Wnt5a介导Wnt/Ca2+通路对BCG诱导牛原代肺泡上皮细胞自噬的调控作用

旨在探讨体外分离培养牛肺泡上皮细胞（bovine alveolar epithelial cells,BAECs）的方法及Wnt5a对牛结核分枝杆菌卡介苗（bacille Calmette-Guérin,BCG）感染BAECs细胞自噬的调控机制。试验选用酶联合消化法和机械刮刷法分离细胞,差速贴壁法纯化BAECs,免疫荧光染色检测上皮细胞标志物角蛋白14（cytokeratin 14,CK14）和角蛋白5（cytokeratin 5,CK5）的表达;BCG感染BAECs,并用Box-5抑制Wnt5a的表达,Western blot和免疫荧光染色检测自噬相关蛋白及非经典Wnt信号通路相关蛋白的表达。结果表明,采用酶联合消化法和机械刮刷法能够成功分离纯度较高的BAECs,细胞经CK14和CK5鉴定为阳性;BCG感染BAECs促进Wnt5a表达,增加细胞自噬,Box-5预处理下调BCG诱导的细胞自噬相关蛋白LC3II、P62、Atg7及Atg5的表达,且抑制非经典Wnt/Ca²⁺信号通路相关蛋白Wnt5a、CaMKII及NFAT的表达。综上,试验成功建立BAECs分离培养方法,BCG感染增加BAECs内Wnt5a表达和细胞自噬,抑制Wnt5a下调BCG诱导的BAECs细胞自噬,且Wnt5a是通过非经典Wnt/Ca²⁺信号通路调控BCG诱导的BAECs细胞自噬。     

猫下泌尿道综合征

猫下泌尿道综合征（FLUTD）是猫最常见的疾病之一,因其发病率高、病因复杂、确诊困难、治疗后易复发等特点,逐渐成为猫科疾病的研究热点。FLUTD包括多种疾病类型,精准治疗、合理预防已成为科学防控该疾病的关键。本文从FLUTD的分类、流行病学及风险因子、发病机制、临床症状、诊断和防治对该综合征进行综述,以推动猫下泌尿道综合征的深入研究及临床诊疗的发展。     

努比亚山羊LMCD1基因生物信息学分析、真核表达载体的构建及表达

【目的】 扩增努比亚山羊LIM结构域基因1（LIM domain gene 1,LMCD1）并进行生物信息学分析,构建真核表达载体并检测LMCD1基因的表达情况,为研究努比亚山羊LMCD1基因功能及探究LMCD1基因在山羊骨骼肌肉发育中的作用提供依据。【方法】 从努比亚山羊背最长肌组织中提取总RNA,应用RT-PCR方法扩增LMCD1基因CDS区序列,并进行生物信息学分析;将LMCD1基因以同源重组的方式连接pEGFP-N1载体,经酶切、测序鉴定后重组阳性质粒命名为pEGFP-N1-LMCD1;将pEGFP-N1-LMCD1重组质粒转染至山羊骨骼肌卫星细胞,通过实时荧光定量PCR检测努比亚山羊LMCD1基因的表达情况。【结果】 努比亚山羊LMCD1基因CDS区序列全长1 092 bp,编码363个氨基酸。LMCD1蛋白分子式为C₁₇₇₅H₂₈₁₈N₅₀₈O₅₃₃S₂₉,分子质量为40.73 ku。努比亚山羊LMCD1基因CDS区序列与山羊相似性最高（99.8%）,与斑马鱼相似性最低（55.4%）,与其他物种的相似性在87.0%~98.8%之间。LMCD1蛋白无信号肽,不存在跨膜结构域,为亲水性蛋白。通过构建努比亚山羊pEGFP-N1-LMCD1真核表达载体并转染至骨骼肌卫星细胞,过表达LMCD1基因,产生绿色荧光信号。【结论】 试验成功扩增LMCD1基因CDS区序列,构建了pEGFP-N1-LMCD1真核表达载体,并分析了生物学功能,为后续开展LMCD1基因在山羊骨骼肌肉发育中的机制研究提供了理论基础。     

