新疆伊犁地区马疱疹病毒1型ORF30基因序列分析

为研究马疱疹病毒1型（EHV-1-XJ2015）新疆伊犁分离株致病基因型,评估新疆EHV-1-XJ2015的潜在风险因素,本试验设计特异性引物,应用PCR技术扩增EHV-1-XJ2015分离株ORF30基因相应区域,连接至克隆载体,成功构建重组质粒pMD19-T-ORF30。测序结果表明,EHV-1-XJ2015毒株ORF30基因2 254 bp处为A,且编码天冬酰胺（N）,分析证明EHV-1-XJ2015基因型为非神经型毒株,毒力倾向表现为流产型毒株;遗传进化显示,EHV-1-XJ2015毒株与日本分离株90c16、00c19、HH1、NY03为同一分支,氨基酸同源性最高为100%。本研究结果为开展EHV-1分子流行病学调查研究及为新疆地区现有诊断方法和防控措施的评估提供理论依据。     

不同转群时间及喷洒精油对仔猪断奶应激的影响

为探讨不同的转群时间及转群前后喷洒精油对仔猪断奶应激的影响,优化仔猪断奶转群模式,试验选择28日龄、断奶体重（7.00±0.50）kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪192头,随机分为4组,每组3个重复,每个重复16头。采用2×2两因素试验设计,分别探讨不同转群时间（08：00、20：00）及是否喷洒精油（喷洒、不喷洒）对断奶仔猪腹泻率、死亡率、血液生化指标、氧化指标及免疫指标的影响。结果表明：转群后1、8、24 h,各试验组仔猪血清总蛋白（TP）和白蛋白（ALB）含量差异均不显著（P>0.05）;转群后1和8 h,晚上转群组仔猪血糖（GLU）含量低于早上转群理组,喷洒精油后GLU进一步降低;仔猪转群后1、8、24 h,各试验组仔猪血清中皮质醇（COR）和丙二醛（MDA）水平随转群后时间的增加而降低。转群后1和8 h,喷洒精油的两组仔猪血清MDA水平显著低于不喷组（P<0.05）,24 h后血清COR水平显著下降（P<0.05）;转群后1、8、24 h,各处理组仔猪血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）含量无显著差异（P>0.05）,转群后1和24 h,早上转群但不喷洒精油组仔猪血清白细胞介素-10（IL-10）与晚上转群且不喷洒精油组无显著差异（P>0.05）,而喷洒精油后,IL-10水平均显著下降（P<0.05）,以晚上转群且喷洒精油组仔猪血清IL-10水平最低。综上所述,晚上转群对断奶仔猪的应激程度小于早上转群,喷洒精油能进一步缓解应激,晚上转群并喷洒精油是减少仔猪断奶转群的理想模式。     

陇东肉牛PON1基因结构与功能的生物信息学分析

为阐明陇东肉牛对氧磷酶1（paraoxonase 1,PON1）基因的结构与功能,本研究运用PCR扩增陇东肉牛PON1基因所有外显子序列并测序,通过Seqman软件完成序列拼接,结合生物信息学方法预测和分析其碱基组成、开放阅读框及编码蛋白的理化性质、原子组成、氨基酸残基数、亲水性和疏水性、分子质量、等电点、二级结构、高级结构等。结果显示,陇东肉牛PON1基因CDS区序列全长1 068 bp,编码355个氨基酸残基,其中数目最多的为亮氨酸（Leu）,数目最少的为半胱氨酸和色氨酸（Cys和Trp）。碱基组成中A+T含量（56.55%）高于G+C含量（43.26%）。与GenBank中牛PON1基因序列（登录号：EU289337）比对分析发现,在PON1基因外显子4、6、8、9中存在突变,但均未导致氨基酸发生变化,为同义突变。PON1蛋白的原子组成是C₁₈₁₀H₂₇₉₆N₄₅₄O₅₃₃S₁₂,分子质量为39.83 ku,理论等电点为5.24,为稳定的水溶性蛋白质。PON1蛋白二级结构中无规则卷曲、延展链、α-螺旋和β-转角分别由159、116、55和25个氨基酸构成,最终形成了以无规则卷曲和延展链为主的混合型。PON1蛋白的疏水性结果表明,第8位苏氨酸（Thr）疏水性最强（最高分值2.878）,第299位脯氨酸（Pro）亲水性最强（最低分值-2.222）。本试验结果为深入研究陇东肉牛PON1蛋白功能及探讨PON1基因突变对甘肃地方肉牛胴体、肉质性状的影响奠定基础。     

博落回提取物对断奶仔猪生长性能、血清免疫指标及抗氧化指标的影响

本试验旨在研究博落回提取物对断奶仔猪生长性能、血清免疫指标及抗氧化指标的影响,选择120头35日龄的健康杜×长×大三元杂交断奶仔猪,按体重相近、性别比例相同原则随机分成2组,每组5个重复,每个重复12头猪,预饲期5 d,试验期30 d,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂添加0.1%博落回提取物的基础日粮。试验期间,测定每组仔猪的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）及料重比（F/G）;在试验结束时,每个重复选取2头仔猪采血测定血清免疫指标及抗氧化指标。结果显示：①添加博落回提取物组断奶仔猪ADG较对照组提高3.89%（P>0.05）,F/G下降4.32%（P>0.05）,且腹泻率较对照组有显著降低的趋势（P=0.076）。②日粮中添加博落回提取物显著提高了断奶仔猪血清中免疫球蛋白G （IgG）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量（P<0.05）,血清IgA及IgM含量分别较对照组提高了4.59%和4.60%（P>0.05）。③日粮中添加博落回提取物可显著降低断奶仔猪血清中丙二醛（MDA）含量（P<0.05）,同时显著提高总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性（P<0.05）。综上所述,在日粮中添加0.1%博落回提取物可降低断奶仔猪腹泻率,并提高机体免疫力及抗氧化能力,且对断奶仔猪生长性能无不良影响。     

