H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法的建立与应用

为了建立适用于临床诊断的H1N1亚型猪流感病毒快速检测方法,本研究根据GenBank已登录的H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因序列设计RT-PCR扩增引物,以H1N1亚型猪流感病毒、H3N2亚型猪流感病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒为试验对照,通过优化RT-PCR反应条件和反应体系,建立了H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法。同时,运用H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法和本研究建立的方法对165份猪病料样品进行了对比验证。结果表明,本研究建立的H1N1亚型猪流感病毒双重RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、重复性,所扩增的目的基因片段大小分别为428 bp和678 bp左右,可检出最小基因组RNA浓度为2.9×10-5μg/μL。本研究建立的方法和H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法均从同一份猪肺脏样品中检测出H1N1亚型猪流感病毒,其余样品中均未检出H1N1亚型猪流感病毒,两种方法符合率为100%。本研究建立的方法适用于H1N1亚型猪流感病毒双基因定型检测,可在H1N1亚型猪流感病毒流行病学调查和临床诊断中应用。     

Cloning and Characterization of a Salt Tolerance-Associated Gene Encoding Trehalose-6-Phosphate Synthase in Sweetpotato

Trehalose plays an important role in metabolic regulation and abiotic stress tolerance in a variety of organisms. In plants, its biosynthesis is catalyzed by two key enzymes： trehalose-6-phosphate synthase（TPS） and trehalose-6-phosphate phosphatase（TPP）. In the present study, a TPS gene, named IbTPS, was first isolated from sweetpotato（Ipomoea batatas（L.） Lam.） cv. Lushu 3 by rapid amplification of cDNA ends（RACE）. The open reading frame（ORF） contained 2 580 nucleotides encoding 859 amino acids with a molecular weight of 97.433 kDa and an isoelectric point（pI） of 5.7. The deduced amino acid sequence showed high identities with TPS of other plants. Real-time quantitative PCR analysis revealed that the expression level of IbTPS gene was significantly higher in stems of Lushu 3 than in its leaves and roots. Subcellular localization analysis in onion epidermal cells indicated that IbTPS gene was located in the nucleus. Transgenic tobacco（cv. Wisconsin 38） plants over-expressing IbTPS gene exhibited significantly higher salt tolerance compared with the control plant. Trehalose and proline content was found to be significantly more accumulated in transgenic tobacco plants than in the wild-type and several stress tolerance related genes were up-regulated. These results suggest that IbTPS gene may enhance salt tolerance of plants by increasing the amount of treahalose and proline and regulating the expression of stress tolerance related genes.     

香橼优良单株半同胞家系子代抗寒性研究

在南京六合地区对3年生24个香橼优良单株半同胞家系子代进行抗寒性测定研究,结果表明家系子代间抗寒性存在着显著的差异。田间观测-11℃自然低温下春江4#和香橼4#的抗寒性最强,受冻株率分别为86.67%和100%,平均受冻级别均为Ⅰ级,耐寒指数均为2.00;新世纪8#、春江7#和新世纪2#的抗寒性最差,受冻株率均为100%,平均受冻级别均达Ⅲ级,耐寒指数均大于3.00。室内抗寒力测定供试家系子代的半致死温度在-14.84℃～-7.05℃之间。春江4#和香橼4#的抗寒力最强,半致死温度分别为-14.84℃和-13.94℃;春江7#和新世纪2#的抗寒力最差,半致死温度分别为-7.91℃和-7.05℃。抗寒性评估结果一致。根据半致死温度,结合田间抗寒性观测,供试香橼家系子代抗寒性评估排序为春江4#>香橼4#>春江6#>春江5#>新世纪9#>新世纪10#>新世纪3#>香橼1#>新世纪7#>香橼7#>新世纪8#>香橼6#>香橼5#>春江3#>新世纪4#>新世纪6#>香橼2#>春江8#>新世纪5#>春江1#>新世纪1#>春江2#>春江7#>新世纪2#。     

硬水抑制一品红生长的主因子初探

硬水显著抑制一品红生长。开花时浇硬水的植株株高、枝长、花径、冠幅显著小于浇反渗纯净水的植株,两者基质的pH值相似(硬水、纯水分别为7.16、7.11),但是电导率差异显著(硬水、纯水分别为2.2、1.1ms/cm)。基质起始pH值显著影响盆栽基质的pH值和一品红生长,在5.1~5.8范围内随着基质起始pH值的升高一品红生长量增加,基质pH值也增加到5.6~6.7。水源pH值调整对盆栽基质的pH值和一品红生长也有影响,但是幅度较小。初步推断,硬水主要通过盐分积累抑制一品红生长。     

巴东长江两岸旱地土壤质量评价

采集了100个样地的土壤,选取土壤pH值、有机质、碱解氮、有效磷、速效钾等评价因子,再将各属性值分级标准化,采用修正的内梅罗公式对采样区域的土壤质量进行评价,结果表明,长江以北地区的土壤质量属一般水平,主要限制因子为土壤的速效磷;长江以南地区的土壤质量属肥沃水平。     