猪圆环病毒Ⅱ型体外诱导3D4/2细胞炎症模型的建立

【目的】通过对猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）体外感染3D4/2细胞浓度、时间与细胞炎症水平进行探讨,建立PCV2体外感染3D4/2细胞炎症反应模型,以期为后期药物调控PCV2诱发3D4/2细胞炎症反应的研究奠定基础。【方法】将3D4/2细胞分为对照组及10⁰、10^-1、10^-2和10^-3 PCV2感染组,每组3个重复。对照组用DMEM培养,各PCV2感染组用不同稀释倍数PCV2液培养,2 h后均更换为含5%胎牛血清（FBS）的DMEM维持液进行培养,培养4、8、12和24 h后分别收集细胞及细胞上清液。采用Griess法检测一氧化氮（NO）水平,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧（ROS）水平,酶标法检测还原型谷胱甘肽（GSH）水平,分光光度法检测黄嘌呤氧化酶（XOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性,ELISA法测定白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）、IL-8、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）以及环氧合酶1（COX-1）和COX-2的分泌水平。【结果】10⁰至10^-3 PCV2作用4、8、12和24 h均能够成功感染3D4/2细胞。与对照组相比,10⁰ PCV2在感染3D4/2细胞4、8、12、24 h后ROS水平均极显著升高（P<0.01）,10^-1至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后ROS水平显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;10⁰至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后,细胞内NO浓度及MPO活性显著提高（P<0.05）,细胞上清液中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-8和MCP-1水平及COX-1活性均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,其中10⁰ PCV2感染3D4/2细胞后,各炎症因子水平上升最显著,且随着时间的延长,NO浓度逐渐升高,XOD活性逐渐降低。【结论】PCV2可诱导3D4/2细胞炎症反应,且10⁰ PCV2体外感染3D4/2细胞4~12 h是建立炎症模型的最佳条件。     

南昌市园林藤本植物的应用现状

通过对南昌市6个片区90个样点中的园林藤本植物的应用状况进行详细调查和归类分析,结果表明南昌市园林藤本植物的应用状况具有以下几个特点:①种类偏少,仅12种;②分布不均匀,不同片区之间和功能区之间的应用状况相差悬殊;③应用形式较单调;④绿化面积小;⑤配植方式简单;⑥缺乏管护。因此,从总体上来说,南昌市园林藤本植物的应用水平不高。     

祁连山坡地草场水土流失回归模型的建立

通过对祁连山坡地草场过度、中度和轻度放牧类型产生水土流失的数据分析，运用回归分析及方差显著性检验对径流量和土壤流失量、降水强度对水土流失量的影响情况进行了分析，结果表明，过度放牧观测小区水土流失量（E）与径流量（F）、径流系数（C）及降水量（P）之间呈现E=68.4831 3.9532F-0.8586C-11.1243P的拟合关系（r=0.9091），中度放牧地呈现E=2.8184 0.8692F-0.3325C-0.6627P的拟合关系（r=0.9734），轻度放牧呈现E=-0.0019-0.0781F-0.0009C-0.0005P的拟合关系（r=0.8986）。同时指出当降水强度一定时，坡地草场由于放牧强度不同，其径流系数差异显著，过度放牧草地在雨季有较大降水量是流域内产生水土流失的主要来源。     

东莞市大岭山森林公园小气候效应调查

对广东省东莞市大岭山森林公园开展了森林小气候的调查，结果表明：大岭山森林公园的环境状况达到了二级标准水平；有林地与空旷地相比，其土壤温度、空气温度的日变化相对平缓，有林地的土壤温度以阔叶成林的最低，幼林的次之。有林地的空气负离子含量明显比空旷地的高，空气中可吸入粉尘质量浓度、空气粒子数均比空旷地的低。大岭山森林公园可作为休憩、娱乐和保健的场所。     

纤维素酶系组成对二次纤维形态与表面结构的影响

用不同滤纸酶活力和羧甲基纤维素酶活力比(F／C)值的纤维素酶系处理轻量涂布纸二次纤维，研究了纤维素酶系组成对二次纤维性能的影响。随着F／C值从0增到2．5，长度小于0．2mm的纤维分布密度由23．55％降低到17．50％。纤维加权平均长度由1．067mm增加到1．168mm，纤维的卷曲系数由0．103下降到0．087；纤维的扭结强度由0．78个／mm增加到0．84个／mm。随着F／C值的增加，纤维素酶系外切酶的酶解作用增强，细小组分逐渐减少，二次纤维平均长度呈上升趋势，卷曲程度下降，有利于浆料滤水性能的改善，但纤维扭结强度上升对单根纤维强度和纸张强度产生不利影响。     

新疆天然林资源保护工程智能化监控平台建设研究

基于移动通信、地理信息和视频监控等技术建立天然林资源保护工程智能化监控平台,实现天然林资源的全面监控和管理,加强巡护人员和巡护事件的监控力度。文中介绍了视频监控技术、移动GIS技术和智能移动通信技术等研究中的关键技术。阐述平台总体框架设计以及视频监控管理子系统、天保工程森林智能移动巡护子系统和天然林资源保护巡护管理子系统的主要功能实现。     

昆虫化学信息物质概述

昆虫化学信息物质以其微量i高效、无污染、与农药兼容等特点而成为当前世界各国昆虫学家研究的热点问题，它们的应用范围非常广泛，本文对昆虫化学信息物质的概念进行了综述，阐述了其包含的种类的相互关系和相应的概念以及在农、林业害虫领域中的应用效果，展望了昆虫化学信息物质的发展前景。