多重PCR技术在食品微生物检测中的应用进展

聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）技术在微生物检测中具有快速、灵敏、操作简单等优点,而多重PCR检测还可以同时扩增多个目的基因,对高效快速检测具有重要意义,已经成为近几年来的研究热点。作者对近来多重PCR技术在食品病原微生物、食品非致病微生物及相关环境食品微生物中应用的研究现状,以及未来在食品检测中的应用展望进行了综述。     

中药复方在鸡胚水平上抗鸡新城疫病毒的作用研究

本试验以中药百花蛇舌草、金银花等清热解毒药为主药,辅以黄芪、甘草等补气药组成中药复方,以水萃取浓缩制备中药复方流浸膏。以鸡新城疫病毒（NDV）为模式病毒,在鸡胚水平上以鸡胚平均死亡时间（MDT）和鸡胚尿囊液血凝价作为检测指标。结果表明,中药复方流浸膏与NDV感作和不感作均对NDV有明显的抑制作用,延长鸡胚死亡时间,降低血凝价,为临床用药提供了试验依据。     

大肠杆菌铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与序列测定

试验以E.coliMG1655的基因组DNA为模板,通过PCR技术扩增sodC基因,PCR产物经纯化回收后克隆至pMD18-T载体中,转化E.coliDH5α感受态细胞,筛选阳性克隆,提取质粒进行SacI和KpnI酶切及PCR扩增鉴定,并对sodC基因片段进行序列测定。试验成功克隆了sodC基因,获得的基因与报道的sodC基因序列同源性达到99.6%,为进一步构建重组表达载体奠定了基础。     

狼连涂擦剂急性毒性试验及微核试验

为检测狼连涂擦剂（以狼毒为君药,连翘为臣药的主方）的毒理学安全性,对试验小鼠进行半数致死量试验及微核试验。结果狼连涂擦剂LD50为3253.87 mg/kg,在小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验中未发现该药物对小鼠有遗传毒性,表明狼连涂擦剂的安全性良好。     

青稞B-hordein基因对小麦面粉加工特性的影响

B组醇溶蛋白是大麦的主要贮藏蛋白之一,其组成及含量与大麦的营养品质和加工品质密切相关。为探究大麦B组醇溶蛋白对小麦面粉加工特性的影响,以转青稞B-hordein基因的小麦转基因高代株系(T4、T5代)及其受体品种龙麦30为材料,分别对转B-hordein基因小麦高代株系及龙麦30进行分子检测、农艺性状测量、近红外分析和粉质分析。结果表明,转B-hordein基因小麦高代植株均为阳性植株;在农艺性状方面,转B-hordein基因小麦与龙麦30无显著差异;在品质方面,转B-hordein基因小麦的蛋白质含量、湿面筋含量的平均值均极显著高于龙麦30;粉质分析结果也表明转B-hordein基因小麦的粉质参数优于龙麦30。由此推测,B-hordein基因的成功转化能够改善小麦的面粉加工特性。     

丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌双重PCR方法的建立及应用

本研究旨在建立丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,从而为临床上同时检测这2类病原的感染提供一种更方便、快捷、准确的工具。本研究采用2对特异性检测丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的引物,对PCR反应体系和反应条件进行了优化,并对双重PCR的特异性及敏感性进行了评价,随后采用该方法对52份临床样本进行了检测。结果显示,所建立的双重PCR方法能同时扩增丝状支原体簇成员和多杀性巴氏杆菌的DNA,而对来源于其他常见病原的DNA均无扩增;对丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌的最低检测限分别为24.8和28.9 pg;能成功地从临床样本中检测丝状支原体簇成员和多杀性巴氏杆菌。结果表明,本研究所建立的双重PCR方法具有很好的特异性和敏感性,为临床丝状支原体簇和多杀性巴氏杆菌感染的快速诊断、病原鉴定及流行病学调查提供了有效的方法。     

生物降解膜在烤烟地膜覆盖栽培中的应用

为减少烤烟地膜覆盖栽培造成的“白色污染”和揭膜用工成本,采用田间随机区组试验研究生物降解膜对烤烟产质量的影响,测定生物降解膜在田间降解过程。试验结果表明：覆盖地膜能促进烟株快速还苗,有利于提高和改善烟叶产质量。在垄体保温、增温效果上,生物降解地膜与普通地膜无显著差异,均能缩短烤烟还苗期。覆盖生物降解膜比不覆盖地膜上中等烟提高5.82个百分点,每公顷产量增加32.85 kg,产值增加813.75元,与普通膜覆盖相比,上中等烟比例、产量略低但无显著差异,烟叶身份和色度略差,生物降解膜在烟株进入团棵期开始裂解,烟地翻犁前基本降解完成。因此,生物降解膜可在烤烟地膜覆盖中应用,但降解时间与烟叶生育期不完全同步,应进一步改进其降解性能。     

微生物菌剂对烤烟根际土壤脲酶和过氧化氢酶活性的影响

旨在为微生物菌剂在烟草生产上的应用提供参考。以‘云烟85’和‘红花大金元’为供试材料,采用育苗基质添加微生物菌剂的试验方法,研究了微生物菌剂对烤烟根际土壤脲酶和过氧化氢酶活性的影响。胶质芽孢杆菌促进‘云烟85’根际土壤脲酶活性较佳,EM菌剂或胶质芽孢杆菌提高‘红花大金元’根际土壤脲酶活性显著;EM菌剂和胶质芽孢杆菌剂混合处理提高根际土壤过氧化氢酶活性显著,在旺长期和成熟期提高了10.31%和50.26%;与对照相比,添加微生物菌剂,显著降低了‘红花大金元’烤烟根际土壤过氧化氢酶活性。胶质芽孢杆菌剂促进‘云烟85’和‘红花大金元’根际土壤脲酶活性,EM菌和胶质芽孢杆菌混合菌剂对提高云烟85根际土壤过氧化氢酶活性效果显著。     

微生物发酵菌液对断奶仔猪生长性能和肠道健康的影响

本试验旨在研究微生物发酵菌液对断奶仔猪生长性能和肠道健康的影响。根据前期试验结果确定微生物发酵菌液的最适添加水平为1%。试验选用日龄相同,初始体重为（8.03±0.43）kg的生长状况良好的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪32头,随机分成A、B、C、D四个处理组,每组2个重复,每个重复4头猪。A组为对照组（基础日粮）,B组为基础日粮+1%微生物发酵菌液,C组为基础日粮+1%微生物发酵菌液+100 mg/kg土霉素钙,D组为基础日粮+100 mg/kg土霉素钙,试验期间猪只自由采食和饮水,试验期28 d。试验结果显示：（1）各处理间平均日采食量（ADFI）差异不显著（P> 0.05）;与对照组（A组）和抗生素组（D组）相比,添加微生物发酵菌液（B组）或添加微生物发酵菌液+抗生素（C组）显著提高了断奶仔猪的平均日增重（ADG）(P <0.05),且分别比对照组提高了16.43%和14.65%;B组和C组料重比显著降低（FCR）(P <0.05),分别降低了16.58%和16.06%。（2）与对照组（A组）相比,日粮添加微生物发酵菌液或抗生素（B、C、D组）可显著降低断奶仔猪...