL)值。代森锌极易降解为乙撑硫脲 (ETU)，而ETU在鲜百合样品中有检出，因此对百合中代森锌及其代谢物ETU的膳食摄入风险进行了评估，结果显示:代森锌及ETU在鲜百合和干百合中的慢性膳食摄入风险占每日允许摄入量 (ADI)的比值分别为0.014%和 < 0.014%，总体对膳食风险的贡献较小。研究表明，按照推荐剂量规范使用，代森锌在百合中的残留量一般不会对我国人群的健康产生不可接受的影响。