蛇钩口线虫长沙分离株ITS基因的克隆及序列分析

为研究蛇钩口线虫长沙分离株的核糖体DNA (rDNA)内转录间隔区(ITS)序列的遗传变异情况,并利用ITS序列构建蛇钩口线虫与其它线虫的种群遗传关系,本研究利用PCR扩增蛇钩口线虫rDNA的ITS片段,并克隆至pGEM-T载体中进行序列测定及分析.结果显示,长沙市各分离株的ITS序列长度均为734 bp,与其它线虫的同源性均低于83.9％,而与十二指肠钩口线虫的同源性较高.本研究为蛇钩口线虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定了基础.     

夏秋蚕新品种浒花、秋星的育成及其一代杂交种的选配

根据长江流域夏秋季的气候特点,采用杂交、回交、系统分离、活蛹缫丝和多代高温多湿环境定向培育等育种方法,分别育成了中系蚕品种“浒花”和日系蚕品种“秋星”。两者都具有抗性强、丝量高、茧丝质优以及繁育容易等特点。其一代杂交种经多次实验室鉴定、农村生产鉴定、试养以及全国蚕品种审定结果表明:该新品种体质强健、孵化、眠起、老熟齐一,茧丝量高,茧层率22％;鲜毛茧出丝率15—16％,茧丝品质优良、解舒率74％,净度93分,茧丝纤度2.53/D,茧丝长超1000m。     

Intramammary infusion of an Enterococcus faecium SF68 preparation promoted the involution of drying off Holstein cows partly related to neutrophil‐associated matrix metalloproteinase 9

A problem for dairy cows following milk stasis is to cope with a high risk of intramammary infection and there is a need to initiate an extensive renewal of secretory modules in mammary glands so that milk production in next lactation may be optimized. We recently reported that ultrasonicated Enterococcus faecium SF68 (SF68) is compatible with cow mammary glands and an enhancer of innate immunity during the immediate post‐milk stasis period. The current study further examines the concomitant effect of ultrasonicated SF68 on mammary tissue remodeling. Four Holstein cows each received intramammary infusions of regular antibiotic dry‐cow formula (positive control) and two different doses of SF68 in different quarters. Analyses of individual quarter secretion samples showed faster neutrophil infiltration, earlier modifications in protein composition, including caseins and lactoferrins, as well as more prompt elevation of the specific unit of 92‐kDa matrix metalloproteinase 9 (MMP9) in SF68‐infused quarters compared to the positive controls. Intramammary infusion of ultrasonicated SF68 seems able to accelerate the regression of mammary synthetic capacity and potentiate the breakdown of glandular extracellular matrix, indicating a more efficient mammary gland involution. Correlation analyses imply that the ability of ultrasonicated SF68 to induce faster neutrophil chemotaxis and the associated MMP9 release is partly responsible.     

张掖市生态循环农业与经济发展模式

本文立足张掖市生态优势,着眼循环农业发展,总结了张掖市发展生态循环农业的生态整合、减量化生产、生态链连接与转换、产业纵向拉长、产业横向延伸及庭院微循环等模式。分析表明,认识创新是发展生态循环农业的前提条件,理清基本思路是发展生态循环农业的关键所在,政府推动是发展生态循环农业的重要基础,市场化运作是发展生态循环农业的重要途径,科技创新是发展生态循环农业的核心手段,政策法规是发展循环经济型生态农业的重要保证。     

利用对β-谷甾醇含量的检测鉴别生鲜乳中掺假植物脂肪的研究

本试验建立了气相色谱―质谱法测定生鲜乳中β-谷甾醇的检测方法,由于理论研究表明生鲜乳中的乳脂肪是动物油脂,不应含有或很少含有植物油脂中特有的甾醇β-谷甾醇,因此对多个地区生鲜乳中β-谷甾醇的本底含量进行分析,给出生鲜乳中掺假植物油脂的鉴定方法。用质量比1.25的氢氧化钾水溶液25 mL皂化样品,100 mL维生素C的乙醇溶液作为稳定剂和抗氧化剂,皂化液用石油醚和乙醚萃取,转溶剂至甲苯,离心进样质谱。选用高柱效的60 m DB-5毛细管柱,进样量1 μL,程序升温在35 min内实现β-谷甾醇与其他醇类及杂质的良好分离。选择离子414定量,检出限为0.10 mg/L,线性相关系数r=0.9991。运用该方法对6个地区生鲜乳中β-谷甾醇含量进行检测,结果得到最高值为0.86 mg/L,常见植物油中β-谷甾醇的含量为1～3 g/L。表明生鲜乳中利用植物脂肪代替乳脂肪时,每提高1%植物脂肪将多产生最少相当于本底量12倍的β-谷甾醇,从而判定生鲜乳中是否掺假植物脂肪。     

