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121.
非洲猪瘟病毒实时荧光定量PCR检测技术的研究与评价 总被引:1,自引:0,他引:1
根据非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)K205R基因序列设计合成引物及TaqMan探针,通过优化引物浓度、退火温度和Mg2+浓度,建立基于K205R基因的ASFV实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)检测方法。对在猪肝脏组织DNA中掺入重组质粒制备的模拟样品进行扩增来确定所建方法的实际检测效率,并将OIE推荐的基于p72的qPCR调整后作为评价该方法检测效果的对照。试验结果表明,基于K205R基因的检测方法在检测模拟样品时扩增效率要优于基于p72的方法,而且敏感性和特异性强,适用于非洲猪瘟的快速检测、监测。 相似文献
122.
转人溶菌酶基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境检测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)设计奶牛内源性基因引物,根据外源基因人溶菌酶基因(human lysozyme,hLY)及标记基因新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。结果表明,建立的方法灵敏、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。 相似文献
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124.
125.
棉花曲叶病毒研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
棉花曲叶病毒(Cotton leaf curl virus,CLCuV)是我国的进境检疫性有害生物,严重危害棉花生长,在巴基斯坦和印度的棉花产区已造成毁灭性灾害。该病毒主要由烟粉虱传播,寄主范围广泛。2006年在广东首次发现棉花曲叶病毒(CLCuV)入侵我国危害朱槿,2010年有报道证实CLCuV已侵染广西南宁试验田的棉花。我国是棉花生产大国,该病毒一旦扩散传播到棉花主产区,后果将不堪设想。本文对CLCuV的变异、国内外分布和流行趋势、影响棉花曲叶病流行的因素、病毒对棉花的品质和产量的影响及病害治理等方面进行综述,并探讨了棉花曲叶病毒研究存在的问题及有效防止该病毒传播和扩散的措施。 相似文献
126.
127.
为建立番茄黑环病毒(Tomato black ring virus,TBRV)的液相芯片检测技术,对GenBank中的TBRV核苷酸序列进行分析,设计其特异性探针并用生物素标记。探针偶联荧光编码微球后与TBRV的RT-PCR产物进行杂交,用液相芯片检测仪检测荧光信号。结果表明:建立的方法具有良好的特异性,能够有效区分侵染马铃薯的TBRV、马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)、马铃薯A病毒(PVA)及番茄斑萎病毒(TSWV);检测灵敏度约为1pg/μL总RNA,与常规RT-PCR灵敏度相当。实际样品检测结果表明该方法可用于TBRV的日常检测。 相似文献
128.
129.
黄瓜绿斑驳花叶病毒研究进展 总被引:8,自引:0,他引:8
黄瓜绿斑驳花叶病毒是葫芦科上的重要病毒之一,给葫芦科作物的生产造成严重威胁。目前,国内学者对该病毒研究不多,但该病毒因其潜在的经济影响,在国外已受到高度重视,并且在进口的种子中已有截获,为促进对该病毒进行更深入的研究,对其病原生物学、分子生物学及检测防治方面的研究结果进行了综述。 相似文献
130.
为同时检测复杂基质中(由猪粪和蘑菇渣混合而成的堆肥原料)3种四环素类抗生素(四环素TC、土霉素OTC和金霉素CTC)及其代谢产物,建立了超高效液相色谱串联质谱检测方法(UPLC—MS/MS)。该方法同时采用pH值=4的Na2EDTA-Mellvaine缓冲溶液和乙腈为提取溶液,经过固相萃取净化后,以乙腈和0.1%的甲酸水溶液为流动相,采用超高效液相色谱柱进行分离,在电喷雾正离子模式下,用四极杆串联质谱仪进行定性和定量分析。3种四环素类抗生素及其代谢产物均在7min内完成分离,总共分析时间为12min。在0-6mg·kg^-1DW(Dryweight)浓度范围内,3种四环素类抗生素及其代谢产物的标准曲线线性良好,线性相关系数R2均大于0.9960,重现l生也较好(n=11,相对标准偏差均小于15%)。在3个加标水平0.2mg·kg^-1DW、1mg·kg^-1DW和4mg·kg^-1DW下,TC、OTC、CTC的回收率分别为71%-89%、66%~94%和66%~84%;去甲基金霉素(DMCTC)的回收率为52%-64%;差向异构产物的回收率在32%~51%之间;脱水产物以及差向脱水产物的回收率均低于30%。3种四环素类抗生素及其代谢产物的检出限和定量限分别在1.668~17.270μg·kg^-1和5.561—45.918μg·kg^-1范围内,表明该方法具有较高的灵敏度。对北京市某露天堆肥场中的样品进行测定发现,TC、OTC、CTC的浓度分别为0.4、1.6、2.9mg·kg^-1,检测到的代谢产物主要为相应的差向异构体,其中差向金霉素(ECTC)的浓度最高,达到2.7mg·kg^-1,和母体的含量水平比较接近,其他代谢产物也有不同程度的检出。 相似文献