表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的重组乳酸菌的构建及蛋白免疫原性分析

试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌（Lactococcus lactis），为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E2基因克隆后测序，根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化，再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中，并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞，构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000，经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后，对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛，在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清，用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示，PCR扩增到了1 149 bp的目的片段，乳酸菌密码子偏嗜性优化后，GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符，在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带，与预期蛋白大小一致，且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明，表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应，该重组菌具有较好的免疫原性。     

中国石油海外管道完整性管理的必要性和挑战

针对国家油气战略通道安全平稳运行的需要,基于中国石油海外油气管道的基本特点,分析了海外油气管道实施完整性管理的必要性。根据中国石油海外管道安全运行的技术需求和油气管道完整性管理技术的特征,分析了中国石油海外油气管道实施完整性管理面临的技术挑战。为提高海外管道安全水平,避免海外投资遭受损失,需尽快开展海外管道的完整性技术应用工作。在具体实施过程中,需要与国内管道完整性管理技术研究及应用单位相结合,充分发挥中国石油集团公司整体技术优势。     

多主体合作博弈视角下林业专业合作社盈余利益分配研究

盈余利益分配机制是否合理、完善,对林业专业合作社能否实现成功运转至关重要。文章基于林业专业合作社各利益主体在盈余利益分配上是一个合作博弈的过程,针对传统Shapley值法只考虑贡献率的特点,考虑到林农、投资者、经营者与公司承担风险性大小的差异,利用层次分析法提出改进的Shapely值法,并通过具体算例对改进Shapely值法进行了应用。     

海水中规模化培养西藏拟溞的技术优化研究

为了给北方海水鱼虾蟹类育苗增添一种新的生物活饵料,利用循环水培养装置研究了西藏拟溞Daphniopsis tibetana Sars在稀释海水(盐度为18~20)中规模化培养的技术工艺参数,即起始放养密度、充纯氧和日采收率。结果表明:起始放养密度对西藏拟溞种群增长和日产量影响显著(P0.05),不同起始放养密度(200、550、900、1250 ind./L)培养试验中,放养密度为1250ind./L时,培养第33天时种群密度达最高,为(9500±550.73)ind./L,平均日产量为(125.00±8.35)g/(m3·d);充纯氧与充空气相比较,充纯氧能显著提高种群密度和日产量(P0.05),当放养密度为1250 ind./L、充纯氧时,西藏拟溞种群密度最高达(11 600±560.45)ind./L,平均日产量为(156.82±8.49)g/(m3·d);日采收率对西藏拟溞的种群增长和日产量也有显著影响(P0.05),日采收率为20%时最佳,放养密度为1250ind./L、日采收率为20%时,西藏拟溞种群密度最高为(12 900±995.04)ind./L,平均日产量为(176.52±15.08)g/(m3·d)。     

房地产销售系统的软件设计与实现

房地产业的飞速发展,给房地产销售管理带来了很多新的问题和任务,传统的管理模式已经不能适应现代房地产销售管理的需要,亟待建立一套房地产销售管理信息系统,以满足房地产管理信息化、科学化、现代化的需求。     

快速灵敏的甘蔗线条花叶病毒免疫学检测体系的建立

 甘蔗花叶病广泛存在于我国甘蔗种植区,严重影响甘蔗产业的高质量发展。近年来甘蔗线条花叶病毒在蔗区肆虐,尽管针对其的血清学检测技术已经建立,但是快速、准确、高通量的检测方法亟待发掘。本研究制备了^SCSMVCP的抗血清,特异性高,与引起甘蔗花叶病的另两种病原 (高粱花叶病毒和甘蔗花叶病毒) 间没有血清学交叉反应。基于该多克隆抗体,建立了直接抗原包被的ELISA、斑点杂交、Western blot和基于多抗的免疫试纸条检测技术。开发的免疫试纸条检测技术能快速、准确、高通量应用于田间病毒鉴定。本文提供了基于血清学的快速、准确、高通量,且便捷的甘蔗线条花叶病毒检测技术,有助于我国蔗区甘蔗花叶病的监测与防控。     

苦瓜转录因子McEIL2的克隆及其表达分析

本研究从已构建的苦瓜果实均一化文库筛选得到一个EIN3-like同源EST序列,结合RACE技术,克隆得到EIN3基因c DNA全长序列,命名为Mc EIL2(Gen Bank登录号:KF595122)。该基因全长2 122 bp,开放阅读框1 890 bp,编码629个氨基酸,预测该蛋白的分子量为71.58 k D,与黄瓜Cus EIN3、甜瓜Cm EIL1、苜蓿Mt EIL1、绿豆Vr EIL1和番茄Le EIL1的蛋白同源性分别为89.61%、78.37%、71.23%、69.09%和65.66%。Mc EIL2基因的编码蛋白亚细胞定位于细胞核,荧光定量分析表明Mc EIL2基因表达量在幼果期先强后弱,绿熟期最低,破色期表达量大幅增加至最高随后下降,推测该基因参与苦瓜果实成熟软化调控过程。本研究初步明确了Mc EIL2基因在苦瓜成熟过程表达模式,可为今后进一步揭示苦瓜果实成熟软化的分子机制奠定基础。     

新宾县农机专业合作社发展研究

发展农机专业合作社是完善农业生产经营体制的重要内容。介绍新宾县农机专业合作社的发展现状,简述合作社发展过程及主要合作形式,论述合作社成立以来发挥的作用和取得的成效,提出合作社今后发展需要重视的问题。     

水杨酸浸种对盐胁迫下燕麦种子萌发的影响

为研究水杨酸浸种对盐胁迫下燕麦种子萌发的影响,以晋燕1号燕麦种子作为试验材料,研究不同浓度的水杨酸浸种对NaCl胁迫下燕麦种子萌发率、种子α-淀粉酶活性、幼芽含水量和根部指标的影响。研究表明:2.3 g·L^-1 NaCl致使燕麦种子的萌发率、种子α-淀粉酶活性、幼芽含水量和根部指标均有下降,但与对照差异不显著。水杨酸浸种后,低浓度的水杨酸可缓解盐胁迫对燕麦的伤害,促进燕麦种子的萌发及其幼苗的生长,高浓度的水杨酸则抑制燕麦种子的萌发及其幼苗的生长,最佳的水杨酸处理浓度为0.05 mmol·L^-1。     

进口越南屠宰用活猪重大动物疫病传入风险评估

为分析进口越南屠宰用活猪传入重大动物疫病的风险,探讨进口越南屠宰用活猪的可行性,参照世界动物卫生组织以及澳大利亚、新西兰等的进口风险分析技术,采用定性评估方法,开展非洲猪瘟、口蹄疫、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征等4种进境一类重大动物疫病传入释放评估、接触发生评估和后果评估。评估认为,非洲猪瘟、口蹄疫、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征等疫病具有"高"传入风险,可随活猪引进病原体,并且能够对我国养猪业产生不利影响,因此目前不能接受其进口。针对"高"传入风险,需要制定严格的降低疫病传入风险管理措施,包括严格产地要求、加强境外预检、指定口岸入境、强化隔离检疫、建立生物隔离区。本研究对我国动物产品进口贸易政策及检疫措施的制定提供了有力参考。