禽流感病毒PB2亚单位抗血清的制备

采用RT-PCR方法分段扩增PB2基因,将目的基因定向克隆至含HisTAG的原核表达载体pET-32a,经序列验证正确后,转化BL21大肠杆菌,诱导表达重组蛋白。靶蛋白经Ni+柱纯化后与弗氏免疫佐剂混合免疫新西兰大耳白兔,获得高效价的抗PB2的抗血清。Western-blot检测结果证实制备的抗血清可与PB2蛋白发生特异性反应。进一步将PB2全长基因准确插入真核表达载体pCAGGS,转染293T细胞表达PB2蛋白,通过IFA检测发现,抗血清与细胞表达的PB2蛋白发生反应,出现特异性荧光,经激光共聚焦检测PB2亚单位只在细胞核中出现荧光,说明PB2亚单位单独表达仅限于细胞核内。上述研究为进一步探索PB2亚单位的生物学特性及其结构与功能研究打下基础。     

马鹿冻精解冻后精子超微结构观察

实验利用透射电镜技术和扫描电镜技术对冷冻/解冻后的塔里木马鹿精子的超微结构进行了观察。结果表明:电镜下观察,塔里木马鹿精子头部呈扁平的卵圆形,长约5.95μm。颈部很短且不明显,长约0.45μm,宽为0.62μm。尾部中段横切面近圆形,直径约为0.58μm,轴丝为9×2+2型;线粒体鞘螺旋段为64～70转。尾部末段仅见质膜包围,9束微管和1对中央微管,形成9+2微管结构。冷冻/解冻后塔里木马鹿部分精子结构发生了变化,一些精子肿胀、质膜皱褶、扭曲,部分质膜损坏或溃散;顶体轻度肿胀,顶体外膜凸凹不平,形成突起。冷冻对头部破坏程度较小。     

玉米价格高涨后的蛋鸡饲料解决方案

进入2006年以来,由于玉米价格持续走高,致使饲料生产成本提高。特别是近期小麦和玉米的倒挂价差越来越大,局部地区甚至达到160￣220元/t,使得部分饲料企业和养殖场开始在生产中用小麦替代玉米。当前,中原地区玉米质次价高,霉变严重,养殖户在当地要找到优质玉米很不容易,因此,多     

猪呼吸道疾病综合征的防治

猪呼吸道疾病综合征(PRDC),又称“猪复合性肺炎”“、多因子猪呼吸道病”等,是近几年来集约化养猪场或养猪专业户常见的疾病,给养殖业带来严重的经济损失。本病的特点是致病原因复杂,多因子共同作用,临床症状不一,病程长,疗程久,猪增重速度下降,尤其是保育猪和育肥猪多发。通常需联合用药才能控制。1病因猪呼吸道疾病综合征的致病原因相当复杂,目前尚存在争议,但共同认为是一种多因子复合型疾病。1.1原发性病原经常是几种病原同时存在。常见的主要病原有:1.1.1猪繁殖与呼吸综合征病毒本病毒引起猪繁殖与呼吸综合征,俗称“兰耳病”。其典型…     

饲料中Fe、Cu、Mn、Zn对异育银鲫器官、组织相应元素的影响及其相关性研究

以异育银鲫为试验对象,在实用饲料中按照L9(34)正交设计方案补充Fe、Cu、Mn、Zn,经过60 d养殖后,分析鱼体器官、组织与饲料中Fe、Cu、Mn、Zn 4种微量元素的含量、相互比例的相关性。试验结果表明,Fe、Cu、Mn、Zn在鱼体各器官、组织中具有明显的分布特征:鳍中的Fe、Mn、Zn,头骨中的Cu、Mn、Zn,心脏、肝胰脏、脊椎骨中的Fe、Cu,全鱼Cu、Zn,脾中Cu、Mn,肾脏中Mn、Zn,肌肉、卵、肠中Cu,鳃骨中的Zn,鳞中的Mn受饲料中相应元素供给量的影响很大;鱼体器官、组织中Fe、Cu、Mn、Zn比例模式有3种基本类型,脾、肌肉、脑、心脏、肾脏和全鱼属于Fe比例高的类型(称为高Fe型),与饲料中的Fe、Cu、Mn、Zn比例模式非常相近,具有显著的相关性;脊椎骨、鳃骨、肠、头骨和鳍中Fe、Zn两者比例比较接近,属于Fe、Zn比较高的类型(称为高Fe、高Zn型),而鳞和卵属于Zn比例高的类型(高Zn型),这两类类型的Fe、Cu、Mn、Zn比例与饲料中比例模式相关性差。     