高校创新培养新模式探索——文献阅读模式改革

随着我国高校学生培养水平的整体提高及对学生学习、掌握理论与技能要求的进一步提高,对其培养模式的新探索也随之展开。本文针对高校本科生与研究生在文献阅读中普遍存在的“不会找,不会读,读不懂”三大难题,借助例会等形式进行文献阅读改革的探索,对所阅读文献的内容,质量,侧重点等进行具体规划,并辅以凝练总结加以强化。团队多年来在教学模式中的探索与实践表明,通过5个部分对文献讲读因材施教,学生理论水平提升效果明显,对科研思维的培养也有较高的指导意义,为其学习专业领域知识及科研领域探索奠定更稳固的基础。本文结合团队多年来教学培养新模式中的探索经验,提出几点措施与建议,供大家参考。     

五个典型柑桔品种的落花落果规律调查

以成年纽荷尔脐橙、兴津温州蜜柑、沙田柚、尤力克柠檬和圆金柑为材料,探索其花果脱落规律。结果表明,最终坐果率与总花量（含花蕾）显著负相关（P < 0.01）;平均单株花果脱落总数量为兴津温州蜜柑 > 纽荷尔脐橙 > 沙田柚 > 圆金柑 > 尤力克柠檬;平均单株花果脱落总干重为兴津温州蜜柑 > 纽荷尔脐橙 > 沙田柚 > 尤力克柠檬 > 圆金柑;纽荷尔脐橙、兴津温州蜜柑和沙田柚第一次生理落果数量大于第二次生理落果,尤力克柠檬和圆金柑第二次生理落果数量大于第一次生理落果。因此,纽荷尔脐橙、兴津温州蜜柑和沙田柚应重点防止第一次生理落果,尤力克柠檬和圆金柑应重点防止第二次生理落果。     

努比亚山羊LMCD1基因生物信息学分析、真核表达载体的构建及表达

【目的】 扩增努比亚山羊LIM结构域基因1（LIM domain gene 1,LMCD1）并进行生物信息学分析,构建真核表达载体并检测LMCD1基因的表达情况,为研究努比亚山羊LMCD1基因功能及探究LMCD1基因在山羊骨骼肌肉发育中的作用提供依据。【方法】 从努比亚山羊背最长肌组织中提取总RNA,应用RT-PCR方法扩增LMCD1基因CDS区序列,并进行生物信息学分析;将LMCD1基因以同源重组的方式连接pEGFP-N1载体,经酶切、测序鉴定后重组阳性质粒命名为pEGFP-N1-LMCD1;将pEGFP-N1-LMCD1重组质粒转染至山羊骨骼肌卫星细胞,通过实时荧光定量PCR检测努比亚山羊LMCD1基因的表达情况。【结果】 努比亚山羊LMCD1基因CDS区序列全长1 092 bp,编码363个氨基酸。LMCD1蛋白分子式为C₁₇₇₅H₂₈₁₈N₅₀₈O₅₃₃S₂₉,分子质量为40.73 ku。努比亚山羊LMCD1基因CDS区序列与山羊相似性最高（99.8%）,与斑马鱼相似性最低（55.4%）,与其他物种的相似性在87.0%~98.8%之间。LMCD1蛋白无信号肽,不存在跨膜结构域,为亲水性蛋白。通过构建努比亚山羊pEGFP-N1-LMCD1真核表达载体并转染至骨骼肌卫星细胞,过表达LMCD1基因,产生绿色荧光信号。【结论】 试验成功扩增LMCD1基因CDS区序列,构建了pEGFP-N1-LMCD1真核表达载体,并分析了生物学功能,为后续开展LMCD1基因在山羊骨骼肌肉发育中的机制研究提供了理论基础。     

广西猪瘟病毒E0和E2基因的克隆及序列分析

通过分析目前广西猪瘟病毒(CSFV)的E0和E2基因特征,为了解广西地区CSFV的分子流行病学、遗传变异及综合防控提供科学依据。试验采用RT-PCR方法,对阳性猪瘟样品进行CSFV的E0及E2基因的扩增,经克隆、测序后,利用DNAStar软件对序列进行比对分析,同时绘制系统遗传进化树。结果表明,从阳性猪瘟样品中成功扩增CSFV的E0及E2基因。序列比对分析发现,GX2毒株与参考毒株的E0基因核苷酸同源性在83.1%~94.1%,其推导氨基酸同源性在85.9%~99.6%;与参考毒株的E2基因核苷酸同源性为81.7%~93.7%,其推导氨基酸同源性为89.0%~97.0%;E0与E2基因均属于基因Ⅱ群。氨基酸变异位点分析表明,E0蛋白的RNase活性区域氨基酸基序位点没有发生变异;E2蛋白中15个位点上的半胱氨酸均未发生变异,但单抗识别位点S734R发生变异。遗传进化分析显示测定的GX2毒株与近年来广西CSFV流行毒株的变异趋势相似,与中国传统疫苗株HCLV、经典强毒株Shimen的同源性较低,亲缘关系较远,与广西近年来的流行毒株GXWZ02株的同源性较高,亲缘关系较近。