恩施州藤茶基地土壤质量评价

[目的]评价恩施州藤茶种植基地土壤质量。[方法]选取土壤pH值、有机质、碱解氮、有效磷、速效钾等肥力因子,再将各属性值分级标准化,采用修正的内梅罗公式对采样区域的土壤质量进行评价。[结果]藤茶基地土壤质量总体状况良好,土壤肥力基本达到肥沃水平,宜于藤茶的生长。[结论]藤茶基地土壤肥力肥沃,但土壤有酸化现象出现,需采取相应措施予以解决。     

融合注意力机制的Cascade R-CNN田间害虫检测方法

为解决测报灯采集图像中害虫依赖人工识别及统计结果可靠性低和准确性差的问题,本研究提出一种改进型Cascade R-CNN田间害虫检测算法。该算法以Cascade R-CNN为基础框架,采用ResNeSt-50作为主干网络,融合了跨通道注意力机制;使用统一目标检测头（unifying object detection heads with attentions,DyHead）,并融合尺度感知、空间位置感知和任务感知。此外,采用简单复制-粘贴（simple copy-paste,SCP）方法进行了数据增强。研究共采集到20类害虫总计1 500张图像,制作了符合MS COCO格式（microsoft common objects in context 2017, MS COCO 2017）的测报灯田间害虫数据集。结果显示,本研究提出的方法的F1分数（F1-score）达到了86.2%。当交并比（intersection over union,IoU）为0.5时,其F1-分数与经典Cascade R-CNN、Faster R-CNN和YOLOv4相比,分别提升了2.8、5.8和8.2个百分点。...     

核桃植株挥发性气体化学成分分析

对植物活体采用动态顶空套袋采集法以及热脱附、GC-MS等措施,成功地采集和分析了核桃在自然状态下的气体挥发物成分,共确定出47种化合物,占总检出量的98.6%,其中主要成分(依据相对含量)为萜烯类(79.23%)、烃类(8.85%)、和酯(7.47%)类化合物。其中主要成分中包括了柠檬烯这种具有化感潜力的物质,因此核桃气体挥发物也具有化感作用潜力。     

不同施氮量对旱地不同品种冬小麦氮素累积、运输和分配的影响

通过田间试验研究了西北旱地4个主要冬小麦品种在不同供氮水平下对氮素的吸收、累积和转移特性。结果表明,增施氮肥显著地促进了小麦地上部分氮素累积总量,子粒氮素累积量在施氮量180.kg/hm2时最高,再增加氮肥用量子粒氮素累积量降低;施氮明显增加了收获时茎秆氮素的残留量。不同品种间氮素累积量差异显著,其中小偃22最高,其后依次为陕253、小偃503和陕229;小偃22的氮肥利用率、氮肥农学效率和氮肥生理效率均高于其它几个小麦品种。不同器官相比,开花前氮素主要累积在叶片中,茎秆的累积量在开花期达到最大。不同部位氮素转移效率为叶片穗茎秆;叶、茎、穗氮素转移效率存在基因型差异。     

孕鼠暴露双酚A对仔鼠存活率、生殖激素及相关基因的影响

为了研究孕鼠在孕期暴露双酚A（bisphenol A,BPA）对仔鼠生殖激素及相关基因的影响,试验将40只昆明孕鼠随机分为A、B、C、D共4组,每组10只。其中A组为对照组,饲喂普通鼠粮;B、C、D组孕鼠整个妊娠期（妊娠1 d至分娩）分别按每只鼠每天50、500、2 500 mg/kg体重给予BPA,待孕鼠自然分娩,观察记录仔鼠死亡情况。至仔鼠性成熟（56日龄）剖杀仔鼠,摘取睾丸或卵巢称重并计算脏器指数,HE染色观察卵巢或睾丸组织结构的变化,ELISA试剂盒分析仔鼠血清睾酮（T）、促卵泡素（FSH）及雌二醇（E₂）水平,免疫组织化学方法检测仔鼠睾丸或卵巢Bax、Bcl-2蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测仔鼠睾丸StAR、CYP11a或卵巢AMH、Kitlg mRNA表达。结果显示,孕鼠暴露BPA极显著增加了仔鼠死亡率（P<0.01）,显著降低了仔鼠睾丸重（P<0.05）。ELISA检测结果表明,孕鼠暴露BPA极显著降低了仔鼠T（♂）及FSH（♀）含量（P<0.01）,极显著升高了仔鼠（♀） E₂水平（P<0.01）。HE染色结果显示,随BPA剂量增加,仔鼠睾丸组织损伤严重,间质细胞减少;卵巢组织结构随BPA剂量增大,空泡逐渐增多,黄体颗粒数量逐渐减少。免疫组化结果显示,孕鼠暴露BPA增加了仔鼠睾丸或卵巢组织中Bax阳性蛋白表达,减少了Bcl-2阳性蛋白表达,显著降低了雄性仔鼠StAR mRNA表达量（P<0.05）;B、D组雄性仔鼠CYP11a mRNA表达量极显著降低（P<0.01）,而C组CYP11a mRNA表达量极显著升高（P<0.01）;C、D组雌鼠Kitlg mRNA表达极显著降低（P<0.01）,AMH mRNA表达量显著升高（P<0.05）。本试验结果表明,孕鼠妊娠期暴露不同剂量BPA增加了仔鼠死亡率,扰乱了生殖激素平衡和睾丸/卵巢中相关凋亡蛋白及生殖基因表达。