振兴蚕业任重道远

自2009年底以来,丝绸行业开始复苏,茧丝价格一路上扬,一定程度上刺激了蚕桑生产发展,形成了蚕农增收、企业盈利的良好态势。然而,随着我国经济的高速增长,城市化步伐不断加快,这种茧丝价格上涨与蚕桑发展并不成正比,蚕茧总量并无增加,这几年     

PK结肠溶胶囊对犬结肠炎的疗效评价

为评价PK结肠溶胶囊对犬结肠炎的治疗效果,探索更安全有效的治疗药物,以16只中华田园犬作为试验动物制作急性溃疡性结肠炎模型,随机平均分为4组,试验组分别口服PK结肠溶胶囊1颗/kg(正常剂量组)、2颗/kg(2倍剂量组)及柳氮磺吡啶结肠溶胶囊(阳性药物组,1颗/kg),测定给药后犬血液白细胞总数(WBC)、C-反应蛋白(CRP)参数变化,用内窥镜观察肠黏膜愈合状况。结果:2倍剂量组和阳性药物组给药后第4dWBC恢复到正常范围,正常剂量组给药后第7d未恢复到正常范围;2倍剂量组给药后第7dCRP恢复到正常范围,正常剂量组和阳性药物组未恢复到正常范围;内窥镜观察肠黏膜愈合状况疗效最好的是2倍剂量组。结论:PK结肠溶胶囊以2颗/kg剂量治疗犬结肠炎疗效明显,效果优于1颗/kg的正常剂量和柳氮磺吡啶。     

致猪水肿病大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立及应用

本研究旨在建立一种快速鉴定致猪水肿病大肠埃希菌的多重PCR检测方法.分别针对大肠埃希菌16S rDNA、志贺毒素Stx2e A亚基和菌毛F18ab A亚基保守序列设计合成3对特异性引物,优化多重PCR反应条件,并进行特异性和敏感性检测.结果显示,阳性对照菌株扩增产物大小分别为1 062、733和313 bp.特异性和灵敏性检测结果表明,与肠炎沙门菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、支气管败血波氏杆菌和猪链球菌等猪常见致病菌均无交叉反应;菌体直接扩增法最低检出量为1 875 CFU.利用建立的多重PCR检测方法对分离收集的128株大肠埃希菌进行鉴定,得到36株致猪水肿病大肠埃希菌,其中30株既有菌毛F18ab又产志贺毒素Stx2e,另外6株仅产志贺毒素Stx2e.结果表明,本试验所建立的多重PCR检测方法对致猪水肿病大肠埃希菌的快速诊断和流行病学调查具有一定的应用价值.     

柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2基因真核表达载体的构建及在293T细胞中表达

为构建柔嫩艾美耳球虫棒状体颈部蛋白2(Eimeria tenella rhoptry neck protein 2,EtRON2)基因的重组质粒pCAGGS-EtRON2,并转染293T细胞进行表达,以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA为模板,经PCR扩增其核心编码区的一部分,将其克隆至pGEM-Teasy载体,构建pGEM-Teasy-EtRON2质粒,双酶切出目的片段后与相应酶切的真核表达载体pCAGGS连接,构建真核表达质粒pCAGGS-EtRON2。该重组质粒经酶切和测序鉴定后转染293T细胞进行表达,分别用免疫印迹和间接免疫荧光鉴定EtRON2基因的表达情况。所构建的真核表达质粒pCAGGS-EtRON2经过双酶切鉴定,可见一条大小约为1172 bp的目的条带,测序结果与GenBank所登录序列完全一致;免疫印迹实验可见大小约为43 kDa的目的蛋白条带,间接免疫荧光实验可以检测到特异性红色荧光。研究结果表明已成功构建了EtRON2的真核表达质粒pCAGGS-EtRON2,并在真核细胞中获得表达,为深入研究EtRON2的生物学功能奠定了基础。     

布尔山羊乳腺炎病原菌的分离与鉴定

应用三种方法对来自一个布尔羊场的50份奶样进行隐性乳腺炎检测，并对检出的阳性乳样进行细菌分离鉴定。结果表明，所用的三种方法具有良好的一致性；该羊场的隐性乳腺炎检出率为18％（9／50），阳性乳样中细菌检出率为77.8%(7/9),分离到6株病原菌，通过进一步鉴定，证明葡萄球菌和无乳链球菌是引起该场布尔山羊隐性乳房炎的主要病原菌，其次为大肠杆菌和巴氏杆菌。这就提示，对于布尔山羊，同样需要重视乳腺炎的预防与治疗。