坦布苏病毒不依赖虫媒在鸭间传播的分子基础

正坦布苏病毒(Tembusu virus, TMUV)属于黄病毒科黄病毒属,多数黄病毒属病毒如乙脑病毒、寨卡病毒、登革病毒等均属于虫媒病毒,普遍认为这些病毒的传播离不开虫媒。1955年,首次从库蚊中分离到TMUV,之后不时地从蚊子中分离到该病毒。2000年,马来西亚爆发了一起由TMUV引起的肉鸡传染病,表现为脑炎和生长迟缓,幸运的是该疫病没有进一步扩散。2010年,我国爆发了鸭坦布苏     

不同粒度黄芪粉对蛋用公雏生长及免疫功能的影响

选择1日龄海兰褐雏公鸡120只,随机分成5组(1个对照组和4个试验组),对照组饲喂基础日粮,4个试验组在基础日粮中添加1％的黄芪粉,黄芪粉粒度分别为20、40、80和100目.饲养期为35 d.每周末称量体重,进行翅静脉采血,用血凝抑制法(HI)测定血清新城疫病毒(NDV)抗体水平;35日龄进行屠宰,测定免疫器官(脾脏、胸腺、法氏囊)的重量,计算免疫指数,以研究不同粒度黄芪粉对蛋用公鸡雏生长速度及免疫功能的影响.结果表明:随着黄芪粉粒度变小,公鸡雏体重、血清抗新城疫病毒抗体效价、免疫器官指数均有不同程度的提高.     

超低温冷冻对小鼠桑椹胚多能性因子Oct-4表达的影响

本实验旨在探讨昆明白小鼠桑椹胚超低温冷冻后Oct-4表达的变化与胚胎发育潜力的关系。胚胎采用OPS法冷冻,即胚胎于10%EG+10%DMSO溶液中预处理30 s,然后再移入玻璃化溶液(EDFS30)中处理25 s,以OPS为承载器投入液氮中。毒性组胚胎未投入液氮,其他过程与冷冻组相同,新鲜胚胎为对照组。胚胎解冻后,检测Oct-4 mRNA与蛋白的表达,通过观察其形态正常率、囊胚发育率和囊胚细胞数来综合判断其体外发育能力。结果表明:冷冻组和毒性组较桑椹胚中Oct-4 mRNA的表达量对照组相比显著降低(P<0.05),蛋白表达量3组间无显著差异。桑椹胚处理后的形态正常率以及桑椹胚培养48 h后的囊胚发育率(96.67%～100%)和囊胚细胞数(89.67～92.33)3组间无显著差异。结果显示,玻璃化冷冻保存小鼠桑椹胚后多能性基因Oct-4 mRNA表达的变化并未影响其体外发育潜力。     

牛乳腺炎无乳链球菌表面蛋白pgk抗原优势区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

为评价牛乳腺炎无乳链球菌重组表面蛋白(pgk)免疫原性,并通过建立检测抗体的间接ELISA方法对免疫抗体效价进行评价,本研究根据GenBank登录的无乳链球菌pgk基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板PCR扩增出pgk蛋白抗原优势区的编码基因序列。将其插入pET-30a(+)中,并在大肠杆菌中表达。Western blot鉴定表明,表达的重组蛋白与阳性血清具有良好的反应原性。采用纯化的表达产物作为包被抗原建立了检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.115μg/mL,血清最佳稀释度为1∶160,酶标二抗最适稀释度为1∶4 000。初步应用于检测无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌小鼠阳性血清的检测。结果表明牛乳腺炎无乳链球菌pgk亚单位抗原具有良好的抗原性,抗体检测灵敏度达到1∶4 000,同时表现良好的特异性。     

镉胁迫下钝化剂对菠菜镉吸收累积及土壤微生物群落结构的影响

为了探究镉（Cd）胁迫下不同钝化剂对菠菜Cd吸收转运及根际微生物群落结构的影响,设置不施钝化剂（CK）、单施纳米羟基磷灰石（nHAP）、单施巯基生物炭（TMB）、配施纳米羟基磷灰石+巯基生物炭（HPTB）4个处理,比较各处理的土壤微生物群落结构、土壤化学性质与菠菜生物量及Cd含量。结果表明,各钝化剂处理下菠菜生物量均增加,Cd含量均降低;不同钝化剂对土壤主要优势菌群的组成没有显著影响,但会改变细菌和真菌的相对丰度。主成分分析表明,nHAP对细菌群落结构影响较大,对真菌群落结构影响较小。冗余分析发现,pH是影响细菌群落结构的主要因子,全磷含量是影响真菌群落结构的主要因子。综上所述,单施nHAP能够促进菠菜生长,降低Cd含量,且对微生物群落结构的影响较小。